Spåra fritt vandrande flugor: En metod för att bedöma rörelse i Drosophila

Abstract

Källa: Sun, M. och Chen, L. L. En ny metod för att modellera kronisk traumatisk encefalopati i Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).

Den här videon beskriver hur man spårar fritt vandrande flugor för att bedöma deras allmänna rörelseförmåga. Det presenterade protokollet visar analysens installation och dataanalys med hjälp av videospårningsprogram.

Protocol

Detta protokoll är ett utdrag från Sun and Chen, en ny metod för att modellera kronisk traumatisk encefalopati i Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Videoassisterad rörelsespårning

1. Fyll en petriskål med diametern 6 cm med transparent silikon elastomer för att göra spårningsarenan. Lämna ett 3 mm utrymme mellan kisel och disklocket så att flugorna kan gå fritt men inte flyga.
2. Söv fyra flugor från antingen bluffen eller behandlad grupp varje gång och placera dem på arenan. Låt flugorna vara 22 °C i 1 timme.
3. Placera en CCD-kamera (Charge-Coupled Device) ovanför arenorna och spela in i 5 minuter.
4. Analysera de inspelade rörelsebanorna med hjälp av Ctrax-programvara (fritt tillgänglig från Caltech). Exportera spårade data i ett programmeringsspråk (t.ex. Matlab)-kompatibelt format och analysera data baserat på tillryggalagda avstånd per bildruta. Beräkna den genomsnittliga gångavstånden för varje fluga och kombinera den med alla andra registrerade flugor / grupp för att få en genomsnittlig kumulativ sträcka som tillryggalagd av filpopulationen i samma grupp.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
60 mm Petri Dishes	Fisher Scientific	FB0875713A	Used as a tracking arenas
Flow Regulator	Genesee Scientific	59-122WC
Fine Brush	Genesee Scientific	59-204
Flypad	Genesee Scientific	59-114
Sylgard Silicone Elastomer	Dow Corning	4019862
CCD Camera	Microsoft	HD-5000
Ctrax Walking Fly Tracker	Caltech	Ctrax 0.2.11
MATLAB Image Processing Toolbox	MATLAB	R2015b