Ada Testi: Drosophila Lokomotor Davranışını Değerlendirmek İçin Yüksek Verimli Bir Yöntem

Abstract

Kaynak: Eidhof, I., et al. Drosophila Adası Testinde Lokomotor Davranışın Yüksek Verimli Analizi. J. Vis. Uzm. (2017).

Bu video, Drosophila hareketini incelemek için kullanılan davranışsal bir yöntem olan ada tahlilini açıklamaktadır. Örnek protokol, yarı otomatik görüntü analizi ile uyumlu test için bir kurulum içerir.

Protocol

Bu protokol, Eidhof ve diğerleri, Drosophila Adası Testinde Lokomotor Davranışın Yüksek Verimli Analizi, J. Vis. Exp. (2017).

1. Ada Tahlil Kutusu İnşaatı

1. Bir su tabakası (yani banyo) içerecek şekilde poli metil metakrilat (PMMA) gibi sağlam bir malzemeden yapılmış bir tepsi hazırlayın. Malzemenin beyaz olmadığından emin olun.
   NOT: 40 x 35 x 2,5^cm3 boyutlarında olması önerilir (Şekil 1A).
2. Sineklerin laboratuvar alanına kaçmasını önlemek için banyonun etrafına yerleştirilmek üzere PMMA gibi s....

Results

Şekil 1: Ada tahlilinin gerekliliklerini, deneysel prosedürünü ve analizini özetleyen akış şeması. (A) Ada tahlil ekipmanı. (B) Ada tahlili için deney düzeneği. (C) Ada tahlili. (D) Ada tahlil verilerinin "Drosophila Adası Tahlili" makrosu ile işlenmesi. "Drosophila Adası Testi" makrosu 3 alt makrodan oluşur: 1) yığın ve projeksiyon yapm.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
25 x 95 mm Drosophila şişeleri	Uçan şeyler	32-116SB	-
Logitech C525 HD Web Kamerası	Logitech	-	USB bağlantısı olan herhangi bir web kamerası uygundur.
Web kamerasını tutmak için stand	-	-	-
lamba	-	-	12 V LED ışıklar uygundur
Vurma pedi	-	-	Herhangi bir mouse pad çalışır
Ada Tahlil kutusu	-	-	Boyutlar 40x35x2,5 cm. Delik 20x30 cm. Şeffaf.
Ada Tahlil banyosu	-	-	Boyutlar 42x38x25 cm. Beyaz olmayan.
Ada/platform	-	-	Boyutlar 42x38x25 cm. Üniforma beyaz.
sabun	-	-	Standart bulaşık deterjanı uygundur.
bilgisayar	-	-	Komut dosyaları hem Windows hem de Mac'te çalışır
Görüntü kayıt yazılımı: HandiAvi®	AZcendant®	-	HandyAvi yalnızca Windows ile uyumludur ve el yazması boyunca açıklanmıştır. Şuradan indirilebilir: http://www.azcendant.com/DownloadHandyAvi.html (sürüm 5.0)
Görüntü kayıt yazılımı: WebcamCapture	-	-	Görüntü kayıtları için HandyAvi'ye alternatif olarak Mac'te kullanılabilen ve şu adresten indirilebilen Fiji/ImageJ eklentisi: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ Bu yöntemi kullanırken, kullanıcının bu yazıda belirtilen aynı klasör kurulumunu ve görüntü kayıt ayarlarını kullanması gerekir, tek farkı, her deneysel çoğaltma için, yakalanan görüntü yığınının ilgili deneysel çoğaltma klasörüne Stack.tiff olarak dışa aktarılması gerekir. Bu veriler üzerinde "Drosophila Adası Testi" makrosunu çalıştırdıktan sonra, "İlk çerçeve tanımlayıcısı" ayarında hiçbir metin bulunmamalıdır.

Belediyesi