Мышиные модели эпидидимита, вызванного патогенно-ассоциированными молекулярными паттернами

Мы исследуем влияние воспаления на физиологию эпидидимиса в мужской фертильности. Точная отдельная инъекция индукторов воспаления без повреждений. Эпидидимальный проток в мышиных моделях требует продвинутого сочетания хирургических навыков и подготовки.

Для начала поместите анестезиированное животное в положение на хирургическом поле. С помощью электрического триммера выполните трихотомию живота мыши, чтобы полностью удалить шерсть. Затем используйте стерильный хлопок, пропитанный раствором 0,25% хлоргексидина.

А затем с алкоголем для проведения абдоминальной асепсии. С помощью скальпеля размера 15 сделайте примерно четырёхмиллиметровый вертикальный разрез с правой стороны брюшной стенки. Теперь аккуратно разрежьте кожу с помощью хирургических щипцов с наклонным тупым концом.

Затем, используя тот же скальпель, сделайте ещё один вертикальный разрез диаметром около четырёх миллиметров на брюшине сбоку от первого разреза. Аккуратно поднимите эпидидимис в яичке из брюшной полости, аккуратно нажимая на правую сторону мошонки. С помощью изогнутых хирургических щипцов аккуратно вытяните белую жировую ткань эпидидимальной отделки, чтобы локализовать начальный сегмент призрачной призрачной отделки.

С помощью белой жировой ткани эпидидимальной клетки обнажите начальный сегмент в месте разреза. Далее разместите шприц Hamilton, предварительно загруженный раствором для инъекций, под углом примерно 90 градусов параллельно сегменту номер один начального сегмента. Аккуратно введите иглу в промежуточное пространство с фаской вниз.

Затем разместите изогнутые хирургические щипцы в месте введения иглы и аккуратно зажмите эпидидимальную капсулу и иглу. Медленно нажимайте на поршень шприца, пока не будет введен весь стимулирующий раствор. Удерживая изогнутые хирургические щипцы на месте, аккуратно уберите иглу и освободите изогнутые хирургические щипцы примерно через 30 секунд.

Далее, используя белую жировую ткань эпидидимальной отделки, аккуратно возвращайте ткань яичка в брюшную полость. Определите брюшин и закройте его, сделав два шва с помощью держателя для иглы и хирургического шва размера 5-0, а разрез кожи закройте двумя швами. После операции наблюдайте за мышью, чтобы обеспечить надлежащее послеоперационное восстановление.

После анестезии поместите мышь в положение лежа на хирургическом поле. Положите указательный и большой палец под мошонку, чтобы прощупать и подтвердить положение яичек и эпидидимиса. При необходимости аккуратно массируйте боковые стороны живота в сторону мошонки, чтобы направить яички и эпидидимис в нужное положение.

С помощью электрической триммерной ручки выполните трихотомию мошонки, чтобы полностью удалить волосы, а затем продезинфекцируйте область стерильным хлопком, замоченной в растворе 0,25% хлоргексидина и затем спиртом. Указательным и большим пальцем ниже мошонки аккуратно растягайте кожу мошонки. Используя скальпель размера 15, сделайте вертикальный разрез диаметром примерно два миллиметра на медиальной части мошонки.

Теперь аккуратно переместите левое яичко и эпидидимис обратно в брюшную полость, оставьте правый яичка и эпидидимис в мошонке. При расположении указательного и большого пальцев ниже правого яичка и эпидидимиса, мягко растягайте кожу мошонки. Затем, используя хирургические щипцы с наклонным тупым концом, аккуратно открывайте и закрываете кончики над внутренней сперматической фасцией, чтобы разорвать внутреннюю семенную фасцию и вагинальную тунику.

Затем снимите давление указательного и большого пальцев и введите наклонные хирургические щипцы через отверстие в тунике влагалища к основанию мошонки. С помощью щипцов аккуратно оттягивайте дистальный эпидидимальный жир, чтобы локализовать кауду-эпидидимис. Теперь локализируйте семяводные деференсы и расположите под ним прямые хирургические щипцы.

Поставьте зажим для пинцета бульдога на семяносные деференсы, обеспечив достаточное пространство между хвостовой эпидидимисом и зажимом. Затем расположите шприц Гамильтона с раствором для инъекций под углом примерно 10–15 градусов параллельно семяводяводным сучкам и введите иглу в семяносное отделение так, чтобы фаска была обращена вверх. Аккуратно сжимайте прямые хирургические щипцы, чтобы освободить семяводные деференсы, и медленно нажимайте на поршень шприца, чтобы ввести весь раствор стимула.

Теперь убери прямые хирургические щипцы. Используя изогнутые хирургические щипцы, аккуратно зажмите область вокруг места введения иглы, затем аккуратно вынимите иглу для шприца. Примерно через 30 секунд снимите изогнутые хирургические щипцы и зажим для пинцета Bulldog, а затем аккуратно верните семявообразные деференсы в мошонку.

Далее определите вагинальную тунику и закройте её одним шовом с помощью держателя для иглы и хирургического шва размера пять-0. Указательным пальцем аккуратно втяните правое яичко и эпидидимис обратно в брюшную полость, а левый яичка и эпидидимис переместите в мошонку. Наконец, закройте разрез кожи мошонки двумя швами с помощью держателя для иглы и хирургических швов размера 5-0 и наблюдайте за мышью, чтобы обеспечить правильное послеоперационное восстановление.

Интерстициальная инъекция в начальном сегменте привела к тому, что введённый синий краситель Эванса был ограничен преимущественно первым сегментом до 30 минут после инъекции, а затем диффузировался в соседние сегменты начального сегмента и капут эпидидимиса. Внутривасальная инъекция в семяводные деференсы ограничивала синий краситель Эванса в просвете сегмента 10 до 30 минут после инъекции. Гистологические фотомикрофотографии подтвердили, что инъекции физиологического раствора не изменили морфологию эпидидимальной апидимы спустя 72 часа после обработки.

Инъекция интерстициального ЛПС в начальном сегменте вызвала интерстициальный отёк и интенсивные интерстициальные, внутриэпителиальные и внутрилюминальные иммунные клетки через 72 часа после лечения. Интевазалная инъекция ЛПС или ЛТА в кауду эпидидимис вызвала интерстициальный отёк и инфильтраты иммунных клеток в интерстициальных и внутрилюминальных компартментах через 72 часа после лечения. Отсутствие воспроизводимых животных моделей, изучающих локализованное воспаление эпидидимальной фазы и его влияние на мужскую фертильность.

Прямое региональное введение воспаления химических веществ позволяет точно анализировать специфические регионы иммунные ответы в исходах эпидидимиса.