Сравнительные стратегии обнаружения убиквитинации в лизатах млекопитающих с использованием SMAD2/SMURF2 в качестве модели

948 просмотров

09:00 мин

17 апреля 2026 г.

10.3791/69321-v

17 апреля 2026 г.

948 просмотров

Убиквитинация является критически важным регулятором внутриклеточных функций белка. Здесь мы описываем два метода лизиса клеток для обнаружения уровней убиквитинации белков субстрата в клетках млекопитающих и сравниваем их эффективность при анализе уровней убиквитинации. Гиперэкспрессия белка в HEK293T клетках была вызвана временной трансфекцией, а убиквитинированные белки были обнаружены методом анализа вестерн блот.

Больше видео

SMAD2

Chapters in this video

0:00

Introduction

0:05

Ubiquitination

0:50

Preparation of cells

2:35

Cell Collection

2:59

Agarose bead preparation

3:25

Ice-bath method

3:56

Heat-treatment method

4:41

Immunoprecipitation and Ubiquitination detection

5:51

Results

7:49

Conclusion and Experimental Precautions

Related Videos