Автоматизированное разделение HPLC с использованием LC-mate: интегрированный повторяющийся автопромплер и сборщик фракций для микромасштабной очистки

Наше исследование сосредоточено на разработке прибора, который сразу подключается к системам ВЭЖХ для автоматизации всех этих повторяющихся ручных шагов. Ручная инъекция образца и сбор фракций очень утомительны. LC-Mate предлагает кроссплатформенное автоматизированное решение для очистки образцов ВЭЖХ.

Для начала проверьте подключения растворителя между системой ВЭЖХ, LC-Mate и хроматографической колонкой, чтобы обеспечить правильные пути потока. Для проверки соединения линии передачи сигнала между УФ-детектором и LC-Mate подключите чёрный провод к красному выводу, а белый — к чёрному выводу, чтобы совпасть с полярностью аналогового сигнала. Посмотрите на дисплей LC-Mate, чтобы убедиться, что аналоговая сигнальная форма сигнала отображается.

Если форма сигнала не видна, обратите соединения проводов, подключив чёрный провод к чёрной клемме, а белый — к красному. Чтобы проверить триггерное соединение между ультрафиолетовым детектором и LC-Mate, подключите единственный конец кабеля данных к выходному порту ультрафиолетового детектора. Подключите чёрный и белый провода с другого конца кабеля к чёрному и синим клеммам триггера на LC-Mate соответственно. Затяните клеммы для надёжного соединения триггера.

Далее убедитесь, что система HPLC и система LC-Mate правильно запущена. Нажмите на значок LC Mate на интерфейсе, чтобы автоматически запустить программу самотестирования системы и инициализировать ключевые аппаратные модули. Дождитесь короткого сигнала и исчезновения сообщения самотестирования, чтобы убедиться, что инициализация завершена.

Настройте условия разделения ВЭЖХ и начните элюирование для уравновесения столбца. В тестовом интерфейсе введите объём инжекции, время элюции и время повторения, затем нажмите значок Start, чтобы запустить работу автосэмплера, коллектора дробей и HPLC. Определить возможные условия разделения, включая разрешение, время работы, время удержания, объём впрыска и длину ультрафиолетовой волны.

Выберите модуль функции Threshold слева на интерфейсе, чтобы открыть экран настройки параметров. Введите объём инжекции, время повторения, порог и время элюирования и нажмите Старт, чтобы начать автоматическую работу. Следите за индикаторами статуса.

Наблюдайте за инъекцией в процессе для подтверждения введения образца. Проверьте индикатор происходящего отделения, чтобы убедиться, что хроматографическое разделение происходит. Обратите внимание на индикатор опустошения шприца, чтобы определить, когда шприц выводит остаточную жидкость.

Чтобы выполнить сбор дробей по времени, выберите модуль сбора времени слева на интерфейсе, чтобы открыть меню параметров. Объём ввода впрыски, время повторения, время элюирования и требуемые времена сбора. Нажмите кнопку Start, чтобы запустить повторяющуюся автоматическую последовательность.

Далее выберите функциональный модуль Collect All слева на интерфейсе. Установите порог сбора для отдельного сбора всех хроматографических пиков. Для очистки трубопровода вставьте инжекторный трубопровод автопромплера в небольшой бутылку с чистым растворителем.

Выберите модуль очистки слева на интерфейсе, чтобы открыть меню параметров. Затем установите объём инжекции между нулём и 1000, а также время повторения для очистки конвейера инжекторов. Нажмите на Cleansing ниже Cleansing Complete, чтобы начать очистку трубопровода инжектора.

Отслеживайте количество циклов, чтобы отслеживать завершённые циклы стирки. Установите время очистки для очистки конвейера сбора. Нажмите на Cleansing ниже Current Pipeline, чтобы начать очистку конвейера сбора.

Отслеживайте текущий дисплей конвейера, чтобы подтвердить последовательную очистку от трубопровода 0 до конвейера 10. Включите автоматическое сохранение, чтобы система могла сохранять хроматограммы после каждого цикла элюирования. Или же нажмите кнопку «Сохранить» после удаления, чтобы вручную сохранить данные.

После ввода метаданных в диалоговое окно выберите место хранения из локального хранилища, SD-карты или внешнего универсального последовательного шинового диска. Полупрепаративное разделение ВЭЖХ с помощью LC-Mate обеспечило непрерывное и стабильное введение образца и сбор фракций при очистке 2"O-галлой-гиперозида. Мелкие примеси эффективно удалялись для получения очищенного 2"O-гляйл-гиперозида с помощью системы LC-Mate.

Непрерывная и стабильная инъекция образцов и сбор фракций также были успешно достигнуты при очистке флоридзина и трилобатина. Демонстрация того, что система LC-Mate значительно повышает операционную эффективность, значительно снижая ручное вмешательство. Относительное стандартное отклонение максимальной площади инъекции кольца составило 0,813%, что свидетельствует о отличной стабильности и воспроизводимости инъекций LC-Mate.

Эта система облегчает автоматизированную соответствующую очистку и точный сбор фракций для эффективных макромасштабных рабочих процессов ВЭЖХ. Правильный вариант сигнала, правильный выбор режима и настройка параметров критически важны для успешного применения прибора LC-Mate. Мы планируем увеличить пропускную способность канала и интегрировать новые детекторы для лучшей кроссплатформенной совместимости.