자유롭게 걷는 파리 추적: 초파리의 이동을 평가하는 방법

Abstract

출처: Sun, M. and Chen, L. L. 초파리의 만성 외상성 뇌병증을 모델링하는 새로운 방법. J. Vis. 특급 (2017).

이 비디오는 자유롭게 걷는 파리를 추적하여 일반적인 운동 능력을 평가하는 방법을 설명합니다. 주요 프로토콜은 비디오 추적 소프트웨어를 사용한 분석의 설정 및 데이터 분석을 보여줍니다.

Protocol

이 프로토콜은 Sun and Chen, A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila, J. Vis. Exp. (2017)에서 발췌한 것입니다.

1. 비디오 지원 움직임 추적

1. 지름 6cm의 페트리 접시에 투명 실리콘 엘라스토머를 채워 추적 경기장을 만듭니다. 실리콘과 접시 뚜껑 사이에 3mm의 공간을 두어 파리가 자유롭게 걸을 수 있지만 날지 않도록 합니다.
2. 매번 가짜 또는 치료된 그룹에서 4마리의 파리를 마취하고 경기장에 놓습니다. 파리를 22 ° C에서 1 시간 동안 그대로 두십시오.
3. CCD(Charge-Coupled Device) 카메라를 경기장 위에 놓고 5분 동안 녹화합니다.
4. Ctrax 소프트웨어(Caltech에서 무료로 제공)를 사용하여 기록된 이동 궤적을 분석합니다. 추적된 데이터를 프로그래밍 언어(예: Matlab) 호환 형식으로 내보내고 프레임당 이동한 거리를 기반으로 데이터를 분석합니다. 각 파리의 평균 도보 거리를 계산하고 기록된 다른 모든 파리/그룹과 결합하여 동일한 그룹의 파일 모집단이 이동한 평균 누적 거리를 구합니다.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
60mm 페트리 접시	피셔 사이언티픽	FB0875713A	추적 경기장으로 사용
유량 조절기	제네시 사이언티픽	59-122WC
파인 브러쉬	제네시 사이언티픽	59-204
플라이패드	제네시 사이언티픽	59-114
Sylgard 실리콘 엘라스토머	다우코닝	4019862
CCD 카메라	마이크로소프트	HD-5000
Ctrax 워킹 플라이 트래커	칼텍	크트랙스 0.2.11
MATLAB Image Processing Toolbox	MATLAB을	R2015b를 참조하십시오.