Levetid protokol for Drosophila melanogaster:Generering survival kurver til at identificere forskelle i Fly Levetid
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Bovier, TF, et al. Metoder til at teste endokrine forstyrrelser i Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).
Forskere bruger Drosophila levetidsprotokollen til at måle, hvordan forskellige eksperimentelle forhold påvirker fluernes levetid og genererer overlevelseskurver i processen for at kvantificere de eksperimentelle resultater. Prøveprotokollen indeholder den analyse, der anvendes til at undersøge virkningerne på levetiden fra eksponering for forskellige koncentrationer af hormonforstyrrende kemikalier eller EDC’er, såsom 17-α-ethinylestradiol (EE2).
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Bovier et al., Metoder til test af endokrine forstyrrelser i Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019). 1. Tilberedning af fødevarer Til vedligeholdelse af bestanden og til larvevækst skal du bruge et majsmelsmedium, der indeholder 3% pulveriseret gær, 10% saccharose, 9% forkogt majsmel, 0,4% agar, derefter kaldet Cornmeal medium (CM). Sæt 30 g gær i 100 mL vand fra hanen, bring det i kog og lad det koge i 15…
Representative Results
Figur 1: Levetidskurver. Til venstre rapporteres en repræsentativ tabel, hvor antallet af døde fluer er blevet registreret hver 3. dag, både for behandlingsgruppen (medium + EDC [0,05 mM EE2]) og for kontrolgruppen (medium + opløsningsmiddel) i hele forsøgsperioden. Den gennemsnitlige levetid for hver gruppe er beregnet ved hjælp af MATRIX SUM. 1984, s. den behandlede gruppe forkortede gennemsnitsle…
Materials
| 17α-Ethinylestradiol | Sigma | E4876-1G | |
| Agar for Drosophila medium | BIOSIGMA | 789148 | |
| Cornmeal | CA' BIANCA | ||
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789008 | 25 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789009 | 29 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | Kaltek | 187 | 22 mm x 63 mm |
| Ethanol | FLUKA | 2860 | |
| Glass Bottle | 250 mL Bottles | ||
| Glass Vials | Microtech | ST 10024 | Flat bottom tube 100 x 24 |
| Instant Success yeast | ESKA | Powdered yeast | |
| Methyl4-hydroxybenzoate | SIGMA | H5501 | |
| Stereomicroscope with LED lights | Leica | S4E | |
| Sucrose | HIMEDIA | MB025 | |
| Hand blender Pimmy | Ariete | food processor |
Cite This Article
Lifespan Protocol for Drosophila melanogaster: Generating Survival Curves to Identify Differences in Fly Longevity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20104, doi: (2023).