Overview
이 비디오는 자신의 일반적인 운동 능력을 평가하기 위해 자유롭게 걷는 파리를 추적하는 방법을 설명합니다. 이 프로토콜은 비디오 추적 소프트웨어를 사용하여 분석의 설정 및 데이터 분석을 보여 줍니다.
Protocol
이 프로토콜은 태양과 첸에서 발췌, 드로소필라에서만성 외상성 뇌질환을 모델링하는 새로운 방법,J. Vis. Exp. (2017).
1. 비디오 지원 운동 추적
- 6cm 직경의 페트리 접시에 투명한 실리콘 엘라스토머를 채우고 추적 경기장을 만듭니다. 실리콘과 접시 뚜껑 사이에 3mm 의 공간을 두어 파리가 자유롭게 걸을 수 있지만 비행하지 않도록하십시오.
- 매번 샴 또는 처리 된 그룹에서 네 마리의 파리를 마취하고 경기장에 놓습니다. 파리를 22°C에서 1시간 동안 그대로 둡니다.
- 충전 결합 장치(CCD) 카메라를 경기장 위에 배치하고 5분 동안 녹화합니다.
- Ctrax 소프트웨어를 사용하여 기록된 이동 궤적을 분석합니다(Caltech에서 자유롭게 사용할 수 있음). 추적된 데이터를 프로그래밍 언어(예: Matlab)와 호환되는 형식으로 내보내고 프레임당 이동한 거리에 따라 데이터를 분석합니다. 각 비행의 평균 도보 거리를 계산하고 동일한 그룹의 파일 모집단에 의해 이동평균 누적 거리를 얻기 위해 다른 모든 기록 된 파리 / 그룹과 결합합니다.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |