13 марта 2026 г.
Здесь мы представляем новый, простой в создании и недорогой протокол рециркуляции жилья данио-реро.
Мы разработали и протестировали доступную систему жилья с циркуляцией данио-реза для экономных исследовательских лабораторий и образовательных программ. Многие существующие системы содержания данио-рерио-рерио слишком дороги для небольших исследовательских лабораторий, поэтому мы разработали недорогую систему жилья. Для начала соберите стойку корпуса, закрепив опорные кронштейны на нужной высоте, а затем установите вертикальную обратную трубу.
С помощью пилы разрежьте трубу из поливинилхлорида диаметром 3,81 сантиметра на три части, каждая из которых имеет длину примерно 121,92 сантиметра. Затем сделайте два продольных выреза вдоль каждого участка трубы диаметром 121,92 сантиметра, чтобы создать U-образный желоб. Каждый U-образный желоб поместить на полку, один конец вставлен в Т-образный шарм основного вертикального возврата.
Используя ранее вставленную верёвку или проволоку, закрепите противоположный конец каждого желоба, чтобы создать плавный наклон вниз к Т-образному соединению вертикального возврата. Отрегулируйте желоб, чтобы добиться наклона от 1,5 до двух градусов к основному вертикальному возврату. Разместите бассейн для отсыпания под собранной стойкой.
Убедитесь, что между верхней частью раковины и нижней частью первой полки расстояние составляет примерно 14,29 сантиметра. Отрегулируйте таз так, чтобы он слегка выступал из полки и выровнялся с нависающей вертикальной трубой возврата, чтобы направить воду обратно в таз. После установки систем фильтрации и контроля температуры разместите водяной насос внутри бассейна с опорным кронштейном системы возврата резервуара.
Вырежьте виниловую трубку диаметром 1,905 сантиметра до длины 69,85 сантиметра и подключите трубку к насосу. Подключите Т-образную муфту к трубке. Разместите этот Т-образный сцепитель чуть ниже второй полки и направите его к противоположной стороне бассейна для отстойного отсека.
С помощью резака, вырежьте виниловую трубку диаметром 1,905 сантиметра длиной 36,195 сантиметра и закрепите трубку непосредственно на противоположном конце Т-соединителя по сравнению с предыдущим этапом. Последовательно соединяйте виниловые трубки длиной 36,195 и 36,83 сантиметра с Т-сцепками, добавляя новый Т-сцепитель после каждого сегмента и размещая его чуть ниже второй полки, обращённой к дальней стороне дренажного бассейна. Затем подключите редукционный угольник диаметром 1,905–1,27 сантиметра с помощью мужского адаптера диаметром 1,27 сантиметра к трубке.
Установите редукционный локоть и мужской адаптер на верхнюю поверхность четвёртой полки. Ориентируйте локоть и адаптер так, чтобы подключиться к виниловой линии сброса давления, идущей обратно к сумпу. Вырежьте виниловую трубку диаметром 1,58 сантиметра до длины 7,62 сантиметра.
Подключите трубку к мужскому адаптеру диаметром 1,27 сантиметра в верхней части полки, а затем подключите шариковой кран к свободному концу трубки. Далее, используя нож для коробок, вырежьте виниловую трубку диаметром 1,58 сантиметра до длины 213,36 сантиметра. Подключите трубку к свободному фитингу шарового клапана.
Проложите трубку по верхней части стойки, а затем направьте её вниз вдоль ножки стойки корпуса в бассейн для сумпы. С помощью крепежных ремешков закрепите трубку вдоль ножки стойки корпуса. Затем, используя резак для коробок, разрежьте виниловую трубку диаметром 1,575 сантиметра на три части, каждая длиной 6,35 сантиметра.
Соедините каждую деталь с одной из трёх свободных Т-образных сцепок на главной водопроводной линии и подключите шаровой опору к свободному концу каждой трубы. Далее прикрепите три виниловые трубки длиной 6,35 сантиметра к свободному концу шарового шарника и подключите редуктор диаметром 1,58–0,95 сантиметра к каждой секции трубы длиной 1,58 сантиметра. Разрежьте трубку диаметром 0,95 сантиметра на три части, каждая длиной 5,715 сантиметра.
Соедините каждую деталь с редуктором и прикрепите нейлоновый Т-образный сцепитель диаметром 0,95 сантиметра к каждой части трубы. Получите шесть деталей виниловой трубки диаметром 0,9525 сантиметра, каждая длиной 5,08 сантиметра, и соедините каждую деталь с нейлоновыми Т-сцепками. Прикрепите хомут для шланга к каждому из шести частей трубок.
Установите стальной аквариумный клапан на каждый доступный конец трубы и затяните хомуты шлангов, чтобы закрепить клапаны. С помощью крепежных ремней закрепите каждый стальной аквариумный клапан к верхней полке. Наконец, используя резак для коробки, вырезали виниловую трубку диаметром 0,43 сантиметра на нужной длине для каждого резервуара.
В соответствии с протоколом была создана трёхуровневая рециркулирующая система содержания данио-рерио. Проводимость дренажа оставалась относительно стабильной в течение года на основе еженедельных измерений. В течение 21-дневного периода оценки проводимость колебалась, но оставалась в пределах 600–1 000 микросименов на сантиметр, что безопасно для данио-рерио.
Нитриты оставались в нижней категории каждый день в течение 21-дневного периода. Нитраты оставались в нижней категории 18 из 21 тестируемого дня и находились в средней категории три дня, оставаясь в безопасном диапазоне для данио-рерио. Репродуктивный успех был проверен в системе в течение того же трёхнедельного периода, всего было 18 спаривающихся груш.
Из 18 пар 11 были успешными, что соответствует примерно 70% успеха спаривания. Продолжительность выживаемости эмбрионов за 24 часа составляла почти 70%. Средний размер кладки для успешных спаривания составлял примерно 150 эмбрионов. Этот протокол позволяет исследователям создавать систему содержания данио-рерио, которую они могут использовать как для исследований, так и для образовательных целей.
Правильные соединения труб, наклон обратных труб и надёжные фитинги необходимы для поддержания равномерной циркуляции воды и предотвращения протечек. Будущие исследования могут модифицировать систему для увеличения колоний данио-рерио и автоматизированного мониторинга качества воды.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье представлен специально сконструированный стеллаж для содержания zebrafish в системе с рециркуляцией воды, который отличается доступностью, надежностью и простотой сборки. Система решает распространенные проблемы, характерные для других индивидуальных решений, такие как нестабильные условия водной среды и хрупкость аквариумов, что делает её подходящей для долгосрочных исследований и образовательных целей при работе с zebrafish.
Надежное и масштабируемое содержание zebrafish имеет решающее значение для непрерывности моделей in vivo и воспроизводимости экспериментов на ранних стадиях разработки лекарственных средств. Эта специально сконструированная рециркуляционная система устраняет стоимостные и эксплуатационные барьеры, позволяя проводить долгосрочные многопоколенческие исследования в условиях ограниченных ресурсов научно-исследовательских центров. Стабильная инфраструктура для содержания водных моделей обеспечивает надежное проведение фенотипического скрининга и рабочих процессов валидации мишеней на всех этапах разработки.
Эта рециркуляционная система содержания обеспечивает использование модели zebrafish на всех этапах — от первичных открытий до доклинических исследований, поддерживая как рабочие процессы, основанные на проверке гипотез, так и скрининговые исследования.