Cuticle Disruption: En metode for å samle hemolymfe fra Drosophila Larver

Published: April 30, 2023

Abstract

Kilde: Reimels, T. A. og Pfleger, C.M. Metoder for å undersøke lymfekjertel og hemocytter i Drosophila Larver. J. Vis. Utt. (2016).

Drosophila hemolymph fungerer som både blod og interstitiell væske, sirkulerer gjennom hele kroppen under larven og voksenstadiene. Denne videoen beskriver en protokoll for å samle larval hemolymfe for å kvantifisere de sirkulerende cellene.

Protocol

Denne protokollen er et utdrag fra Reimels og Pfleger, Metoder for å undersøke lymfekjertel og hemocytter i Drosophila Larver, J. Vis. Exp. (2016). 1. Sirkulerende hemocyttkonsentrasjon For å oppnå larver av omtrent samme utviklingsstadium for denne analysen, begrens eggsamlingen ved å la kvinner legge egg i en fast tidsperiode på 2 – 6 timer. Samle larver i dissekering av tallerkenbrønner fylt med 1x fosfatbufret saltvann (PBS). For hver …

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
Countess Automated Cell Counter Invitrogen C10227
Countess cell counting chamber slides Invitrogen C10283
hemocytometer Hausser Scientific 3200
trypan blue stain Life Technologies T10282

Play Video

Cite This Article
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).

View Video