Denne video beskriver Drosophila lymfekirtlen-det primære sted for hæmatopoiesis i flue larven-og viser et eksempel protokol til at dissekere og montere organet for immunohistochemistry og fluorescerende billeddannelse.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Reimels og Pfleger, Metoder til at undersøge lymfekirtlen og hæmocytterne i Drosophila Larver, J. Vis. Exp. (2016). 1. Larve lymfekirtler Immunohistochemistry BEMÆRK: Lymfekirtlen er placeret cirka en tredjedel længde fra den forreste ende af en larve lidt under hjernen på dorsalsiden. (Se pilen i figur 1B). Lymfeknuderne flankerer det do…
Representative Results
Figur 1: In Vivo Crystal Cell Melanization. A) Larver blev placeret individuelt i PCR-rør før opvarmning. Røde pile angiver larver, der ikke er i bunden af rørene. B) En typisk krystal celle melanisering mønster efter opvarmning, som undertiden afslører lymfekirtlen (pil; dorsal side vist, forreste er tilbage). Skalalinjen repræsenterer 1 <a href="https://www.jove.com/file…
Materials
PBS tablets
MP Biomedicals
2810305
dissecting dish
Corning
7220-85
microcentrifuge tube
Denville
C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit
Krayden (distributed through Fisher)
NC9644388 (Fisher catalog number)
Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.