Rompimento da cutícula: um método para coletar hemoglifos de larvas de Drosophila

Published: April 30, 2023

Abstract

Fonte: Reimels, T. A. e Pfleger, C.M. Métodos para Examinar a Glândula Linfática e Hemócitos em Larvas Drosophila . J. Vis. Exp. (2016).

O hemoglifo de Drosophila serve como sangue e fluido intersticial, circulando por todo o corpo durante a larva e estágios adultos. Este vídeo descreve um protocolo para coletar hemoglifo larval a fim de quantificar as células circulantes.

Protocol

Este protocolo é um trecho de Reimels e Pfleger, Métodos para Examinar a Glândula Linfática e Hemócitos em Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016). 1. Concentração de Hemócitos Circulantes Para obter larvas aproximadamente do mesmo estágio de desenvolvimento para este ensaio, restringir a coleta de ovos permitindo que as fêmeas coloquem ovos por um período fixo de 2 a 6 horas. Coletar larvas em poços de prato dissecado cheios de 1x salina tampon…

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
Countess Automated Cell Counter Invitrogen C10227
Countess cell counting chamber slides Invitrogen C10283
hemocytometer Hausser Scientific 3200
trypan blue stain Life Technologies T10282

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Cite This Article
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).

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