Lokal varmesondeanalyse: En metode for å vurdere nociception av høye temperaturer i Drosophila larver
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Chattopadhyay, A., et al. Lokale og globale metoder for å vurdere termisk nociception i Drosophila Larver. J. Vis. Utt. (2012).
Drosophila larver har dedikerte sensoriske nevroner -nociceptorer – hvis respons på potensielt skadelige termiske stimuli utløser aversive – eller såkalte “nocifensive” -atferd i dyret. Denne videoen beskriver en metode for å vurdere termisk nociception ved å registrere larval oppførsel som svar på lokal påføring av en varmesonde på kutikylen. Denne metoden kalles derfor den lokale varmesondeanalysen.
Protocol
Denne protokollen er et utdrag fra Chattopadhyay et al.,Lokale og globale metoder for å vurdere termisk nociception i Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2012). 1. Lokal varmesondeanalyse Vi leverer en skadelig termisk stimulans til et individuelt larvhussegment ved hjelp av en spesialbygd termisk sonde produsert av Pro-Dev Engineering (se Materialfortegnelse). Selv om denne sonden har optimale designfunksjoner (en liten metallspiss på ~ 0,0…
Representative Results
Figur 1: Eksperimentelt oppsett for lokal varmesondeanalyse. Varmesonden styres av en termisk kontrollenhet som brukes til å stille inn og opprettholde probens temperatur. Sonden holdes vinkelrett på anteroposterioraksen og brukes til å stimulere larven i en vinkel på 45° til horisontalen. Sondekontakt er laget spesielt på buksegment A4 som vist. Brukeren må opprettholde denne kontakten med forsiktig trykk opp til …
Materials
| Thermal Probe | Pro-Dev Engineering | Custom-built on demand | Contact information can be provided on request |
| Leica DFC290 12v/400mA Color camera | Leica Microsystems | 12730080 | Any equivalent camera will do. |
| Leica MZ6 microscope | Leica Microsystems | Part number for MZ6 zoom body (optics carrier) is 10445614 | |
| Schott Ace Modulamp Unit | Schott AG | A20500 | |
| Schott Dual Gooseneck 23 inch Fiber Optic Light Guide | Schott AG | Schott A08575 | |
| Thermal Control Unit | TSCI corp. | Custom Built | Details can be provided on request |
| Zeiss Stemi 2000 microscope | Carl Zeiss, Inc. | NT55-605 | Any equivalent microscope will do. |
| Forceps | Fine Science Tools | FS-1670 | |
| Paintbrush | Blick Art Materials | 06762-1002 | |
| 35 X 10 mm Polystyrene Petri Dish | Falcon BD | 351008 | We have not tested alternative dishes. |
| Piece of vinyl | Office Depot | 480009 |
Cite This Article
Local Heat Probe Assay: A Method to Assess Nociception of High Temperatures in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20146, doi: (2023).