C. elegans Bewegungsverfolgung: Eine Methode zur Beurteilung der Fortbewegung bei Würmern

Abstract

Quelle: Davies, A. G. et al. Ein Assay zur Messung der Auswirkungen von Ethanol auf die Fortbewegungsgeschwindigkeit von Caenorhabditis elegans.J. Vis. Exp.(2015).

Dieses Video beschreibt die Verwendung von Video- und Tracking-Software zur Aufzeichnung von Wurmbewegungen in einer Arena. Das Beispielprotokoll misst die Wirkung der Ethanolexposition auf die Fortbewegung von Würmern.

Protocol

Das folgende Protokoll ist ein Auszug aus Davies et al., Ein Assay zur Messung der Auswirkungen von Ethanol auf die Fortbewegungsgeschwindigkeit von Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015).

1. Schritte, die am Tag vor dem Assay durchzuführen sind

   1. Pflücken Sie Würmer im L4-Stadium auf frische Nematoden-Wachstumsmedium (NGM)-Platten, die mit einem Rasen von OP50 E. coli besät sind, und kultivieren Sie sie bei 20 °C O/N. Für jede Assay-Bedingung sind 10 Würme....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
C. elegans stämmt	Caenorhabditis Genetics Center
60 x 15 mm Petriplatten, dreifach belüftet	Greiner Bio-One	628161	Andere Tellermarken reichen aus.
NGM Agar	verschieden		NaCl (3 g/L), Agar (17 g/L), Pepton (2,5 g/L), 1 ml Cholesterin (5 mg/ml in Ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O
Pinzette	verschieden		z.B. Fisher Scientific #10300
37 °C Inkubator	verschieden		Zum Trocknen von Agar
Kupferringe	Klempnermeister	STK#35583 (Dichtung mit 48 Kappengewinden)	1,6 cm Innendurchmesser, 1,8 cm Außendurchmesser Kupferringe
100% Ethanol	verschieden
Parafilm M	Bemis	PM996
CCD-Kamera	QImaging	RET-4000R-F-M-12	Diese Kamera hat ein großes Sichtfeld.
Stereomikroskop mit C-Mount und 0,5X Objektiv	Leica	MZ6	Auslaufmodell, M60 ist das aktuelle Äquivalent.
Lichtquelle	Schott	Nr. A08923	3" x3" Hintergrundbeleuchtung für gleichmäßige Ausleuchtung über das gesamte Sichtfeld
Bildgebungs- und Tracking-Software	Medienkybernetik	ImagePro-Plus v6.0-6.3	Neuere Versionen der Software verfügen über Tracking-Funktionen.