Overview
Bu video, genel hareket yeteneklerini değerlendirmek için serbestçe yürüyen sineklerin nasıl izlenir. Öne çıkan protokol, video izleme yazılımı kullanılarak yapılan tahlil kurulumunu ve veri analizini göstermektedir.
Protocol
Bu protokol, Drosophila, J. Vis. Exp. (2017)'de Kronik Travmatik Ensefalopatiyi Modellemek için Yeni Bir Yöntem olan Sun and Chen'den bir alıntıdır.
1. Video destekli Hareket Takibi
- İzleme arenasını yapmak için 6 cm çapındaki petri kabını şeffaf silikon elastomer ile doldurun. Sineklerin serbestçe yürümesini ancak uçmamasını sağlamak için silikon ve bulaşık kapağı arasında 3 mm'lik bir boşluk bırakın.
- Her seferinde sahte veya tedavi edilen gruptan dört sinek uyuşturun ve arenaya yerleştirin. Sinekleri 22 °C'de 1 saat bekletin.
- Şarj Bağlantılı Cihaz (CCD) kamerasını arenaların üzerine yerleştirin ve 5 dakika boyunca kaydedin.
- Kaydedilen hareket yörüngelerini Ctrax yazılımını kullanarak analiz edin (Caltech'ten serbestçe edin). İzlenen verileri programlama diliyle (örneğin Matlab) dışa aktarın ve verileri kare başına kat edilen mesafeye göre analiz edin. Her sinek için ortalama yürüme mesafesini hesaplayın ve aynı gruptaki dosya popülasyonu tarafından kat edilen ortalama bir kümülatif mesafe elde etmek için kaydedilen diğer tüm sinekler / grupla birleştirin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
