Intratracheal instillations 직접 폐에 solutes을 제공합니다. 이 절차는 폐암의 말초 지역에 instillate의 전달을 대상으로하고, 따라서 종종 폐포를 공부하기위한 연구에 통합됩니다. 우리는 생쥐에서 intratracheal instillations을 수행하기위한 세부적인 생존 프로토콜을 제공합니다.
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이 논문에서
요약
초록
Intratracheal instillations 직접 폐에 solutes을 제공합니다. 이 절차는 폐암의 말초 지역에 instillate의 전달을 대상으로하고, 따라서 종종 폐포를 공부하기위한 연구에 통합됩니다. 우리는 생쥐에서 intratracheal instillations을 수행하기위한 세부적인 생존 프로토콜을 제공합니다. 이 방법을 사용, 하나는 말초 폐로 테스트 solutes 또는 고체의 제공 (예 : 폐 치료제, 계면 활성제, 바이러스, 작은 oligonucleotides)를 타겟팅할 수 있습니다. Tracheal instillations는 주로 상부 호흡기를 타겟으로하고 가능한 잠재적 유해 물질에 대한 조사에 노출될 수 있습니다 흡입 프로토콜을 통해, 원하는 방법 수 있습니다. 또한, tracheal 떨어뜨림 프로토콜을 사용하여, 동물 완전히 비침습 절차에서 복구할 수 있습니다. 이 같은 동물을 사용하여 시험 동물, 또는 다시 설치에 대한 후속 생리 측정을 만들기위한 수 있습니다. 폐에 소개 instillate의 금액은 신중하게 결정과 동물 복구를 보장하기 위해 osmotically 균형해야합니다. 일반적으로 30-75 μL instillate 볼륨 마우스 폐에 소개하실 수 있습니다.
프로토콜
1. 마취
- isoflurane과 쥐를 Anesthetizing하면 intraperitaneally 마취 관리를하기 전에 동물의 처리와 구속을 촉진 수도 있습니다. 흡입 마취제를 사용하면 또는 특정 연구에 적합하지 않을 수 있습니다 수 있습니다 제안한 폐 연구에서 첫 번째 isoflurane 사용의 영향, 또는 다른 마취제를 결정합니다.
- isoflurane과 동물을 마취. 동영상은 산소와 혼합 2퍼센트 isoflurane에서 설정 isoflurane 기화기 챔버의 사용을 보여줍니다. 당신이 isoflurane 챔버가 없다면, 당신은 표준 또는 오픈 드롭 노출 기법을 사용하실 수 있습니다. 하단에 장착되어 와이어 메쉬와 벨 병 속에 쥐 (또는 다른 적절한 비 다공성 컨테이너)를 동봉. 메쉬 와이어 아래에 위치 거즈 패드하려면, 프로필렌 글리콜에 V / V isoflurane 30 % 혼합물을 적용합니다. 메쉬의 사용은 동물이 피부 자극 및 잠재 도달 했나봐을 일으킬 수있는 isoflurane - 절어 패드와 접촉하지 않도록 보장합니다. isoflurane에 짧은 노출 후, 동물은 anesthetized되어야하며 그릇이 스쳐 및 발가락 핀치 후 응답하지 않습니다 때 righting 반사와 응답하지 않습니다.
- Xylazine과 300ml의 혼....
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토론
Intratracheal instillations는 시험 화합물 (6)의 독성을 평가하기 위해 여러 가지 다양한 연구에 사용되었으며, 폐포 폐 상해 (4, 7) 유도, 직접 작은 oligonucleotides의 전달을 통해 계면 활성제 (8)뿐만 아니라, 변경 유전자 발현을 교체 폐 (5). 우리는 현재 폐암에 형광 산화 환원에 민감한 자료는 약리 성분, DNA 벡터, 바이러스, 그리고 함께 형광 표시기를 instilling)뿐만 아니라 2로 평범하고 pathophysiological 조건 생체내에 산화 스트레스를 측정하기 위해 1) instilling의 사용을 탐험 아르 / 또는 폐 유체 수송에있는 각 instillate의 효과를 평가하는 microRNA.
흡입 노출 ((1) 검토)를 통해 기지 프로토콜을 사용하여 폐에 이물질을 소개하는 몇 가지 장점이 있습니다. 떨어뜨림 프로토콜을 사용하여의 주요 장점은 독성, 발암성, 또는 방사성 물질에 노출 제한을 포함합니다. .......
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감사의 글
이 작품은 NIH K99 HL09222601 및 MNH에게 수여 S & R 재단 Ryaji Uneo 수상에 의해 지원되었다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Isoflurane | Webster Veterinary | 14043-220-05 | |
| Xylazine | Lloyd, Inc. | 신규 동물 약물 신청서 #139-236 | |
| Ketamine | Bioniche Pharma | 67457-001-10 | |
| Nair | 약국에서 구매 가능 | ||
| 1mL 피하 주사용 주사기 | BD Biosciences | 309597 | 26 5/8 G |
| 4-0 나일론 봉합사 | Ethicon Inc. | 1894G.S30 |
참고문헌
- Driscoll, K. E., Costa, D. L., Hatch, G., Henderson, R., Oberdorster, G., Salem, H., Schlesinger, R. B. Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: uses and limitations. Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).
- Helms, M. N., Jain, L., Self, J. L., Eaton, D. C.
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재인쇄 및 허가
