Overview
סרטון זה מתאר כיצד לעקוב אחר זבובים בהליכה חופשית כדי להעריך את יכולת התנועה הכללית שלהם. הפרוטוקול המוצג מדגים את ההתקנה וניתוח הנתונים של ההסתעפות באמצעות תוכנת מעקב וידאו.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך סאן וחן, שיטה חדשנית למודל אנצפלופתיה טראומטית כרונית בדרוסופילה, J. Vis. Exp. (2017).
1. מעקב תנועה בסיוע וידאו
- מלאו צלחת פטרי בקוטר 6 ס"מ באלסטומר סיליקון שקוף כדי להפוך את זירת המעקב. השאירו רווח של 3 מ"מ בין הסיליקון למכסה הכלים כדי לאפשר לזבובים ללכת בחופשיות אך לא לעוף.
- יש להרדים ארבעה זבובים מהקבוצה המזויפת או המטופלת בכל פעם ולמקם אותם בזירה. השאירו את הזבובים ב 22 מעלות צלזיוס במשך שעה.
- מקם מצלמה של התקן מצמד טעינה (CCD) מעל הזירות והקלט במשך 5 דקות.
- לנתח את מסלולי התנועה המוקלטים באמצעות תוכנת Ctrax (זמין בחופשיות מ Caltech). יצא את הנתונים במעקב בתבנית תואמת שפת תיכנות (למשל, Matlab) ונתח את הנתונים בהתבסס על מרחק הנסיעה לכל מסגרת. לחשב את מרחק ההליכה הממוצע עבור כל זבוב ולשלב אותו עם כל זבובים / קבוצה מוקלטים אחרים כדי להשיג מרחק מצטבר ממוצע נסע על ידי אוכלוסיית הקבצים באותה קבוצה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
