Сетевая фармакология и валидация антидепрессивных механизмов Цянчжифана в модели крысы с хронической стресс-индуцированной депрессией

Это исследование направлено на изучение того, как Цянчжифан действует против депрессии, определение ключевых активных ингредиентов и понимание механизмов их действия. Это исследование заполняет пробел в понимании конкретных механизмов и активных компонентов Цянчжифана для отслеживания депрессии.

Мы изучим, как Цянчжифан влияет на иммунную систему, чтобы найти депрессию и изучить ее потенциальные новые терапевтические применения.

[Рассказчик] Для начала сконструируйте удерживающее устройство для крысы, выбрав прозрачную пластиковую трубку с диаметром и длиной, подходящими для размера крысы, что позволит крысе стоять и поворачиваться внутри, предотвращая побег. С помощью электрического дырокола для паяльника сделайте отверстия по бокам пластиковой трубки и на крышке, чтобы обеспечить правильную циркуляцию воздуха. Разделите крыс на четыре группы, убедившись, что каждая группа состоит из 10 крыс. Через час после ежедневного внутрижелудочного введения препарата осторожно поместите крыс в удерживающие устройства, исключая крыс из контрольной группы, и убедитесь, что они находятся в удобном положении. Вводите флуоксетин в дозе 2,7 мг на килограмм в день группе флуоксетин и Цянчжифан по два грамма на килограмм в день группе Цянчжифан через зонд, используя дозировку один миллилитр на 100 граммов массы тела для обоих растворов. Наполните питьевые бутылки подопытных животных чистой водой или 1%-ным водным раствором сахарозы. Помещаем каждый раствор в отдельную бутылку, затем взвешиваем флаконы. Поместите одну бутылку раствора сахарозы и одну бутылку чистой воды в каждую клетку для крыс. Один слева и один справа для свободного доступа к выпивке. Через 30 минут поменяйте положение бутылок, чтобы избежать бокового предпочтения. Через час уберите все бутылки с водой. Быстро взвесьте их, чтобы измерить значения расхода для обоих решений. Затем рассчитайте недельный коэффициент предпочтения сахарозы, используя данное уравнение. Взвешивайте крыс еженедельно в определенное время в семь утра. Для контроля изменения массы тела. Отрегулируйте освещение в боксе на открытом воздухе для равномерного распределения и четкой видимости крыс в программном обеспечении для слежения. Используйте систему отслеживания и анализа видео, чтобы разделить нижнюю поверхность ящика открытого поля на девять равных квадратных сеток, восемь из которых примыкают к стенам в качестве периферийной области и к центру в качестве центральной области. Поместите крысу в центральную область ящика в открытом поле и записывайте ее движение в течение пяти минут с помощью системы слежения. После тестирования каждой крысы очистите камеру открытого поля с 75% этанолом, чтобы удалить остаточный запах и предотвратить вмешательство в поведение следующей крысы. Введите общее расстояние выполнения заданий в открытом поле и количество записей в центральной сетке в записях испытаний в открытом поле. Возьмите прозрачный цилиндр для воды из плексигласа и наполните его водой температурой от 23 до 25 градусов по Цельсию. Регулируйте глубину воды в соответствии с весом животного, следя за тем, чтобы хвост крысы оставался на определенном расстоянии от дна. После активации камеры и системы сбора сигнала медленно поместите крыс в цилиндр с водой, сохраняя тишину на протяжении всего эксперимента. Наблюдайте и записывайте продолжительность плавающей неподвижности в течение 300 секунд. В конце сеанса сразу же выньте крыс из воды и обсушите их. После каждого сеанса заменяйте воду в цилиндре, чтобы предотвратить какое-либо влияние на следующую крысу. Access, база данных систем традиционной китайской медицины или TCMSP, база данных трав и база данных TCMID. Используйте названия восьми традиционных китайских лекарств в Цянчжифане в качестве ключевых слов для поиска активных соединений и мишеней трав. Собирайте информацию о целях из TCMSP и швейцарской базы данных прогнозирования целей. Установка значения фильтра в значение вероятности больше нуля. Теперь перейдите в базу данных GeneCards и выполните поиск по ключевому слову depression. После получения генных мишеней, связанных с депрессией, загрузите электронную таблицу, отфильтруйте показатели генов, которые выше среднего, и составьте список мишеней, связанных с депрессией. Теперь получите доступ к инструменту генерации и загрузите составные мишени, а затем файлы мишеней болезни. Нанесите на график перекрывающиеся гены между предполагаемыми мишенями соединения и мишенями для болезней. Затем загрузите изображение диаграммы. Наконец, получите доступ к базе данных String и вставьте перекрывающиеся гены, в частности список перекрывающихся целей Qiangzhifang Anti-Depression Overlaping, в диалоговое окно списка имен. Выберите homo sapiens в разделе организмов и нажмите «Поиск», а затем «Продолжить». Выберите опцию экспорта в строке заголовка и загрузите сводную таблицу Protein-Protein Interaction Network в форматах PNG и TSV. В тесте на предпочтение сахарозы через 28 дней стрессовая группа Chronic Restraint имела значительно более низкое предпочтение сахарозы, чем контрольная группа. В то время как группы, получавшие Цянчжифан и флуоксетин, показали значительно более высокие значения по сравнению с группой стресса. Прирост массы тела был значительно снижен в группе стресса с хроническим ограничением по сравнению с контрольной группой через 28 дней, но значительно увеличился в группах Цянчжифана и флуоксетина по сравнению с группой стресса. Графики движения на открытых полях показали снижение разведки центральной области в группе напряжений. В то время как обе группы лечения демонстрировали заметно более активную центральную активность. Общее расстояние, пройденное в открытом поле, не показало существенных различий между всеми группами. Время пребывания в центральной зоне также было значительно сокращено в стрессовой группе и значительно увеличено в обеих группах лечения. Кроме того, время неподвижности в тесте на принудительное плавание было выше в стрессовой группе и значительно сокращалось при обоих видах лечения.