ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Размножение α-синуклеина: интраназальное введение при болезни Паркинсона

<ol><li>Tysnes, O. B., Storstein, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neural+Transm+%28Vienna%29%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of Parkinson's disease.</a> J Neural Transm (Vienna). 124 (8), 901-905 (2017).</li>
<li>Goedert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-synuclein+and+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Alpha-synuclein and neurodegenerative diseases.</a> Nature Rev Neurosci. 2, 492-501 (2001).</li>
<li>Conway, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acceleration+of+oligomerization%2C+not+fibrillization%2C+is+a+shared+property+of+both+alpha-synuclein+mutations+linked+to+early-onset+Parkinson%27s+disease%3A+implications+for+pathogenesis+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Acceleration of oligomerization, not fibrillization, is a shared property of both alpha-synuclein mutations linked to early-onset Parkinson's disease: implications for pathogenesis and therapy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97 (2), 571-576 (2000).</li>
<li>Braak, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staging+of+brain+pathology+related+to+sporadic+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Staging of brain pathology related to sporadic Parkinson's disease.</a> Neurobiol Aging. 24 (2), 197-211 (2003).</li>
<li>Braak, H., Rüb, U., Gai, W. P., Del Tredici, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Idiopathic+Parkinson%27s+disease%3A+possible+routes+by+which+vulnerable+neuronal+types+may+be+subject+to+neuroinvasion+by+an+unknown+pathogen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neural+Transm+%28Vienna%29%22%5BJournal%5D)">Idiopathic Parkinson's disease: possible routes by which vulnerable neuronal types may be subject to neuroinvasion by an unknown pathogen.</a> J Neural Transm (Vienna). 110 (5), 517-536 (2003).</li>
<li>Kordower, J. H., Chu, Y., Hauser, R. A., Freeman, T., Olanow, C. W. Lewy body-like pathology in long-term embryonic nigral transplants in Parkinson's disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKordower%2C+JH+%22Nat+Med%22">Nat Med</a>. 14 (5), 504-506 (2008).</li>
<li>Li, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+bodies+in+grafted+neurons+in+subjects+with+Parkinson%27s+disease+suggest+host-to-graft+disease+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Lewy bodies in grafted neurons in subjects with Parkinson's disease suggest host-to-graft disease propagation.</a> Nat Med. 14 (5), 501-503 (2008).</li>
<li>Luk, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathological+%CE%B1-synuclein+transmission+initiates+Parkinson-like+neurodegeneration+in+nontransgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Pathological α-synuclein transmission initiates Parkinson-like neurodegeneration in nontransgenic mice.</a> Science. 338, 949-953 (2012).</li>
<li>Desplats, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inclusion+formation+and+neuronal+cell+death+through+neuron-to-neuron+transmission+of+alpha-synuclein%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Inclusion formation and neuronal cell death through neuron-to-neuron transmission of alpha-synuclein.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (31), 13010-13015 (2009).</li>
<li>Sawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+body+disease+primate+model+with+%CE%B1-Synuclein+propagation+from+the+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Lewy body disease primate model with α-Synuclein propagation from the olfactory bulb.</a> Mov Disord. 37 (10), 2033-2044 (2022).</li>
<li>Uemura, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inoculation+of+%CE%B1-synuclein+preformed+fibrils+into+the+mouse+gastrointestinal+tract+induces+Lewy+body-like+aggregates+in+the+brainstem+via+the+vagus+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Inoculation of α-synuclein preformed fibrils into the mouse gastrointestinal tract induces Lewy body-like aggregates in the brainstem via the vagus nerve.</a> Mol Neurodegener. 13 (1), 21(2018).</li>
<li>Rey, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+transneuronal+propagation+of+alpha-synucleinopathy+triggered+in+olfactory+bulb+mimics+prodromal+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Widespread transneuronal propagation of alpha-synucleinopathy triggered in olfactory bulb mimics prodromal Parkinson's disease.</a> J Exp Med. 213 (9), 1759-1778 (2016).</li>
<li>Rey, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spread+of+aggregates+after+olfactory+bulb+injection+of+%CE%B1-synuclein+fibrils+is+associated+with+early+neuronal+loss+and+is+reduced+long+term%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol%22%5BJournal%5D)">Spread of aggregates after olfactory bulb injection of α-synuclein fibrils is associated with early neuronal loss and is reduced long term.</a> Acta Neuropathol. 135 (1), 65-83 (2018).</li>
<li>Uemura, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1-Synuclein+spread+from+olfactory+bulb+causes+hyposmia%2C+anxiety%2C+and+memory+loss+in+BAC-SNCA+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">α-Synuclein spread from olfactory bulb causes hyposmia, anxiety, and memory loss in BAC-SNCA mice.</a> Mov Disord. 36 (9), 2036-2047 (2021).</li>
<li>Saito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+body+pathology+involves+the+olfactory+cells+in+Parkinson%27s+disease+and+related+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Lewy body pathology involves the olfactory cells in Parkinson's disease and related disorders.</a> Mov Disord. 31 (1), 135-138 (2016).</li>
<li>De Luca, C. M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+RT-QuIC+seeding+activity+for+%CE%B1-synuclein+in+olfactory+mucosa+samples+of+patients+with+Parkinson%27s+disease+and+multiple+system+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Efficient RT-QuIC seeding activity for α-synuclein in olfactory mucosa samples of patients with Parkinson's disease and multiple system atrophy.</a> Transl Neurodegener. 8, 24(2019).</li>
<li>Stefani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-synuclein+seeds+in+olfactory+mucosa+of+patients+with+isolated+REM+sleep+behaviour+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Alpha-synuclein seeds in olfactory mucosa of patients with isolated REM sleep behaviour disorder.</a> Brain. 144 (4), 1118-1126 (2021).</li>
<li>Ucciferri, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scoring+central+nervous+system+inflammation%2C+demyelination%2C+and+axon+injury+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Scoring central nervous system inflammation, demyelination, and axon injury in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> J Vis Exp. (204), e65738(2024).</li>
<li>Masuda-Suzukake, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prion-like+spreading+of+pathological+%CE%B1-synuclein+in+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Prion-like spreading of pathological α-synuclein in brain.</a> Brain. 136 (Pt 4), 1128-1138 (2013).</li>
<li>Sawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-dose+intranasal+administration+of+%CE%B1-syn+PFFs+induce+lewy+neurite-like+pathology+in+olfactory+bulbs%5BTitle%5D)+AND+%22Parkinsonism+Relat+Disord%22%5BJournal%5D)">Single-dose intranasal administration of α-syn PFFs induce lewy neurite-like pathology in olfactory bulbs.</a> Parkinsonism Relat Disord. 112, 105440(2023).</li>
<li>Guo, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+administration+of+%CE%B1-synuclein+preformed+fibrils+triggers+microglial+iron+deposition+in+the+substantia+nigra+of+Macaca+fascicularis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Intranasal administration of α-synuclein preformed fibrils triggers microglial iron deposition in the substantia nigra of Macaca fascicularis.</a> Cell Death Dis. 12 (1), 81(2021).</li>
<li>Macdonald, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assembly+of+%CE%B1-synuclein+and+neurodegeneration+in+the+central+nervous+system+of+heterozygous+M83+mice+following+the+peripheral+administration+of+%CE%B1-synuclein+seeds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">Assembly of α-synuclein and neurodegeneration in the central nervous system of heterozygous M83 mice following the peripheral administration of α-synuclein seeds.</a> Acta Neuropathol Commun. 9 (1), 189(2021).</li>
<li>Abdelmotilib, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1-Synuclein+fibril-induced+inclusion+spread+in+rats+and+mice+correlates+with+dopaminergic+Neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">α-Synuclein fibril-induced inclusion spread in rats and mice correlates with dopaminergic Neurodegeneration.</a> Neurobiol Dis. 105, 84-98 (2017).</li>
<li>Tarutani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+fragmented+pathogenic+%CE%B1-Synuclein+seeds+on+prion-like+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The effect of fragmented pathogenic α-Synuclein seeds on prion-like propagation.</a> J Biol Chem. 291 (36), 18675-18688 (2016).</li>
<li>Taguchi, T., Ikuno, M., Yamakado, H., Takahashi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+model+for+prodromal+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Animal model for prodromal Parkinson's disease.</a> Int J Mol Sci. 21 (6), 1961(2020).</li>
<li>Bousset, L., Brundin, P., Böckmann, A., Meier, B., Melki, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+efficient+procedure+for+removal+and+inactivation+of+alpha-Synuclein+assemblies+from+laboratory+materials%5BTitle%5D)+AND+%22J+Parkinsons+Dis%22%5BJournal%5D)">An efficient procedure for removal and inactivation of alpha-Synuclein assemblies from laboratory materials.</a> J Parkinsons Dis. 6 (1), 143-151 (2016).</li>
<li>Fenyi, A., Coens, A., Bellande, T., Melki, R., Bousset, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+efficacy+of+different+procedures+that+remove+and+disassemble+alpha-synuclein%2C+tau+and+A-beta+fibrils+from+laboratory+material+and+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Assessment of the efficacy of different procedures that remove and disassemble alpha-synuclein, tau and A-beta fibrils from laboratory material and surfaces.</a> Sci Rep. 8, 10788(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Флуоресцентный микроскоп "все в одном" BZ-X710</td><td>KEYENCE</td><td>N/A</td><td>Универсальный микроскоп</td></tr><tr><td>Ампициллин Натриевая соль</td><td>Nacalai tesque</td><td>02739-32</td><td></td></tr><tr><td>Bioruptor II</td><td>Sonicbio</td><td>BR2006A</td><td>Ультразвуковой аппарат водяной бани.</td></tr><tr><td>Тартрат буторфанола</td><td>Meiji Seika Pharma</td><td>WAK-52850</td><td></td></tr><tr><td>Целлюлозная трубка</td><td>MISUMI</td><td>UC20-32-100</td><td></td></tr><tr><td>DeepWellMaximizer</td><td>TAITEC</td><td>MBR-022UP</td><td>Шейкер</td></tr><tr><td>DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)</td><td>BioDynamics Laboratory Inc.</td><td>DS255</td><td>Компетентная клетка</td></tr><tr><td>Entellan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>107961</td><td>Быстросъемный монтажный материал для микроскопии</td></tr><tr><td>Graefe Extra Fine Щипцы изогнутые зубчатые</td><td>FST</td><td>11152-10&nbsp;</td><td>щипцы</td></tr><tr><td>Закаленные тонкие ножницы</td><td>FST</td><td>14090-09</td><td>ножницы</td></tr><tr><td>Histofine Простое окрашивание мыши MAX-PO (R)</td><td>Nichirei Bioscience</td><td>414341</td><td>Универсальный полимер иммунопероксидазы, анти-кролик</td></tr><tr><td>ImageJ ver 1.52p</td><td>NA</td><td>NA</td><td>https://imagej.net/</td></tr> <tr><td>innova4200</td><td>Нью-Брансуик научный</td><td>9105085</td><td>Шейкер инкубатора</td></tr><tr><td>Изопропил-&бета;- D-тиогалактопиранозид</td><td>Nacalai tesque</td><td>19742-94</td><td></td></tr><tr><td>LB бульон, Lennox</td><td>Nacalai tesque</td><td>20066-24</td><td></td></tr><tr><td>Leica EG 1150 H</td><td>Leica</td><td>14 0388 86 108</td><td>Модульный центр встраивания тканей</td></tr><tr><td>Leica TP 1020</td><td>Leica</td><td>14 0422 85108</td><td>Автоматический обработчик тканей&nbsp;</td></tr><tr><td>Медетомидин</td><td>Fuji Film</td><td>135-17473</td><td></td></tr><tr><td>Microm HM325 Rotary Microtome</td><td>Thermo Scientific</td><td>902100</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Maruishi Seiyaku</td><td>4987-211-76210-0</td><td></td></tr><tr><td>Новый гематоксилин тип G</td><td>Muto</td><td>65-9197-38</td><td>Раствор гематоксилина</td></tr><tr><td>Обычная крылатая игла для вен типа D, 25G</td><td>TERUMO</td><td>NN2332R</td><td>игла 25G</td></tr><tr><td>Ультрацентрифуга Optima TLX</td><td>Beckman Couler</td><td>8043-30-1197</td><td>Ультрацентрифуга</td></tr><tr><td>P10 пипетка</td><td>Gilson</td><td>FA10002P</td><td></td></tr><tr><td>парафином</td><td>Leica</td><td>39601095</td><td></td></tr><tr><td>параформальдегидом</td><td>Nacalai tesque</td><td>30525-89-4</td><td></td></tr><tr><td>Пероксидаза Stain DAB Kit</td><td>Nacalai tesque</td><td>25985-50</td><td></td></tr><tr><td>Pirece BCA Protein Straits Наборы для анализа белка</td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>Анализ BCA</td></tr><tr><td>pRK172</td><td>Addgene</td><td>#134504</td><td>Плазмида</td></tr><tr><td>Q-сефароза Fast Flow.&nbsp;</td><td>Цитива</td><td>17051001</td><td>Ионообменная смола</td></tr></tbody></table>

Методика интраназального введения агрегатов α-синуклеина

Technique for Intranasal Administration of &#945;-Synuclein Aggregates

На рисунке 3 показано несколько примеров агрегатов α-Syn в OB. В настоящем исследовании мы вводили агрегаты α-Syn в одностороннюю ноздрю. Две носовые полости разделены носовой перегородкой, и каждый акушер проецирует обонятельные сенсорные нейроны в каждую носовую полость отдельно. Поэтому ОБ на контралатеральной стороне можно использовать в качестве контрольного.
Патология P-α-Syn не наблюдалась у акушера на стороне лечения через 1 и 3 месяца (рис. 3А, В). Неврит-подобные агрегаты p-α-Syn Леви наблюдались в клубочках на стороне лечения через 6 и 12 месяцев. (Рисунок 3C, D, F, G). Эти агрегаты не наблюдались в OB на контрольной стороне (рисунок 3E).
Мы можем оценить патологию α-Syn путем подсчета агрегатов α-Syn или изучения размера и т. д. с помощью ImageJ (Table of Materials). Например, ранее мы подсчитывали и сообщали количество агрегатов α-Syn в этой модели20. При ПТ на стороне лечения нейритоподобные агрегаты Леви в ПТС достоверно увеличивались в течение 12 месяцев (односторонний ANOVA, за которым следовал тест Даннетта, p &lt; 0,01; Рисунок 3H). В OB на стороне управления имеется несколько агрегатов α-Syn.
Предыдущее исследование показало, что введенные PFF в мозг мыши деградировали в течение недели, а эндогенный мышиный α-Syn превращался в агрегаты α-Syn19. В настоящем исследовании увеличение патологии α-Syn с течением времени указывает на то, что эндогенный мышиный α-Syn был преобразован в агрегаты α-Syn путем однократного интраназального введения PFF. Эти результаты указывают на то, что патология α-Syn может распространяться от обонятельной слизистой оболочки к акушерству.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig01.jpg"> 
Рисунок 1: Метод введения в носовую полость мыши. (A) Мышь располагается в положении лежа на спине, голова слегка наклонена вниз. (B) Ноздри мыши обозначены желтыми наконечниками стрелок. (С, Г) Раствор фибрилла α-Syn капают в ноздрю мыши (С, красная стрелка) и быстро вдыхают (D, красные стрелки). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig01large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig02.jpg"> 
Рисунок 2: Схема шагов по получению неповрежденных обонятельных луковиц. (А) С помощью ножниц надрежьте черепную кость сагиттально и латерально (желтая пунктирная линия). (B) Полностью удалите черепную кость на обонятельных луковицах (OB). (В) Переверните голову и осторожно удалите мозг. Разорвите нервы мозга. (D) Перережьте обонятельные нервы, прикрепленные к черепной кости. (E) Весь мозг с интактными OBs. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig02large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig03.jpg"> 
Рисунок 3: P-α-Syn агрегирует в клубочках обонятельной луковицы. (A-G) P -α-Syn (EP1536Y) иммуногистохимический анализ OB на (A-D) обработанной стороне через 1, 3, 6 и 12 месяцев (1 м, 3 м, 6 м и 12 м соответственно) после интраназального введения и (E) на контрольной стороне через 12 месяцев после интраназального введения. (С, Г) Вокруг клубочков появляются нитевидные агрегаты α-Syn Леви. (Ф, Г) Увеличенные изображения представляют собой изображения нейритоподобного p-α-Syn Леви с высоким увеличением через 6 месяцев и через 12 месяцев после интраназального введения. (H) Количество нейрит-подобного отложения p-α-Syn Леви в OB на обработанной и контрольной сторонах (n = 4-5). Графики показывают среднее значение ± SEM. Односторонний ANOVA с последующим тестом Даннетта; **&lt;0.01. Эта цифра была изменена по сравнению с предыдущим отчетом20. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig03large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.</a>

Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder characterized by the presence of Lewy bodies, which are aggregates of &#945;-synuclein ...

technique-for-intranasal-administration-of-synuclein-aggregates

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Нейронауки

Болезнь Паркинсона была связана с воздействием пестицидов. Здесь мы показываем, метод для доставки пестицидов помощью желудочного зонда на нужной концентрации и метод для анализа их влияния в альфа-синуклеина накопления в кишечной нервной системы.

Устные Администрации Ротенон использованием принудительного кормления и анализ изображений Альфа-синуклеина включений в кишечной нервной системы

Метод управления препаратов интраназально пробудить мышей с целью ориентации мозга описаны. Этот метод позволяет для повторного дозирования в течение длительного периода использования интраназального введения препарата без анестезии, и нос к мозгу доставки с минимальными системными экспозиции.

Интраназального введения ЦНС терапии, чтобы Awake Мыши

Это видео демонстрирует иммуноокрашивание нейронов, обработанных агрегатами альфа-синуклеина (αS). Сначала нейроны обрабатываются αS-агрегатами. Затем они фиксируются, проникают и обрабатываются блокирующим раствором. Добавляются первичные антитела, за которыми следуют флуоресцентно меченные вторичные антитела и ядерный краситель. Затем образец монтируется и рассматривается под микроскопом.

Иммуноокрашивание нейронов, обработанных агрегатами альфа-синуклеина

Это видео демонстрирует инъекцию альфа-синуклеиновых фибрилл мыши, чтобы вызвать нейровоспаление. Фибриллы вводятся внутрибрюшинно трансгенной мыши, экспрессирующей мутировавшие белки альфа-синуклеина. Достигая центральной нервной системы, фибриллы проникают в нейроны и индуцируют агрегацию мутировавших белков. Агрегаты распространяются на соседние нейроны, микроглию и астроциты. Распознавание агрегатов запускает микроглию, которая вызывает нейровоспаление, повреждая нейроны.

Индукция нейровоспаления у мышей путем инъекции альфа-синуклеиновых фибрилл

Источник: Ullah, I., et.al. Позиционирующее устройство для размещения мышей во время интраназальной доставки миРНК в центральную нервную систему. J. Vis. Exp. (2019)В этом видео демонстрируется точная техника интраназального введения для доставки комплексов пептид-миРНК, нацеленных на нейроны, в мозг мыши с помощью специализированного устройства позиционирования. Мышей под наркозом фиксируют в положении головой вниз и вперед, чтобы оптимизировать вдыхание миРНК и предотвратить дренирование...

Интраназальная доставка миРНК в мозг мыши с помощью позиционирующего устройства

Источник: Kanazawa, T., et al. Новые методы интраназального введения под ингаляционной анестезией для оценки доставки лекарств из носа в мозг. J. Vis. Exp. (2018)В этом видео показано интраназальное введение радиоактивных меченых препаратов мышам, находящимся под наркозом, для достижения доставки лекарств от носа к мозгу. В нем объясняется, как лекарства проникают через носовой эпителий и перемещаются по нейронным путям, чтобы достичь мозга, а также как движение ресничек влияет на удержание и...

Интраназальное введение лекарств мышам с помощью пипетки и обратной канюляции для доставки лекарств через нос в мозг

Периферийные инъекции альфа-синуклеина фибрилл в брюшину или языком Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей, которые экспрессируют человеческий альфа-синуклеина с наследственной мутации A53T и люциферазы светлячка, может вызвать невропатологии, в том числе нейровоспаления , в их центральной нервной системе.

Биолюминесценция Визуализация нейровоспаления у трансгенных мышей после инокуляции периферической альфа-синуклеина фибрилл

Цель настоящего Протокола заключается в обеспечивают систему на основе ячеек, которая реплицирует формирования альфа synuclein агрегатов в естественных условиях. Внутриклеточные альфа synuclein включений в первичной нейронов порожденный интернализации и распространения экзогенных под родной микросом связанные альфа synuclein агрегатов, изолированные от пораженной альфа synuclein трансгенных мышей.

Администрации экзогенных микросом связанные альфа synuclein агрегатов для первичной нейроны как мощный ячеечная модель формирования фибрилл

Здесь мы представляем протокол с помощью устройства позиционирования мыши, которое позволяет соответствующее размещение мышей для интраназального введения мозга таргетинга пептид-siRNA формулировки, позволяющей эффективное заглушивание гена в центральной нервной системе.

Позиционирующее устройство для размещения мышей во время интраназального siRNA Доставка в центральную нервную систему

Цель этой статьи состоит в том, чтобы наметить шаги, необходимые для генерации фибриллы от мономерные альфа-нуклеин, последующего контроля качества, и использование предварительно фибриллы в естественных условиях.

Поколение альфа-нуклеин предварительно сформированные фибриллы из мономеров и использовать в естественных условиях

Этот протокол представляет распад Рэлея как мягкий процесс аэрозолизации невирусных мРНК-векторов. Региональное осаждение для аэрозольных мРНК-векторов оценивается с помощью модели Alberta Idealized Nasal Inlet (AINI). Экспрессия зелёного флуоресцентного белка (GFP) в клетках лёгких человека отражает поддержание физико-химических и биологических функций постаэрозольных мРНК-векторов.

Интраназальная доставка мРНК-полиплексов с помощью аэрозолей для расщепления Рэлея: метод in vitro для назательного отложения и функционального тестирования

Узнайте методику интраназального введения агрегатов α-синуклеина для изучения пропагации патологии при болезни Паркинсона на модели мышей. Этот простой нехирургический подход позволяет исследовать прионоподобное распространение патологии от обонятельной слизистой к луковице.

Методика интраназального введения агрегатов α-синуклеина

Больше видео