Тест обонятельных предпочтений для измерения обонятельных гедонистических смещений в мышиных моделях депрессии

Негативный уклон в обработке эмоций является основной характеристикой депрессивных расстройств. Эта предвзятость особенно интересна для лучшего понимания физиопатологии заболевания. В данной работе мы предлагаем протокол для надежной оценки оценки врожденного запаха с использованием запахов, связанных с различной валентностью как у самцов, так и у самок мышиной моделей депрессии.

Оценка гедонистического смещения в мышиных моделях имеет важное значение как для лучшей оценки индуцированного депрессивного фенотипа, так и в качестве инструмента для исследования нейронных механизмов, стоящих за этими изменениями в распределении валентности. В целом, этот протокол открывает новые возможности для трансляционных исследований, чтобы понять механизм, лежащий в основе депрессии, и эффективность лечения. В будущем мы попытаемся расшифровать мозговые цепи, стоящие за этими нарушенными эмоциональными процессами и потенциальными механизмами, специфичными для секса, а также с действием антидепрессантов на эти пути.

Для начала подготовьте экспериментальную установку с помощью двухкамерной арены размером 45 сантиметров на 50 на 25 сантиметров с серыми стенами из плексигласа и белым полом. Разделите арену на два равных отсека размером 25 сантиметров на 45 сантиметров, используя стену из серого плексигласа размером 37 сантиметров на 25 сантиметров. Закрепите перфорированную чашку Петри клеем и поместите их на дно стенки в каждую камеру.

Затем с помощью двустороннего клея или Blu Tack закрепите каждую чашку Петри вертикально на стене арены. Затем расположите камеру на высоте двух метров над ареной, чтобы зафиксировать поведение животных и включить автоматическое отслеживание их движений на протяжении всего эксперимента. Теперь разделите мышей по крайней мере на две экспериментальные группы: контрольных мышей и мышей тестовой группы.

Перенесите каждую мышь в комнату для поведенческого тестирования за 30 минут до начала эксперимента. С помощью люксметра установите освещение на арене примерно на 40 люкс и убедитесь, что освещение распределено равномерно. Затем добавьте чистую фильтровальную бумагу размером 42,5 миллиметра в каждую из двух чашек Петри на арене.

В первый день аккуратно поместите всех мышей из одной клетки вместе на арену на 10 минут, чтобы уменьшить неофобию. В день тестирования приготовьте в стеклянном флаконе запах под химическим колпаком, используя правильное разведение. Разведите одорант в минеральном масле или дистиллированной воде в зависимости от его химических свойств.

Непосредственно перед тестированием каждой мыши используйте микропипетку с фильтрующим наконечником, чтобы собрать 200 микролитров раствора запаха под капюшоном. Вылейте раствор на фильтровальную бумагу в одной из чашек Петри. Оставьте вторую фильтровальную бумагу в другой чашке Петри необработанной.

Перенесите чашки Петри в комнату для тестирования. Затем вертикально закрепите их на стене арены. Поместите каждую мышь по отдельности на арену в центре между двумя отделениями.

Запишите поведение в течение 10 минут с помощью накладной камеры. Уберите мышь с арены после окончания периода наблюдения. Уберите запах из чашки Петри с арены.

Затем очистите арену с помощью дезинфицирующего раствора с содержанием этанола 70% и тщательно высушите ее. Выбросьте использованную фильтровальную бумагу и подготовьте следующий образец запаха для следующей мыши. Используйте программное обеспечение для автоматического слежения, чтобы записывать положение мыши на протяжении всего теста.

Определите отдельные зоны на арене для анализа. Во время привыкания все мыши проводили не менее 50 секунд как в зоне запаха, так и в контрольной зоне, что указывает на адекватную вовлеченность в задачу. Важно отметить, что мыши, подвергшиеся воздействию UCMS, проводили в зоне запаха столько же времени, сколько и контрольная группа.

Хотя в других зонах можно было наблюдать некоторую разницу. Самки контрольной группы мышей двигались значительно больше, чем самки UCMS, при контакте с мочой самцов, но не во время привыкания или воздействия ТМТ. Все показания гедонистического ответа показывают значительные различия или статистическую тенденцию между контрольной группой и женщинами UCMS.

Этот эффект также виден с помощью Глобального индекса исследования запахов, который представляет собой комбинированный показатель гедонистической и локомоторной реакции. Индекс исследования запаха положительно коррелировал с оценкой эмоциональности как для мочи самцов, так и для ТМТ у самок мышей. У самцов мышей не наблюдалось различий во время привыкания или в общем расстоянии, пройденном через тест.

Время, проведенное в зоне запаха, показывает значительное снижение исследования мочи самок и ТМТ в UCMS по сравнению с контрольной группой. Мыши UCMS значительно меньше проникают в зону запаха или имеют тенденцию к этому, а также имеют значительно меньший индекс предпочтения как для мочи самок, так и для ТМТ. Индекс исследования запаха показывает отрицательно измененную поведенческую реакцию на мочу самок и ТМТ у мышей UCMS по сравнению с контрольной группой, которая, как правило, положительно коррелирует с оценкой эмоциональности животного.