Lokal varmesondeanalyse: En metode for å vurdere nociception av høye temperaturer i Drosophila larver

Published: April 30, 2023

Abstract

Kilde: Chattopadhyay, A., et al. Lokale og globale metoder for å vurdere termisk nociception i Drosophila Larver. J. Vis. Utt. (2012).

Drosophila larver har dedikerte sensoriske nevroner -nociceptorer – hvis respons på potensielt skadelige termiske stimuli utløser aversive – eller såkalte “nocifensive” -atferd i dyret. Denne videoen beskriver en metode for å vurdere termisk nociception ved å registrere larval oppførsel som svar på lokal påføring av en varmesonde på kutikylen. Denne metoden kalles derfor den lokale varmesondeanalysen.

Protocol

Denne protokollen er et utdrag fra Chattopadhyay et al.,Lokale og globale metoder for å vurdere termisk nociception i Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2012). 1. Lokal varmesondeanalyse Vi leverer en skadelig termisk stimulans til et individuelt larvhussegment ved hjelp av en spesialbygd termisk sonde produsert av Pro-Dev Engineering (se Materialfortegnelse). Selv om denne sonden har optimale designfunksjoner (en liten metallspiss på ~ 0,0…

Representative Results

Figur 1: Eksperimentelt oppsett for lokal varmesondeanalyse. Varmesonden styres av en termisk kontrollenhet som brukes til å stille inn og opprettholde probens temperatur. Sonden holdes vinkelrett på anteroposterioraksen og brukes til å stimulere larven i en vinkel på 45° til horisontalen. Sondekontakt er laget spesielt på buksegment A4 som vist. Brukeren må opprettholde denne kontakten med forsiktig trykk opp til …

Materials

Thermal Probe Pro-Dev Engineering Custom-built on demand Contact information can be provided on request
Leica DFC290 12v/400mA Color camera Leica Microsystems 12730080 Any equivalent camera will do.
Leica MZ6 microscope Leica Microsystems Part number for MZ6 zoom body (optics carrier) is 10445614
Schott Ace Modulamp Unit Schott AG A20500
Schott Dual Gooseneck 23 inch Fiber Optic Light Guide Schott AG Schott A08575
Thermal Control Unit TSCI corp. Custom Built Details can be provided on request
Zeiss Stemi 2000 microscope Carl Zeiss, Inc. NT55-605 Any equivalent microscope will do.
Forceps Fine Science Tools FS-1670
Paintbrush Blick Art Materials 06762-1002
35 X 10 mm Polystyrene Petri Dish Falcon BD 351008 We have not tested alternative dishes.
Piece of vinyl Office Depot 480009

Play Video

Cite This Article
Local Heat Probe Assay: A Method to Assess Nociception of High Temperatures in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20146, doi: (2023).

View Video