Overview
Den här videon beskriver hur man spårar fritt vandrande flugor för att bedöma deras allmänna rörelseförmåga. Det presenterade protokollet visar analysens installation och dataanalys med hjälp av videospårningsprogram.
Protocol
Detta protokoll är ett utdrag från Sun and Chen, en ny metod för att modellera kronisk traumatisk encefalopati i Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).
1. Videoassisterad rörelsespårning
- Fyll en petriskål med diametern 6 cm med transparent silikon elastomer för att göra spårningsarenan. Lämna ett 3 mm utrymme mellan kisel och disklocket så att flugorna kan gå fritt men inte flyga.
- Söv fyra flugor från antingen bluffen eller behandlad grupp varje gång och placera dem på arenan. Låt flugorna vara 22 °C i 1 timme.
- Placera en CCD-kamera (Charge-Coupled Device) ovanför arenorna och spela in i 5 minuter.
- Analysera de inspelade rörelsebanorna med hjälp av Ctrax-programvara (fritt tillgänglig från Caltech). Exportera spårade data i ett programmeringsspråk (t.ex. Matlab)-kompatibelt format och analysera data baserat på tillryggalagda avstånd per bildruta. Beräkna den genomsnittliga gångavstånden för varje fluga och kombinera den med alla andra registrerade flugor / grupp för att få en genomsnittlig kumulativ sträcka som tillryggalagd av filpopulationen i samma grupp.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
