Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

زرع مثلي الأمعاء الصغيرة في الفئران

Published: November 6, 2012 doi: 10.3791/4102
* These authors contributed equally

Summary

أصبح صغيرا زرع الأمعاء خيار العلاج المقبولة لمرضى الفشل المعوية لا رجعة فيه. نموذجنا التجريبي لزرع مثلي الأمعاء الدقيقة في الفئران بمثابة أداة موثوقة لمعالجة المناعية الأساسية والعمليات الالتهابية التي تعقد زرع الأمعاء.

Abstract

أصبح صغيرا زرع الأمعاء خيارا مقبولا السريرية للمرضى الذين يعانون متلازمة الأمعاء القصيرة وفشل التغذية الوريدية (فشل معوي لا رجعة فيه). في مراكز متخصصة واستراتيجيات تحسين إدارة المنطوق أدت إلى المريض القصيرة والمتوسطة الأجل وبقاء ممتازة الكسب غير المشروع مع توفير نوعية عالية من الحياة 1،3. وخلافا للزرع أكثر شيوعا من أجهزة صلبة أخرى (أي القلب والكبد) الآليات الكامنة وظيفة العديد من الكسب غير المشروع والتعديلات المناعية الناجمة عن زرع الأمعاء ليست معروفة تماما 6،7. حلقات الرفض الحاد، والمزمن الفشل الإنتان الكسب غير المشروع هي العقبات الرئيسية التي تسهم نتائج لا تزال مواتية على المدى الطويل أقل وعرقلة لعمل أكثر على نطاق واسع على الرغم من إجراء عدد متزايد من المرضى على التغذية الوريدية الرئيسية التي ستستفيد من المحتمل زرع من هذا القبيل. الأمعاء الدقيقة يحتوي علىعدد كبير من الركاب وكوسيتيس يشار إلى جزء من القناة الهضمية نظام اللمفاوية المرتبطة (GALT) هذا الجزء من كونها السبب في immunogenity عالية من الكسب غير المشروع المعوية. وجود وبالقرب من العديد من commensals ومسببات الأمراض في الأمعاء يفسر شدة الإنتان الحلقات مرة واحدة للخطر سلامة الغشاء المخاطي الكسب غير المشروع (على سبيل المثال، رفض). للمضي قدما في مجال البيانات وزرع الأمعاء multiorgan أكثر المتولدة من النماذج الحيوانية موثوقة ومجدية هو مطلوب. تقديم نموذج يجمع بين كل من الموثوقية وهنا الجدوى متى تم انشاؤه بطريقة موحدة ويمكن أن توفر معلومات قيمة في مجمع آليات الكامنة، الجزيئية الخلوية والوظيفية التي يتم تشغيلها بواسطة زرع الأمعاء. وقد استخدمنا بنجاح وصقل الإجراءات الموصوفة على مدى أكثر من 5 سنوات في مختبرنا 8-11. وإن الرب القائم على الفيديو الشكل هو مفيدة بشكل خاص للتدليل على اإلجراءات المعقدةوتجنب المزالق dure الأولية للجماعات تخطط لإنشاء نموذج القوارض مثلي التحقيق زرع الأمعاء.

Protocol

1. عملية المانحة

  1. يجب أن تبقى الفئران المانحة الصوم لمدة 24 ساعة (حرية الوصول إلى المياه / الجلوكوز الحل).
  2. للحث على Isoflurane التخدير عن طريق الاستنشاق، وتبدأ مع 2٪ على مستوى رذاذ، ومن ثم خفض إلى 1٪ بعد تنفيذ البطن. أداء قليل إصبع القدم للتحقق من التخدير.
  3. حلق البطن وتنظيف الجلد مع الإعدادية 3 مرات (Kodan). ثم إجراء شق تحت الجلد بعد إعطاء متوسط ​​للمسكن.
  4. بعد ملفوفة في شاش الكسب غير المشروع غارقة المالحة، فصل الالتصاقات الفسيولوجية بين البنكرياس والقولون الصاعد بلطف مع Q-تلميح (تحت المجهر الجراحي مع التكبير 6X).
  5. Ligate وتقسيم السفن مغص اللفائفية والحق والشرق باستخدام الحرير 7-0. بعد نشر القولون الصاعد إلى الجانب الأيمن من الوريد المساريقي العلوي (SMV)، يمكن تحديد الأوعية مغص اللفائفية والأيمن والأوسط لربط وتقسيم باستخدام 7-0 العلاقات بين البلدين.
  6. سحب المعدة إلى أعلى، بحيث يتم تقويمها على SMV بأكملها وعرضة للخطر. استخدام المشبك البعوض لتراجع. وعقد المشبك من الكتلة البلاستيسين شكلت في شكل حسب الحاجة.
  7. Ligate وتقسيم الأوردة البنكرياس الإثنى عشر القادمة من SMV. يجب على كل صغيرة البنكرياس الإثنى عشر القادمة من الأوردة التي تم تحديدها بعناية SMV، ligated مع الحرير و7-0 مقسمة قبل أن يتم إزالة الأنسجة البنكرياس من الكسب غير المشروع.
  8. Ligate وتقسيم النسيج الضام تفقد بما في ذلك جميع الأوعية اللمفاوية بين SMV والشريان الأورطي البطني. مع الكسب غير المشروع لا يزال في الجانب الأيمن من البطن، وفقدان النسيج الضام بما في ذلك جميع الأوعية اللمفاوية بين SMV والشريان الأورطي البطني يمكن الوصول إليها. يجب ligated هذا النسيج الضام باستخدام الحرير 7-0 وينقسم إلى تجنب ثر اللمف بعد الجراحة من الكسب غير المشروع المعوية.
  9. Ligate وتقسيم الشريان الكلوي الحق. بعد تقسيم النسيج الضام، الشريان الكلوي يصبح الحق ميسرةوligated ه وتقسيم واستخدام 7-0 الحرير.
  10. heparinise للنظام الفئران باستخدام 200 وحدة من الهيبارين الرابع عن طريق الوريد القضيب.
  11. Ligate الشرايين الهامشية، وتقسيم الأمعاء الدقيقة عند تقاطع الإثناعشري صائمية وعلى محطة الدقاق.
  12. والشريان الأورطي ligated بشكل قريب إلى أصل SMA. ومقطوع الوريد البابي عند التقاء مع الوريد الطحالي. ثم يتم حصادها الكسب غير المشروع مع يتألف من عنيق الأوعية الدموية في الجزء SMA مع الأبهر.

2. Backtable الداخلي

  1. يروي الكسب غير المشروع باستخدام 3 مل من جامعة ويسكونسن الحل (UW) في 4 درجات مئوية عبر قناة ري الأبهر وتجويف الأمعاء من نهاية صائمية مع 30 مل من محلول N-Nebacetin البولية عند 4 ° C (التجويف الري إلزامي) .

مباشرة بعد استخراج الكسب غير المشروع، يتم استخدام قناة الأبهر لنضح مع 3 مل حل UW مبردة. لهذا، 20 قسطرة الرابع G علىيتم استخدام حقنة 10 مل. وجوب مراعاة سائل الإرواء بالتدفق بحرية من الوريد البابي المقسمة. للري المعوية مع Nebacetin، يتم استخدام حقنة 50 مل.

  1. تخزين الكسب غير المشروع في حل UW في C ° 4 أثناء إعداد المتلقي.

3. المتلقي عملية

  1. يجب أن تبقى الفئران المتلقية صيام 24 ساعة (حرية الوصول إلى المياه / الجلوكوز الحل).
  2. للحث على Isoflurane التخدير عن طريق الاستنشاق، وتبدأ مع 2٪ على مستوى رذاذ، ومن ثم خفض إلى 1٪ بعد تنفيذ البطن. أداء قليل إصبع القدم للتحقق من التخدير.
  3. حلق البطن وتنظيف الجلد مع الإعدادية 3 مرات (Kodan). ثم إجراء شق متوسط ​​من تحت الجلد بعد إعطاء SC كاربروفين ملغ / كغ (5) لتسكين أثناء العملية.
  4. التفاف الأمعاء المتلقي العادي في الشاش غارقة المالحة ووضعه على صدره المستلم.
  5. فتح خلف البريتوان بصراحة مع Q-نصائح، وفضح abdomiونال الأبهر الوريد الأجوف السفلي أقل بقليل من السفن الكلوي وصولا الى مستوى الأوعية الحرقفية، إذا لزم الأمر أيضا استخدام microscissors. Ligate في tribuaries صغيرة أسفل الظهر والعمود الفقري من الشريان الأورطي والوريد الأجوف باستخدام الحرير 7-0 لتجنب فقدان الدم. (للقيام بذلك، قم بتغيير تكبير الميكروسكوب الجراحي لل16X).
  6. عبر المشبك الشريان الأورطي وIVC أدناه السفن الكلوي الأيسر قريب وفوق التشعب الحرقفي باستخدام مقاطع microvessel بشكل أقصى. يتم استخدام واحد فقط المشبك قريب وكذلك بشكل أقصى للقضاء على حد سواء سفن في وقت واحد. شق كل السفن التي تستخدم الأمامية لmicroknife وتغسل الدم المتبقية.
  7. إنشاء مفاغرة نهاية إلى الجانب بين الجزء الأبهر والشريان الأبهر الكسب غير المشروع المستلم infrarenal باستخدام المستمر خياطة البرولين 10-0 .. في البداية، يتم وضع الكسب غير المشروع على الجانب الأيمن من البطن (رئيس الفئران وضعه عند الساعة 12 ظهرا) لتنفيذ غرز الجدار الخلفي للمفاغرة شريانية وتعادل للخياطة أقل الإقامة. الEN، يتم تشغيل الكسب غير المشروع إلى الجانب الأيسر من البطن (رئيس الفئران وضعه في الساعة 9 صباحا) لفضح وخياطة الجدار الأمامي للمفاغرة.
  8. يتم إجراء مفاغرة نهاية إلى الجانب بين الوريد البابي والكسب غير المشروع IVC المستلم أيضا عن طريق تشغيل الغرز باستخدام 10-0 البرولين. مع الفئران جانبية لا يزال الكذب (الرأس في موضع الساعة 9)، يتم وضع الكسب غير المشروع على الجانب الأيسر من البطن ويتم وضع خياطة أقل الإقامة. بدء تشغيل مفاغرة مع الجدار الخلفي من داخل السفينة. بعد ربط الخيط أقل الإقامة، يمكن إجراء غرز الجدار الأمامي من الخارج.
  9. إزالة المشابك البعيدة الأولى، تليها المشابك العليا. يتم التحكم من قبل أي نزيف تفاغري الضغط المباشر باستخدام Q-نصائح. يجب فحص الكسب غير المشروع لضخه متساوية وسريعة.
  10. يقطع الأمعاء المتلقي الصغير كامل بعد ربط الأوعية المساريقي. المجموع الفرعي المتلقين الخضوع اقتطاع الأمعاء، والحفاظ على 2-3 سم من بروximal الصائم واللفائفي من 1 سم البعيدة.
  11. استعادة استمرارية المعوية عن طريق الداني (jejuno-فغر الصائم) والبعيدة (فغر اللفائفي اللفائفي) من طرف الى طرف anastomoses المعوية باستخدام طبقة واحدة توقف خياطة مع Monocryl 6-0. وهناك حاجة إلى نحو 16 خيوط لإكمال anastomoses.
  12. ري التجويف البريتوني بمحلول ملحي طبيعي حتى نظيفة. 2 مل من إدارة الغشاء البريتونى المالحة العادية لاستبدال السوائل. ثم أغلق البطن باستخدام الخيط المستمر مع 3-0 Vicryl للطبقة العضلات بالإضافة إلى خياطة الجلد المستمر.
  13. وينبغي في فترة ما بعد الجراحة أن تبقى الفئران الصيام (مع إمكانية الحصول على المياه ومحلول الجلوكوز) لآخر على مدار 24 ساعة ثم إعادة تشغيل على مستوى تشاو الجرذان والمياه libitum الإعلانية. ينبغي أن تدار مع تسكين كاربروفين لمدة 3 أيام (انظر أدناه الجرعة).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

بعد العملية الجراحية الاعتيادية

ينبغي أن الحيوانات المزروعة التعافي سريعا من الإجراء تحت مصباح الحرارة لحوالي 1 ساعة. انخفاض حرارة الجسم هو أحد الأسباب الرئيسية لوفيات ما بعد الجراحة وينبغي تجنب بعناية داخل وبعد العمل الجراحي. يجب أن يتم استبدال السوائل أثناء العملية الخسائر عن طريق الحقن الشوري من المياه المالحة 2.5 مل العادية بالإضافة إلى 2.5 مل الجلوكوز 5٪ كل ساعة 8 لأول 24 ساعة. ينبغي أن الفئران أيضا حرية الوصول إلى حل الجلوكوز (أو النظام الغذائي هلام) وبو المياه لأول 24 ساعة بعد العمل الجراحي. بعد هذه الفترة ينبغي أن تستعيد الطبيعي التغذية السلوك مع حرية الوصول إلى طعام الفئران القياسية والمياه libitum الإعلانية. يتم التحكم من قبل إدارة الألم من 5 كاربروفين اليومية SC ملغ / كغ لمدة ثلاثة أيام، مع الطلقة الأولى على أن تدار عند التحريض التخدير. فقط مطلوب الوقاية باستخدام المضادات الحيوية المحيطة بالجراحة في الإعداد خيفي، ويمكن أن تدار على مدى الأيام 5-7 (الأمبيسلين 15 ملغ / كغ الشوري، س. 12 ساعة). عاميجب المظهر، حالة الفراء وكذلك ظهور المخاطية تكون طبيعية. بعد POD (1) ومستوى النشاط يجب أن تعود إلى الحالة قبل الجراحة، والسلوك الشاذ أو امبال؛ فاتر الشعور يوحي المضاعفات الجراحية في وقت مبكر. بعد خسارة أولية تصل إلى 20٪ من وزن الجسم فإن الفئران اضافة الى زيادة الوزن مرة أخرى بعد العملية الجراحية يوم حول 6-8 ويجب أن يصل إليه حوالي 90٪ من وزنهم قبل الجراحة عادة بعد العملية الجراحية يوم حول 14 (في الإعداد إسوية الجينات دون رفض).

بعد العملية الجراحية مضاعفات

وينبغي النظر كما هو مذكور أعلاه، وانتفاخ البطن، والسلوك امبال؛ فاتر الشعور، وقف التغذية والتغيرات في المظهر العام (الفراء تكدرت، من إفراز العينين) وأعراض المضاعفات المحتملة. وينبغي أن ينظر إلى الحيوانات من قبل الجراح وطبيب بيطري و. ظروف مثل الدولة، والجفاف بسبب التهابات علوص، التهاب الصفاق بسبب تضيق من مفاغرة الأمعاء، يجب عدم كفاية مسكنات للألم وغيرها تكون القاعدةد من والمعالجة. إذا كان الحيوان لا على الرغم من العلاج استعادة، يجب أن يتم تقييم التجربة وقف على أساس كل حالة على القضية وفقا للوائح تطبيق التجربة الحيوانية.

الرقم 1A
الرقم 1A. الصكوك.
1. المجهر (LEICA)
2. جهاز التخدير (EICKEMEYER)

الرقم 1B
الرقم 1B. الصكوك.
3. صبي
4. مشرط الإلكترونية (GEIGER)
5. ملقط جراحي
6. ديباكي ملقط المنحني
7. ملقط المنحني الصغيرة
8. ملقط المنحني الصغيرة
9. ملقط الدقيقة على التوالي 1
10. ملقط الدقيقة على التوالي 2
11. الدقيقة إبرة حامل
12. إبرة حامل
13. البعوض المشبك
14. مقص 1
15. مقص 2
16. Microscissors
17. الدقيقة المبضع

"الشكل الرقم 1C. الصكوك.
18. Microclamps
19. قنية وQ-نصائح (لا يصور)
20. المحاقن (50 مل، 10 مل، 2.5 لتر، 1 مل)

الرقم 1D
الرقم 1C. الصكوك.
21. UW حل لتخزين الكسب غير المشروع
22. المضادات الحيوية (nebacetin البولية-N) للري التجويف الكسب غير المشروع
23. UW لنضح الكسب غير المشروع
24. العادي المالحة
25. الطبق مع ملحي (لbacktable)

الشكل 2
الشكل 2. ما بعد الجراحة الوزن المتوسط ​​(البيانات التراكمية). ويبين الشكل 2 متوسط ​​الوزن بعد العملية الجراحية بعد زرع مثلي الأمعاء الدقيقة. بعد خسارة أولية تصل إلى 20٪ من وزن الجسم في الفئران اضافة الى زيادة الوزن مرة أخرى بعد العملية الجراحية يوم حول 6-8 ويجب أن يصل إليه 90٪ من preop بهمالوزن erative عادة حوالي اليوم بعد العملية الجراحية 14 (في الإعداد إسوية الجينات دون رفض / كبت المناعة). يمثل الشكل 2 البيانات فقدان الوزن، والبقاء على قيد الحياة لا، تناقص عدد الحيوانات المتاحة لقياس الوزن ويرجع ذلك أساسا إلى sacrifing الحيوانات في التجارب.

الشكل 3
الشكل 3. النسيج البنكرياس (السهم) لابد من إزالتها من القولون.

الشكل 4
الشكل 4. بعد ligating وتقسيم النسيج الضام تفقد بما في ذلك جميع الأوعية اللمفاوية وبين SMV الشريان الأورطي البطني، وينقسم الشريان الكلوي الحق (السهم) بين الحروف المركبة الحرير.

الشكل 5
الشكل 5. الإرواء من الكسب غير المشروع مع حل UW عبر قناة الأبهر.

الشكل 6
الشكل 6. بعد إعداد المتلقي الوريد الأجوف والشريان الأورطي يتعرض لها السفن، وعلى استعداد للقط.

الشكل 7
يتم تنفيذ الشكل 7. الصليب المشبك على الوريد الأجوف والشريان الأورطي في وقت واحد باستخدام microclamps.

الرقم 8
الشكل 8 (أ) يتم تنفيذ مفاغرة aorto الأبهر باستخدام الخيوط الجراحية الإقامة. (ب) بعد الانتهاء من مفاغرة aorto الأبهر، سيتم إجراء مفاغرة portocaval المقبل. الخيط أقل الإقامة بالفعل في المكان.

الشكل 9
الشكل 9 (أ) يتم تشغيل مفاغرة portocaval بعد خياطة الثاني هو إقامة في المكان. (ب) بعد جompletion من مفاغرة portocaval.

الشكل 10
الشكل 10. بعد إزالة المشابك الكسب غير المشروع reperfuses أيضا.

الشكل 11
الشكل 11 (أ) الإيداع من الغرز لإقامة مفاغرة الأمعاء. (ب) تم انجازها مفاغرة الأمعاء.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

في حين وصفت نماذج زرع الأمعاء في الفئران في وقت مبكر كما هو الحال في ال 5 1970ies معظم النماذج المستخدمة مؤخرا تنطوي على زرع الأمعاء منتبذ باستخدام تقنيات مختلفة 13. في حين أن الإجراءات منتبذ بشكل عام لديها ميزة التقنيات المجهرية أسهل وأسهل الوصول إلى الكسب غير المشروع لتقييم وزرع الأمعاء منتبذ لديه عيب كبير عدم مراعاة التفاعلات متعددة من الأمعاء الصغيرة المزروعة وجوانبه الفنية مثل النشاط وتقلص وظيفة الحاجز المخاطي الذي يميز والكسب غير المشروع مثلي في سياق مجموعة واسعة من commensals ومسببات الأمراض. مجموعتنا اكتسبت خبرة كبيرة هنا مع نموذج مثلي وصف النتائج التي توصلنا إليها تشير إلى وأن العديد من التعديلات المحددة التي تسببها الاستجابات المناعية الالتهابية والتكيف يجب أن يتم تقييمها في سياق برو مع وظيفيةperties من الأمعاء الصغيرة المزروعة مثل انقباض وسلامة الغشاء المخاطي. من ملاحظة، والتقنيات المستخدمة هنا تفاغري لا تشمل استخدام الأصفاد الشرياني الوريدي أو بعضها وقد ثبت لتسهيل الإجراءات وخفض وقت حرج نقص التروية الدافئ، وخاصة في نماذج من زرع multivisceral 12،14. على الرغم من أنه قد يكون من الضروري استخدام تقنيات صفعة في نماذج القوارض من زرع multivisceral، فإن احتمال complicative من الأصفاد أدى بنا إلى تجنب تقنيات مشابهة في هذا النموذج من زرع الأمعاء واحد. ونحن لم يحاول استخدام تقنيات الصرف المدخل في هذا النموذج. وبصرف النظر عن كونها تحديا تقنيا (الوريد البابي صغيرة قطرها يمكن أن يؤدي إلى مشاكل تدفق الوريدي)، الأمر الذي جعل النموذج مجموعها أكثر الصعب تحديد - بل هو حقيقة أنه في زرع الأمعاء السريرية الصرف النظامية ويستخدم في معظم الحالات. وهكذا، فإن تقنية refl وصفالنظام الأوروبي الممارسة السريرية إلى جانب الجدوى الفنية. بوابة الصرف من الطعوم لم يثبت أن تترافق مع نتائج متفوقة في العديد من الدراسات السريرية والتجريبية 2،4. ويمكن تحقيق بعض الأحيان نقص التروية قصيرة بما فيه الكفاية لحوالي 35 دقيقة اللازمة لبقاء الحيوانات مستقرة بعد الانتهاء من منحنى التعلم لهذا النموذج.

يمكن تعلم زرع مثلي الأمعاء الدقيقة وفقا لهذا البروتوكول من قبل الباحث من ذوي الخبرة بعد تنفيذ الإجراءات microsurgically 30-40 تقريبا. التصور للخفض الذي يحققه الشكل إن الرب يسمح الملاحظة البصرية المباشرة والاستنساخ الدقيق لالتقنيات المستخدمة التي تؤدي ربما إلى إنشاء أسرع طريقة وأقل تضحية الحيوانات. النقاط الحرجة هي النزيف، الباردة والحارة ونقص تروية الأمعاء الوقت تفاغري قصور تضيق /. الساعة نقص التروية الباردة في هذا الإعداد التجريبية ليست حاسمة مثل ische الحارةيجب ميا الوقت ولكن لا يتجاوز 45 دقيقة. يجب أن تكون دافئة نقص التروية الوقت حوالي 35 دقيقة، وكذلك لا تتجاوز 45 دقيقة، لأن هذا قد يسبب وفيات أعلى ما بعد الجراحة. ويرتبط المتبرع المثالي والوزن المستفيدة حوالي 200 غرام لأن أصغر الفئران لا تتسامح مع هذا الإجراء بشكل جيد والوزن أكثر من 300 غ مع الدهون داخل البطن المفرط. الفئران تفقد ما يصل إلى 20٪ من وزن الجسم في فترة ما بعد الجراحة مباشرة ولكن يجب أن يبدأ لزيادة الوزن مرة أخرى بعد 6-8 أيام بعد العمل الجراحي (الشكل 2). يجب أن يتم تنفيذ فحوصات طبية يوميا (اليقظة والفراء ومظهر المخاطية، والوزن، ونوعية وتواتر البراز) حتى يتم التضحية الحيوانية. نوصي الإدارة اليومية للمضادات الحيوية وتسكين ما لا يقل عن الأيام الثلاثة الأولى على النحو المبين أعلاه. بعد الممارسة الأولية، وخاصة من الاوعية الدموية الدقيقة والأمعاء anastomoses، وهذا النموذج يوفر موثوقة ومستقرة على المدى الطويل من البقاء على قيد الحياة في جميع أنحاء 80-90٪ في الإعداد إسوية الجينات. في allogeNIC بقاء الإعداد أقل عموما، ويعتمد أساسا على الظواهر المناعية مثل رفض الحادة والمزمنة ويمكن أن تختلف على نطاق واسع وفقا لنظام مناعة المستخدمة واختبارها.

الملاحظات الفنية: الساعة العملية المانحة يجب أن يكون حوالي 45 دقيقة. يجب تشغيل المتلقي لا يتجاوز 1.5 ساعة من ذلك بكثير. وينبغي استخدام وسادة التدفئة لتجنب انخفاض حرارة الجسم بشكل روتيني في المتلقي. للوصول السهل الأوعية الدموية، يمكن مقنى الوريد الذيل الأفقي للمتلقي في بداية الإجراء باستخدام قسطرة الوريد مجموعة ال 22. قد الري من تجويف الأمعاء، كما هو موضح أعلاه قد لا تكون ضرورية، إهمال هذه الخطوة أن معرفتنا لا آثار سلبية على نتائج والوفيات.

متطلبات الدراسة الحيوان: وكانت الحيوانات وفقا للقوانين واللوائح تطبيق لجمهورية ألمانيا الاتحادية، الدولة شمال الراين وWestfalia. الأرقام التي تحت ثيقة رانه تمت الموافقة على تجارب يمكن طلب من مؤلف كتاب المقابلة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution Nycomed 6967855
Ampicillin Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl) Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1x33 mm Braun
i.v. Catheter G 22 0.9x25 mm Braun
Kodan Skin Prep Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution Braun
Curved forceps small FineScienceTools 11009-13
Micro forceps curved AESCULAP BD 333
Micro forceps curved AESCULAP FD281R
Micro forceps straight 1 WPI 5
Micro forceps straight 2 WPI 2
Micro needle holder WPI 14081
Micro scissors FineScienceTools 15006-09
Micro scalpel MANI Ophthalmic knife
Micro clamps AESCULAP FB329R

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
  2. Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
  3. Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
  4. Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
  5. Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
  6. Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
  7. Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
  8. Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
  9. Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
  10. Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
  11. Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
  12. Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
  13. Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
  14. Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).

Tags

الطب، العدد 69، التشريح، علم وظائف الأعضاء، علم المناعة، وزرع الأمعاء، orthotopic زراعة الأمعاء الدقيقة، الرفض الحاد، الأمعاء الدقيقة، جراحة، عملية، الجرذ
زرع مثلي الأمعاء الصغيرة في الفئران
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Kitamura, K., von Websky, M. W.,More

Kitamura, K., von Websky, M. W., Ohsawa, I., Jaffari, A., Pech, T. C., Vilz, T., Wehner, S., Uemoto, S., Kalff, J. C., Schaefer, N. Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (69), e4102, doi:10.3791/4102 (2012).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter