October 27th, 2023
Настоящий протокол содержит подробное описание эффективного выделения внеклеточных пузырьков мочи с использованием функционализированных магнитных шариков. Кроме того, он включает в себя последующие анализы, включая вестерн-блоттинг, протеомику и фосфопротеомику.
Мы работаем над открытием биомаркеров на основе внеклеточных везикул. Одним из важных шагов является их эффективная и избирательная изоляция. EVtrap, который основан на разделении на основе магнитных шариков, действительно может помочь нам, обеспечивая высокую пропускную способность, прост в использовании, в частности, прост в клиническом применении.
Мы использовали этот протокол для обнаружения белков и фосфопротеиновых биомаркеров для различных заболеваний, таких как рак молочной железы, рак почек и болезнь Паркинсона. Этот биомаркер получают из биожидкости. Электромобили потенциально могут быть использованы для жидкостной биопсии, что может еще больше улучшить клиническую диагностику и лечение.
В настоящее время наиболее часто используемыми методами выделения внеклеточных везикул являются ультрацентрифугирование и осаждение, но эти методы ограничены совместным выделением загрязняющих веществ и также низкой эффективностью. Таким образом, наш метод EVtrap обеспечит более эффективный способ изоляции электромобилей, что позволит использовать более воспроизводимый и чувствительный метод, а также принесет пользу последующему анализу. Мы работаем над двумя вещами.
Во-первых, мы продолжаем развивать методы и протоколы изоляции электромобилей и нисходящий анализ, в частности, анализ на основе массового резервного копирования. Во-вторых, мы изучаем различные варианты применения в клинической области из-за преимущества EVtrap.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Этот протокол описывает эффективное выделение внеклеточных везикул (ВК) из мочи с использованием функционализированных магнитных перлин. Он также подробно описывает последующие анализы, такие как вестерн-блоттинг, протеомика и фосфопротеомика, которые необходимы для открытия биомаркеров.
Efficient and selective isolation of extracellular vesicles (EVs) from biofluids is a critical inflection point for proteomics-driven biomarker discovery in biopharma R&D. This chemical affinity-based magnetic bead protocol enables high-yield, reproducible EV isolation, directly supporting quantitative proteomic and phosphoproteomic analyses essential for early disease detection and target validation. The method enhances predictive confidence in translational biomarker pipelines and supports risk-adjusted portfolio advancement.
This EV isolation protocol integrates at the interface of early discovery and translational research, bridging sample preparation with quantitative proteomics and phosphoproteomics analysis.