Дистанционная активация нейронов в сочетании с автоматическим забором крови для индуцирования и измерения циркулирующего лютеинизирующего гормона у мышей
August 25th, 2023
Пульсация лютеинизирующего гормона (ЛГ) является отличительным признаком репродуктивной функции. Мы описываем протокол удаленной активации определенных популяций нейронов, связанных с серийным автоматизированным сбором крови. Этот метод позволяет синхронизировать гормональную модуляцию, мультиплексировать и минимизировать манипулятивные эффекты на уровнях ЛГ у сознательных, свободно движущихся и непотревоженных животных.
Наша цель – понять роль специфических популяций нейронов в регуляции пульсирующей секреции лютеинизирующего гормона. Для этого нам необходим точный контроль распределения, идентичности и активности нейронов в сочетании с последовательным сбором образцов крови, не беспокоя и не подвергая животных стрессу. Современные методы сбора последовательных образцов крови у мышей, находящихся в сознании, ограничены отрезками хвостов, требуют длительного периода смены и восприимчивы к манипуляциям человека и стрессам окружающей среды.
Автоматизированная инфузия и забор крови могут проводиться без присутствия исследователей, что снижает стресс и позволяет зафиксировать гормональные изменения у мышей, находящихся в сознании, свободно двигающихся и непотревоженных. Этот метод является ценным активом для исследований в области неврологии, поскольку он обеспечивает надежную систему поддержки. Мичиганский центр метаболического фенотипирования мышей предлагает автоматизированные эксперименты по инфузии и широкому выборочному анализу в качестве основной услуги.
Обзор
Это исследование изучает роль определенных нейрональных популяций в регулировании пульсирующей секреции лютеинизирующего гормона (ЛГ). Авторы представляют протокол, который позволяет автоматизированное взятие крови и активацию нейронов у бодрствующих и не нарушенных животных, что позволяет точно контролировать гормональные изменения без стресса, связанного с вмешательством человека.
Ключевые компоненты исследования
Область науки
- Нейронаука
- Эндокринология
- Автоматизированное физиологическое монитирование
Фон
- Пульсирующая секреция лютеинизирующего гормона (ЛГ) необходима для репродуктивной функции.
- Существующие методы взятия крови у бодрствующих мышей ограничены и вызывают стресс.
- Автоматизированные техники могут уменьшить стресс у животных, улучшая качество данных.
- Понимание нейронального контроля над высвобождением гипоталамических гормонов важно для исследований репродуктивного здоровья.
Цель исследования
- Разработать метод для дистанционной активации нейронов, связанных с секрецией ЛГ.
- Обеспечить последовательное взятие крови у бодрствующих мышей без стресса.
- Улучшить надежность мониторинга гормонов в нейронаучных экспериментах.
Использованные методы
- Для манипулирования нейрональной активностью использовалась стереотаксическая инъекция аденовирусов, ассоциированных с гепатитом (AAV) в мозг.
- В исследовании использовались бодрствующие, свободно передвигающиеся мыши для физиологических измерений.
- Для уменьшения вмешательства человека применялись автоматизированные системы взятия крови.
- Процедуры включали тщательные хирургические методы для имплантации катетеров для артериального и венозного доступа.
Основные результаты
- Разработанный протокол успешно позволил контролировать пульсацию ЛГ и отклик на нейрональную активность.
- Автоматизированное взятие образцов минимизировало эффекты стресса, улучшив целостность данных.
- Результаты дают представление о динамике гормональной модуляции через направленный нейрональный контроль.
Выводы
- Это исследование демонстрирует эффективный метод для исследования нейронального контроля над эндокринными функциями.
- Подход позволяет лучше понять регулирование ЛГ, что имеет значения для исследований репродуктивного здоровья.
- Способность метода захватывать гормональные изменения у не нарушенных животных значительно способствует нейронаучным методологиям.
