Выделение мононуклеарных клеток периферической крови человека из охристых оболочек с помощью высокопроизводительного иммуномагнитного разделения шариков
19 июля 2024 г.
В этом протоколе подробно описывается высокопроизводительный, совместимый с автоматизацией метод выделения мононуклеарных клеток периферической крови человека для биобанкинга и других целей.
Выделение мононуклеарных клеток периферической крови, также известных как PBMC, обычно является длительным и ручным процессом. Мы увидели альтернативный метод, который был бы быстр в реализации и способен обрабатывать большое количество образцов. Наш протокол предлагает автоматизированный метод с высокой пропускной способностью, обеспечивающий согласованность и предотвращающий выгорание технических специалистов.
Мы также подробно описываем наш метод, совместимый со средней пропускной способностью, который можно использовать во время простоя оборудования. Этот вариант со средней пропускной способностью является более бюджетной альтернативой для других лабораторий. Биобанк теперь может обрабатывать больше образцов с тем же количеством техников.
Это увеличит размер коллекции образцов, а также ее разнообразие, что позволит проводить будущие исследования и улучшить уход за пациентами.
Обзор
В данном исследовании представлен высокопроизводительный автоматизированный метод выделения мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК) человека для повышения эффективности и разнообразия биобанкинга. Протокол снижает нагрузку на технический персонал при сохранении высокой жизнеспособности клеток.
Основные компоненты исследования
Область исследования
- Клеточная биология
- Биобанкинг
- Автоматизация лабораторных методов
Теоретические основы
- Традиционные методы выделения PBMC требуют значительных затрат времени и трудоемки.
- Автоматизированные методики позволяют оптимизировать рабочие процессы и расширить разнообразие образцов.
- Растет потребность в экономически эффективных решениях для лабораторных условий.
Используемые методы
- Автоматизированные протоколы выделения со средней пропускной способностью
- Мононуклеарные клетки периферической крови человека
- Центрифугирование, магнитная сепарация и автоматический подсчет клеток
Основные результаты
- Автоматизированные методы продемонстрировали сравнимую с ручными методами жизнеспособность и общее количество клеток.
- Автоматизация позволила обработать большее количество образцов без значительных различий в жизнеспособности.
- Средняя жизнеспособность клеток превышала 90% для PBMC, обработанных в течение пяти дней.
Выводы
- В исследовании успешно продемонстрирован эффективный и надежный автоматизированный метод выделения PBMC.
- Данное достижение имеет решающее значение для совершенствования процессов биобанкинга и исследований пациентов.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для отрасли
Высокопроизводительное иммуномагнитное разделение PBMC с помощью микросфер позволяет решить проблемы масштабируемости и воспроизводимости в ранних этапах поиска и трансляционных исследованиях. Данный рабочий процесс позволяет биобанкам и научно-исследовательским группам обрабатывать более крупные и разнообразные наборы образцов, сохраняя при этом высокую жизнеспособность клеток и стабильное распределение популяций. Этот подход обеспечивает надежное выполнение последующих анализов, повышая прогностическую точность и операционную эффективность на всех этапах процесса разработки.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранний поиск и валидация мишеней
- Обеспечивает быстрое и воспроизводимое выделение PBMC для исследований, основанных на проверке гипотез.
- Поддерживает функциональную валидацию мишеней, обеспечивая получение популяций иммунных клеток с высокой жизнеспособностью.
- Способствует снижению биологических рисков за счет стандартизированной подготовки образцов.
- Повышает прогностическую достоверность при иммунном профилировании и анализе сигнальных путей на ранних этапах.
Скрининг и разработка анализа
- Обеспечивает получение валидированных препаратов PBMC, подходящих для проточной цитометрии, иммуноанализов и геномных исследований.
- Повышает воспроизводимость и стандартизацию анализа при проведении множества серий и участии разных операторов.
- Обеспечивает масштабируемость рабочих процессов скрининга за счет увеличения пропускной способности образцов и снижения вариабельности, связанной с ручными операциями.
- Поддерживает надежную оценку соединений в анализах на основе иммунных клеток.
Трансляционные и доклинические исследования
- Обеспечивает получение популяций иммунных клеток, релевантных заболеванию, для поиска и валидации биомаркеров.
- Поддерживает целостность образцов для лонгитюдных и многоцентровых исследований.
- Позволяет принимать обоснованные с учетом рисков решения о продвижении этапов исследования за счет обеспечения стабильного качества и жизнеспособности клеток.
- Обеспечивает трансляционную преемственность от этапа поиска до доклинической валидации.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данный метод выделения PBMC на основе иммуномагнитных микросфер легко интегрируется в работу на всех этапах — от первичного поиска до доклинических исследований, поддерживая как ручные, так и автоматизированные рабочие процессы.
- Открытия в биологии: Стандартизирует выделение PBMC для проверки гипотез и исследования сигнальных путей.
- Скрининг: Обеспечивает получение воспроизводимых клеточных препаратов с высокой жизнеспособностью для разработки методов анализа и скрининга соединений.
- Аналитика: Позволяет проводить количественную оценку концентрации клеток, их жизнеспособности и распределения популяций для надежного анализа данных.
- Трансляционные исследования: Сохраняет качество образцов для сопоставления биомаркеров и проведения исследований, имеющих значение для понимания заболеваний.
- Корпоративное использование: Предлагает гибкие, масштабируемые протоколы, адаптируемые к различным требованиям по производительности и бюджету.
Операционное и корпоративное воздействие
- Научная ценность: повышает достоверность прогнозов и снижает механистическую неопределенность в исследованиях иммунных клеток.
- Операционная ценность: улучшает стандартизацию, воспроизводимость и масштабируемость рабочих процессов выделения PBMC.
- Стратегическая ценность: оптимизирует процесс принятия решений о продолжении или прекращении разработок (go/no-go) и эффективность использования капитала за счет возможности обработки большего количества и более разнообразных образцов.
- Влияние на портфель: способствует приоритизации с учетом рисков и продвижению программ по поиску и разработке средств, связанных с иммунными ответами.
Особенности реализации
- Требуются технические навыки в области иммуномагнитного разделения и автоматизированного подсчета клеток.
- Необходим доступ к совместимому оборудованию как для ручных, так и для автоматизированных рабочих процессов.
- Требуется межкомандная стандартизация протоколов для обеспечения воспроизводимости.
- Метод адаптируемый под различные объемы образцов и потребности в пропускной способности разных лабораторий.
- Выход продукта снижается при задержке обработки; оптимальные результаты достигаются в течение 24 часов после сбора.
