Een belangrijke hindernis in de huidige stamceltherapie is het bepalen van de meest effectieve methode om deze cellen te leveren aan gastheer weefsels. Hier beschrijven we een chitosan-gebaseerde levering methode die is efficiënt en eenvoudig in aanpak, terwijl vet-afgeleide stamcellen om hun multipotent te behouden.
Multipotente stamcellen is gebleken zeer nuttig in het gebied van regeneratieve geneeskunde 1-3. Om echter doeltreffend te gebruiken deze cellen voor weefselregeneratie, moet een aantal variabelen wordt gehouden. Deze variabelen omvatten: het totale volume en de oppervlakte van de implantatie, de mechanische eigenschappen van het weefsel en het weefsel micro, waardoor de hoeveelheid van vascularisatie en de componenten van de extracellulaire matrix omvat. Daarom moeten de materialen gebruikt om deze cellen te leveren biocompatibel met een gedefinieerde chemische samenstelling terwijl een mechanische sterkte dat het gastheerweefsel nabootst. Deze materialen moet zijn doorlaatbaar voor zuurstof en voedingsstoffen een gunstige micro voor cellen te hechten en vermenigvuldigen voorzien. Chitosan is een kationische polysaccharide met uitstekende biocompatibiliteit, gemakkelijk chemisch worden gemodificeerd en een hoge affiniteit voor de te binden in vivo macromolecules 4-5. Chitosan bootst de glycosaminoglycaan gedeelte van de extracellulaire matrix, waardoor het functioneren als een substraat voor celadhesie, en proliferatie. In deze studie gebruik chitosan in de vorm van microsferen vet-stamcellen (ASC) leveren aan een collageen gebaseerd driedimensionale scaffold 6. Een ideale cel-microsfeer verhouding werd bepaald ten opzichte van incubatietijd en celdichtheid maximum aantal cellen die kunnen worden geladen bereiken. Als ASC worden gezaaid op de chitosan microsferen (CSM), worden ze ingebed in een collageen steiger en kan worden gehandhaafd in cultuur voor langere perioden. Samenvattend deze studie een werkwijze precies stamcellen binnen een driedimensionale biomateriaal scaffold.
Een belangrijke hindernis in stamcel-gebaseerde therapie is het ontwikkelen van efficiënte methoden voor de levering van cellen aan de bepaalde gebieden voor reparatie. Als gevolg van patiënt tot patiënt variabiliteit, het weefseltype, letsel grootte en diepte; moet de methodiek van het leveren van stamcellen worden bepaald op een case-by-case basis. Hoewel het inbedden van stamcellen binnen een matrix en leveren ze aan de wond lijkt een volgende logische aanpak voor tissue engineering, enkele technische hindernissen…
The authors have nothing to disclose.
DOZ wordt ondersteund door een subsidie van The Genève Foundation. SN werd ondersteund door een Postdoctoraal Fellowship Grant van de Pittsburgh Tissue Engineering Initiative.
Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments |
Hanks BalancedSalt Solution (HBSS) | Gibco | 14175 | Consumable |
Fetal Bovine Serum | Hyclone | SH30071.03 | Consumable |
Collagenase Type II | Sigma-Aldrich | C6685 | Consumable |
70-μm nylon mesh filter | BD Biosciences | 352350 | Consumable |
100-μm nylon mesh filter | BD Biosciences | 352360 | Consumable |
MesenPRO Growth Medium System | Invitrogen | 12746-012 | Consumable |
L-glutamine | Gibco | 25030 | Consumable |
T75 Tissue Culture Flask | BD Biosciences | 137787 | Consumable |
Chitosan | Sigma-Aldrich | 448869 | Consumable |
Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 320099 | Consumable |
N-Octanol | Acros Organics | 150630025 | Consumable |
Sorbitan-Mono-oleate | Sigma-Aldrich | S6760 | Consumable |
Potassium Hydroxide | Sigma-Aldrich | P1767 | Consumable |
Acetone | Fisher Scientific | L-4859 | Consumable |
Ethanol | Sigma-Aldrich | 270741 | Consumable |
Trinitro Benzenesulfonic Acid | Sigma-Aldrich | P2297 | Consumable |
Hydrochloric Acid | Sigma-Aldrich | 320331 | Consumable |
Ethyl Ether | Sigma-Aldrich | 472-484 | Consumable |
8-μm Tissue Culture Plate Inserts | BD Biosciences | 353097 | Consumable |
1.5-ml Microcentrifuge Tubes | Fisher | 05-408-129 | Consumable |
MTT Reagent | Invitrogen | M6494 | Consumable |
Dimethyl Sulfoxide | Sigma-Aldrich | D8779 | Consumable |
Qtracker Cell Labeling Kit (Q tracker 655) | Molecular probes | Q2502PMP | Consumable |
Type 1 Collagen | Travigen | 3447-020-01 | Consumable |
Sodium Hydroxide | Sigma-Aldrich | S8045 | Consumable |
12-Well Tissue Culture Plates | BD Biosciences | 353043 | Consumable |
Centrifuge | Eppendorf | 5417R | Equipment |
Orbital Shaker | New Brunswick Scienctific | C24 | Equipment |
Humidified Incubator with Air-5% CO2 | Thermo Scientific | Model 370 | Equipment |
Overhead Stirrer | IKA | Visc6000 | Equipment |
Magnetic Stirrer | Corning | PC-210 | Equipment |
Vacuum Desiccator | – | – | Equipment |
Particle Size Analyzer | Malvern | STP2000 Spraytec | Equipment |
Water Bath | Fisher Scientific | Isotemp210 | Equipment |
Spectrophotometer | Beckman | Beckman Coulter DU800UV/Visible Spectrophotometer | Equipment |
Vortex | Diagger | 3030a | Equipment |
Microplate Reader | Molecular Devices | SpectraMax M2 | Equipment |
Light/Fluorescence Microscope | Olympus | IX71 | Equipment |
Confocal Microscope | Olympus | FV-500 Laser Scanning Confocal Microscope | Equipment |
Scanning Electron Microscope | Carl Zeiss MicroImaging | Leo 435 VP | Equipment |
Transmission Electron Microscope | JEOL | JEOL 1230 | Equipment |