فموي معدي النظام العصبي (STNS) من السلطعون جونا ( C. الشفق) يمكن استخدامها لالكهربية والمناعية ، ودراسات ثقافة الخلية. ويتم استخراج STNS في جزأين : تشريح الجسيمة والغرامة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
العقدة فموي معدي (STG) هو نموذج ممتاز لدراسة التفاعلات الخلوية وشبكة لأنه يحتوي على عدد قليل نسبيا من الخلايا (ما يقرب من 25 في الشفق جيم) والتي تتميز بشكل جيد. الخلايا في STG المعرض مجموعة واسعة من المخرجات ومسؤولة عن تصرفات السيارات المعدة. المعدة المعدة يحتوي على طاحونة الطعام الذي ينهار مع ثلاثة أسنان الداخلية ، وبوابة المعدة التي بتصفية الطعام قبل أن تصل إلى المعي المتوسط. وتنتج نتيجتين STG الايقاعي للسيطرة على مصنع للبواب المعدة والمعروفة باسم مولدات نمط المركزية (CPGs). يمكن لكل خلية في STG المشاركة في أحد أو كل من هذه الإيقاعات. هذه CPGs تسمح لدراسة تعديل العمليات العصبية ، التوازن ، وتقلب الخلوية وشبكة ، وتطوير الشبكة ، واستعادة الشبكة.
يتم تشريح الجهاز العصبي فموي معدي (STNS) من جونا السلطعون (سرطان الشفق) في جزأين ، وتشريح الجسيمة والغرامة. في تشريح الإجمالي يتم تشريح المعدة بالكامل من السرطانات. أثناء تشريح الغرامة يتم استخراج STNS من المعدة باستخدام مجهر التشريح والتشريح الدقيقة الأدوات (انظر الشكل 1). ويتضمن STNS STG ، والعقدة المريء (خطأ في مرماه) ، والعقد صواري (ترس) وكذلك الأعصاب التي يعصب عضلات المعدة. هنا ، وتبين لنا كيفية إجراء تشريح كامل للSTNS استعدادا لتجربة الكهربية حيث ستسجل الخلايا في STG من intracellularly والأعصاب الطرفية وستستخدم للتسجيلات خارج الخلية. ويظهر هذا الأسلوب السليم من أجل العثور على الأعصاب المطلوب فضلا عن تقنية لدينا desheathing العقدة للكشف عن وsomata neuropil.
البروتوكول
1. تشريح الإجمالي
- مكان السلطعون على الجليد لمدة 30 دقيقة للنظم مملة الحسية والحركية للحيوان. تحيط بها من جميع الجوانب مع الثلج. يجب ارتداء القفازات عند التعامل مع السلطعون.
- تحضير للتشريح الإجمالي وذلك بطرح عموم التشريح والأدوات التي سوف تستخدمها. Rongeurs ، لا بد من قطع العظام المقص ، مقص صغير ، ملقط مسنن ، ملعقة مع حافة مدبب ، وهو طبق Sylgard السوداء المغلفة ، ودبابيس الحشرات.
- إزالة السرطان من دلو الثلج بواسطة الساق الخلفيتين لمنعها من معس....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تشريح STNS هو الخطوة الأولى في إجراء عملية الكهربية أو التجربة المناعية ، أو للحصول على خلايا للثقافة الخلية. بغض النظر عن التجربة المقصود ، فإن تشريح الإجمالي دون تغيير. ومع ذلك ، قد يختلف تشريح غرامة. من المهم أن تخطط للمستقبل من الوقت الذي خلايا الأعصاب ، والتي سوف سجل من. معظم الخلايا العصبية في STG والعمليات التي يعصب العضلات واحد على الأقل في المعدة (انظر الشكل 2) ، وتصنف وفقا لاهدافها معصب. لذا ، هناك حاجة للتحقق من خارج الخلية التسجيلات كاملا هوية الخلية التي يتم تسجيلها i.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
شكر وتقدير
نحن نعترف بامتنان أعضاء مختبر ماردر. نشكر مستشار لدينا ، والدكتور حواء ماردر ، للحصول على الدعم والتشجيع لها. وأيد هذا البحث من قبل المعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية المنح NS - 17813 - 058110 وNS.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات | |
|---|---|---|---|---|
| Black Sylgard 170 | أخرى | Dow Corning | 170 | التشريح الكلي |
| مقصات دقيقة | جراحة | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| دبابيس حشرات مقاس 6 | جراحة | Fine Science Tools | 26000-65 | |
| مقصات مايو | جراحة | Fine Science Tools | 14110-17 | |
| ملعقة دقيقة (Micro-Spatula) | جراحة | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | |
| كماشة قضم العظام (Rongeurs) | جراحة | Fine Science Tools | 16000-14 | |
| ملاقط أنسجة | جراحة | Fine Science Tools | 11021-12 | |
| سلك تنجستن دقيق (قطر 0.001 in.) | جراحة | California Fine Wire Company | التشريح الدقيق | |
| ملقط رقم 5 | جراحة | Fine Science Tools | 91150-20 | |
| دبابيس دقيقة (Minuten Pins) | جراحة | Fine Science Tools | 26002-10 | |
| مقصات موريا الزنبركية (شفرات 7mm) | جراحة | Fine Science Tools | 15370-52 | |
| أطباق بتري (100x15mm) | أخرى | Fisher Scientific | 08-757-12 | |
| حامل دبابيس | جراحة | Fine Science Tools | 26018-17 | |
| ملاقط فائقة الدقة رقم 5SF | جراحة | Fine Science Tools | 11252-00 | |
| Sylgard 182 | أخرى | Dow Corning | 182 | |
| إبر تنجستن | جراحة | Fine Science Tools | 10130-05 | |
| مجهر تشريح | مجهر | Wild | MC3 | متنوعات |
| سرطان يوناه (C. borealis) | حيوان | Commercial Lobster |
المراجع
- Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , MIT Press. Boston. (1992).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs.<....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
