Chemisch drogen: biologisch monsterpreparaat voor het scannen van elektronenmicroscopie (SEM)

Abstract

Bron: Koon, M. A., et al. Voorbereiding van prokaryotische en eukaryotische organismen met behulp van chemische droging voor morfologische analyse in scanning elektronenmicroscopie (SEM). J.Vis. Exp. (2019).

Scanning elektronenmicroscopie (SEM) is een krachtig hulpmiddel om de oppervlaktekenmerken van een biologisch monster in beeld te brengen. Een goede monstervoorbereiding is echter van cruciaal belang voor het verkrijgen van kwaliteitsafbeeldingen. Deze video richt zich op de uitdrogings- en droogstappen van het voorbereiden van intacte volwassen Drosophila voor SEM.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Koon et al., Preparation of Prokaryotic and Eukaryotic Organisms Using Chemical Drying for Morphological Analysis in Scanning Electron Microscopy (SEM), J. Vis. Exp. (2019). 1. Voorbereiding en fixatie Bereid Drosophila melanogaster (fruitvlieg). Verdoof volwassen vliegen met 100% kooldioxide. Plaats verdoofde volwassenen (ongeveer 10 tot 30 vliegen) in een kleine plastic schroefdopflacon of 1,5 ml centrifugebuis.</l…

Materials

Silver conductive adhesive 503	Electron Microscopy Sciences	12686-15
aluminum weighing dish	Fisher Scientific	08-732-100
aluminum mounting stubs (12 mm)	Electron Microscopy Sciences	75210
aluminum mounting stubs (25 mm)	Electron Microscopy Sciences	75186
Adhesive tabs	Electron Microscopy Sciences	76760
conductive carbon adhesive tabs	Electron Microscopy Sciences	77825
Polyethylene glycol tert-octylphenyl ether (Triton X-100)	VWR	97062-208
Hitachi 3400N-II SEM	Hitachi	https://www.hitachi-hightech.com/us/product_list/	The company doesn't appear to sell this model any longer