Эффективный метод извлечения эпителия фаллопиевых труб человека для анализа отдельных клеток

1.4K просмотров

07:03 мин.

28 марта 2025 г.

10.3791/67753-v

28 марта 2025 г.

1.4K просмотров

Lauryn Ruegg¹^,² , Laura B. James-Allan¹^,² , Gabriella DiBernardo¹^,² , Christopher Ochoa¹^,²^,³ , Yan-Ruide Li⁴^,⁵ , Lili Yang²^,³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷ , Sanaz Memarzadeh¹^,²^,³^,⁷^,⁸^,⁹

¹Department of Obstetrics and Gynecology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles, ²Eli and Edythe Broad Center of Regenerative Medicine and Stem Cell Research, University of California, Los Angeles, ³Molecular Biology Institute, University of California, Los Angeles, ⁴Department of Bioengineering, University of California, Los Angeles, ⁵Department of Microbiology, Immunology and Molecular Genetics, University of California, Los Angeles, ⁶Parker Institute for Cancer Immunotherapy, University of California, Los Angeles, ⁷The Jonsson Comprehensive Cancer Center, University of California Los Angeles, ⁸The VA Greater Los Angeles Healthcare System, ⁹Department of Medical and Molecular Pharmacology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles

Этот протокол описывает однодневный метод выделения эпителиальных клеток фаллопиевых труб человека. Выделенные эпителиальные клетки могут быть покрыты в 2-мерной (2D) культуре или диссоциированы в одиночные клеточные суспензии и использованы в последующих экспериментах, включая проточную цитометрию и секвенирование РНК одиночных клеток.

Больше видео

Изоляция эпителиальных клеток

суспензия единичных клеток

секвенирование РНК единичных клеток

проточная цитометрия

механическая диссоциация

ферментативная диссоциация

EpCAM-положительные клетки

контаминация стромальными клетками

рак яичников

Chapters in this video

0:00

Introduction

1:11

Fallopian Tube Collection and Preparation for Epithelial Cell Isolation

2:06

Epithelial Cell Isolation and Dissociation

4:18

Digestion of Isolated Epithelial Cells to Obtain a Single-Cell Suspension

6:02

Representative Results