Комплементарные подходы к исследованию потока митофагии в β-клетках поджелудочной железы

В этом протоколе описаны два метода количественного анализа митофагии в β-клетках поджелудочной железы: во-первых, комбинация проницаемых для клеток митохондриально-специфических красителей, и, во-вторых, генетически кодируемый репортер митофагии. Эти два метода дополняют друг друга и могут быть применены в зависимости от конкретных потребностей, что обеспечивает гибкость и точность в количественном контроле качества митохондрий.

Наш протокол описывает два взаимодополняющих метода изучения потока бета-клеток митофагии с одноклеточным разрешением с помощью проточной цитометрии. Протокол mt-Keima использует генетический репортер митофагии, в то время как протокол MtPhagy сочетает в себе три флуоресцентных красителя, что позволяет легко экстраполировать его на трудно трансфицируемые клетки в образцах человека. Оценка митофагии с использованием традиционных биохимических подходов и методов визуализации является трудоемкой и сложной задачей.

Таким образом, важно разработать новые, надежные и эффективные методы изучения потока митофагии в бета-клетках. Как метод mt-Keima, так и метод MtPhagy являются количественными оценками, которые эффективны для изучения потока митофагии в бета-клетках поджелудочной железы. Таким образом, лаборатория Сулейманпура фокусируется на различных механизмах, которые приводят к недостаточности бета-клеток поджелудочной железы и диабету.

И мы уделяем особое внимание различным аспектам жизненного цикла митохондрий, включая митофагию, чтобы понять, как дефекты митохондриальной функции приводят к развитию диабета.