Высокоскоростной метод гомогенизации с помощью магнитной сепарации для крупномасштабного производства везикул, полученных из эндосом
January 26th, 2024
В данной работе мы описываем метод высокоскоростной гомогенизации с помощью магнитной сепарации для крупномасштабного производства нановезикул, полученных из эндосом, как нового типа имитаторов экзосом (ЭМ), которые имеют то же биологическое происхождение и сходную структуру, морфологию и белковый состав нативных внеклеточных везикул (ВВ).
В этом исследовании мы пытаемся удовлетворить критическую неудовлетворенную потребность в исследовании экзосом, которая заключается в разработке крупномасштабного и воспроизводимого метода производства миметики экзосом. Из-за понятия нативных уклонений, экзосомные миметики, EMS, были получены в качестве суррогатов с помощью таких методов, как реальное исключение и фильтрация на основе ультрацентрифугирования. Конечно, большинство миметиков экзосом происходит от прямого исключения целых клеток, которые демонстрируют минимальные биологические функции, но неизбежно контаминируются клеточным мусором и органеллами.
Внеклеточные везикулы привлекли значительное внимание в биомедицинских исследованиях, особенно в лечении заболеваний. Тем не менее, традиционные методы изоляции электромобилей, такие как сверхчувствительная фильтрация, внутреннее исключение, катаментальная глификация, начинаются с низкой производительности, низкой производительности плуга и требуют дорогостоящего и инженероемкого производственного оборудования, которое не может удовлетворить клинический спрос на электромобили. Наше исследование предоставило простой и недорогой метод сканирования производства миметиков экзосом.
Мы воспользовались уникальным биологическим открытием, что магнитные наночастицы могут быть эндонизированы только в клеточных эндосомах, а не в других органеллах. Таким образом, мы можем сформулировать эндосомы в однородную наносескозу. Этот метод эффективно улучшает EME и снижает затраты.
Обзор
Это исследование посвящено решению задачи производства экзосомических миметиков в больших масштабах, преодолевающее ограничения традиционных методов изоляции внеклеточных везикул (ВВ). Представлен новый подход с использованием магнитной сепарации и высокоскоростного гомогенизации, повышающий выход и экономическую эффективность, при этом достигаются аналогичные структуры и составы белков по сравнению с нативными ВВ.
Основные компоненты исследования
Область исследования
- Экзосомический миметики и их производство
- Клеточная биология и исследование внеклеточных везикул
- Биомедицинские применения внеклеточных везикул
Бакграунд
- Необходимость в воспроизводимом и масштабируемом производстве экзосомических миметиков
- Проблемы, связанные с традиционными методами изоляции
- Растущая важность внеклеточных везикул в лечении заболеваний
Используемые методы
- Магнитные наночастицы для маркировки эндосомы
- Протоколы культуры клеток и высокоскоростной гомогенизации
- Характеристика нановезикул с помощью NTA и ТЭМ
Основные результаты
- Успешная изоляция эндосомо-производных нановезикул (EM)
- EM продемонстрировали структуру, похожую на везикулы, и размер, сопоставимый с нативными ВВ
- Демонстрируется аналогичный состав белков и минимальное загрязнение плазматической мембраны
Выводы
- Метод обеспечивает масштабируемое решение для производства экзосомических миметиков
- Результаты способствуют продвижению исследований ВВ и их применений в биомедицине
