Изучение хронического воздействия ультрафиолетового излучения B на мышей

Протокол описывает исследование системных и местных кожных эффектов воздействия ультрафиолета B у мышей.

Мы исследуем системные эффекты воздействия на кожу низких доз UVB-излучения, особенно при уровнях ниже уровня, вызывающего эритему. Наш протокол позволит понять системные эффекты воздействия низких доз UVB, выходящие за рамки прямого или местного воздействия на кожу. Наш метод близко имитирует хроническое воздействие ультрафиолета B ниже уровня эритемы. Таким образом, мы можем изучать эндогенные эффекты UVB.

[Рассказчик] Для начала поместите мышь под наркозом на рабочую платформу и сбрейте от 50 до 60% ее тыльной области. После снятия шерсти с помощью крема для депиляции поместите мышь в чистую сухую клетку для восстановления с подстилкой. Дайте мышке отдохнуть в домашней клетке с едой и водой в неограниченном количестве. Для начала наденьте рубашку с длинными рукавами, брюки, лабораторный халат, закрытую обувь, двойные перчатки и лицевой щиток для обеспечения личной безопасности. Проводите ультрафиолетовое облучение B в биологическом колпаке с опущенной 10-миллиметровой крышкой из плексигласа и установленным защитным экраном. Поместите ультрафиолетовую лампу B на прозрачную камеру из плексигласа. Включите ультрафиолетовую лампу B и дайте ей поработать до тех пор, пока интенсивность не стабилизируется. Затем включите радиометр Ultraviolet X, оснащенный измерительной головкой Ultraviolet B для контроля интенсивности. Поместите очищенную экспонировочную камеру в прозрачную камеру из плексигласа с двумя камерами, в то время как ультрафиолетовая лампа включена или выключена для соответствующего ультрафиолетового или имитационного воздействия. Используйте калькулятор, чтобы определить необходимое время для воздействия на мышь нужной интенсивности ультрафиолета B. Перенесите мышь из домашней клетки в камеру экспозиции на желаемое время экспозиции. Подвергните мышь воздействию ультрафиолетовой дозы B в размере 50 миллиджоулей на квадратный сантиметр, что является субэритемной дозой. Чтобы проверить эффективность излучения, измерьте пигментацию ушей и хвостов с помощью дермального спектрофотометра. Откалибруйте спектрофотометр, установив базовую линию с помощью чистой обычной белой бумаги. После завершения калибровки расположите измерительный датчик на ухе или хвосте мыши и запишите показания интенсивности меланина. Постепенное и значительное повышение уровня меланина наблюдалось как у самцов, так и у самок мышей, подвергшихся воздействию ультрафиолетового излучения B в течение четырех недель, по сравнению с контрольной группой, что подтвердило успешную индукцию пигментации кожи.