İki Foton Lazer Kaynaklı Nöral Yaralanma: Drosophila Larvalarında Akson Dejenerasyonu ve Yenilenmesini Gözlemleme Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Li, D., vd. Periferik ve Merkezi Sinir Sisteminde Nörorejenerasyon Çalışması için Drosophila In Vivo Yaralanma Modeli. J. Vis. Exp. (2018).
Bu video, bir Drosophila melanogaster larvasında aksonların iki foton lazer ablasyonunu ve yaralanmayı teşvik etmek ve yaralanma bölgesini görüntüleyen örnek bir protokolü açıklar.
Protocol
Bu protokol, Periferik ve Merkezi Sinir Sisteminde Nörorejenerasyon Çalışması için Bir Drosophila In Vivo Yaralanma Modeli olan Li ve ark.’danbir alıntıdır, J. Vis. Exp. (2018). 1. İki foton yaralanması ve Konfokal Görüntüleme Mikroskop kurulumuNOT: Bu deney için iki foton lazerli bir konfokal lazer tarama mikroskobu kullanıldı, ancak eşdeğer kuruluma sahip diğer sistemler de yeterli olacaktır. İki fot…
Representative Results
Şekil 1: Çevredeki da nöron akson rejenerasyonu sınıf özgüllüğünü görüntüler. (A ve B) Larvaların konumunu gösteren şematik çizim. (C) Sınıf III da nöronların şematik çizimi. (D) 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+ ile etiketlenmiş III da neurons ddaF sınıfının aksonları yeniden büyüyemez. (E) Sınıf IV da nöronların…
Materials
| Diethyl ether, ACS reagent, anhydrous | Acros Organics | AC615080010 | |
| Halocarbon 27 Oil | Genesee Scientific | 59-133 | |
| Propionic Acid | J.T.Baker | U33007 | |
| Cover Glasses: Rectangles | Fisher Scientific | 12-544-D | 50 mm X 22 mm |
| Zeiss LSM 880 laser scanning microscope | Zeiss | ||
| Zen software | Zeiss | ||
| Chameleon Ultra II | Coherent |
Cite This Article
Two-Photon Laser-Induced Neural Injury: A Method to Observe Axon Degeneration and Regeneration in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20108, doi: (2023).