Оценка антиоксидантных и антигельминтных свойств экстрактов Tithonia diversifolia в отношении яиц желудочно-кишечной нематоды с помощью тестов in vitro

Мои исследования сосредоточены на паразитологии, сейчас изучаю природные компоненты растений для контроля внутренних паразитов у мелких жвачных. Мы хотим интегрировать традиционные знания и альтернативные методы контроля численности мелких жвачных животных в мире. Сегодня мы всё чаще используем такие технологии, как предсказательное моделирование, автоматические счётчики и молекулярные инструменты для обнаружения конкретных оповещений.

Кроме того, несколько институтов по всему миру разрабатывают прототипы вакцин против выкривлений гемонхуса. Это важный шаг вперёд. Другие используют органические двигатели для снижения зависимости от лабораторных животных, что является этически и научно ценным.

В целом, существует сильная и скоординированная глобальная инициатива по развитию диагностических инструментов и исследований, направленных на разработку инновационных и устойчивых стратегий контроля паразитов по всему миру и предотвращению лекарственной резистентности. Для начала смешайте по 30 граммов каждого образца кала с 50 миллилитрами насыщенного соляного раствора плотностью 1,2 грамма на миллилитр, чтобы подготовиться к копрофологическим анализам. Гомогенизуйте три грамма образца фекалий в 50 миллилитрах насыщенного раствора хлорида натрия и профильтруйте смесь через марлю.

Осмотрите стекло под микроскопом при увеличении в 10 раз и посчитайте яйца стронгилового типа. Вычислите количество яиц на грамм, используя заданную формулу. Фильтруйте фекалии дважды стерильной марлей.

Затем отфильтруйте полученную суспензию и перенесите её в решето. Промыйте оставшийся на решете материал дистиллированной водой и соберите промытую суспензию в трубки по 15 миллилитров. Поместите образцы в настольную центрифугу с вращающимся ротором и вращайте примерно при температуре 4 800 G в течение пяти минут при комнатной температуре.

Суспензируйте яйца и PBS и отрегулируйте концентрацию до 100 яиц на миллилитр для подготовки анализа. Подготовьте положительный контроль, растворив фенбендазол в PBS, чтобы получить 1 000 микрограммов на миллилитр. После добавления смеси экстракта и суспензии яиц добавьте примерно 100 яиц на миллилитр в каждую яме тарелки на 48 колодцах.

Основная сложность этой техники заключается в вариабельности реакции на вылупление яиц. Даже при соблюдении всех протокольных шагов вылупление может происходить в течение 48–72 часов, а в некоторых случаях — вовсе. Ингибирующий эффект экстракта Tithonia diversifolia на вылупление яиц показал дозозависимую закономерность, отражённую в значении EC50 в 521,6 микрограмм на миллилитр.

Этот результат указывает на то, что для достижения 50% ингибирования необходимы умеренные концентрации этого экстракта, что указывает на наличие биоактивных соединений с антигельминтическим потенциалом. При низких дозах от 150 до 300 микрограмм на миллилитр ингибирование было минимальным, а вариабельность оставалась низкой, что соответствовало недостаточному воздействию для вмешательства в эмбриогенез или появление личинок. Вариабельность достигла пика при промежуточной дозе 1 200 микрограмм на миллилитр, что соответствует нелинейной переходной зоне кривой отклика на дозу, где небольшие биологические или экспериментальные различия могут вызывать значительные сдвиги результата.

Это ожидается при использовании экстрактов сырых растений, содержащих несколько активных соединений. В целом результаты подтверждают антивылупленную активность Tithonia diversifolia с увеличением эффективности при высоких дозах. Рафинирование или фракционирование экстракта может повысить потенцию, и рекомендуется дальнейшие фитохимические и in vivo исследования для оценки его полезности в программах контроля паразитов.

Наши результаты показывают in vitro активность, подтверждая антипаразитарный потенциал. Они представляют собой значимое открытие и потенциальное клиническое применение для улучшения здоровья животных. Кроме того, низкозатратный и этичный подход к этому анализу подтверждают использование традиционных знаний для будущих исследований.

Наши результаты исследования предоставили основанные на доказательствах информацию о антигельминтических стратегиях, подтвердив экологически чистые компоненты для поддержки стратегий контроля по снижению зависимости от наркотиков.