Neglebånd Disruption: En metode til at indsamle Hæmolymph fra Drosophila Larver
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Reimels, T. A. og Pfleger, C.M. Metoder til at undersøge lymfekirtlen og hæmocytter i Drosophila Larver. J. Vis. Exp. (2016).
Den Drosophila hemolymph tjener som både blod og interstitiel væske, cirkulerer i hele kroppen i larven og voksne stadier. Denne video beskriver en protokol til at indsamle larve hæmolymph for at kvantificere de cirkulerende celler.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Reimels og Pfleger, Metoder til at undersøge lymfekirtlen og hæmocytterne i Drosophila Larver, J. Vis. Exp. (2016). 1. Cirkulerende Hemocyte Koncentration For at opnå larver af omtrent samme udviklingsstadium til denne analyse, begrænse ægopsamlingen ved at tillade kvinder at lægge æg i en fast periode på 2 – 6 timer. Saml larver i dissekere parabol brønde fyldt med 1x fosfat buffered saltvand (PBS). For h…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| Countess Automated Cell Counter | Invitrogen | C10227 | |
| Countess cell counting chamber slides | Invitrogen | C10283 | |
| hemocytometer | Hausser Scientific | 3200 | |
| trypan blue stain | Life Technologies | T10282 |
Cite This Article
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).