Summary
छोटी आंत प्रत्यारोपण अपरिवर्तनीय आंत्र की विफलता के साथ रोगियों के लिए एक स्वीकार किए जाते हैं उपचार के विकल्प बन गया है. हमारे चूहों में orthotopic छोटी आंत प्रत्यारोपण की प्रयोगात्मक मॉडल अंतर्निहित immunologic और भड़काऊ प्रक्रियाओं है कि आंतों प्रत्यारोपण जटिल को संबोधित करने के लिए एक विश्वसनीय उपकरण के रूप में कार्य करता है.
Abstract
छोटी आंत प्रत्यारोपण छोटी आंत सिंड्रोम और parenteral पोषण (अपरिवर्तनीय आंतों विफलता) की विफलता के साथ रोगियों के लिए एक स्वीकृत नैदानिक विकल्प बन गया है. विशेष केंद्रों में ऑपरेटिव में सुधार और प्रबंध रणनीतियों उत्कृष्ट लघु और मध्यम अवधि रोगी और भ्रष्टाचार के अस्तित्व के लिए मार्ग प्रशस्त किया है जबकि 1,3 जीवन के उच्च गुणवत्ता प्रदान. (यानी दिल, जिगर) के विपरीत अन्य ठोस अंगों के अधिक आम प्रत्यारोपण में भ्रष्टाचार समारोह और immunologic आंत्र प्रत्यारोपण द्वारा प्रेरित परिवर्तन के कई अंतर्निहित तंत्र 6,7 पूरी तरह में जाना जाता है नहीं कर रहे हैं. तीव्र अस्वीकृति, पूति पुरानी भ्रष्टाचार और विफलता के प्रकरणों मुख्य अभी भी कम अनुकूल दीर्घकालिक परिणाम के लिए योगदान और parenteral पोषण घर पर रोगियों को जो संभवतः इस तरह के प्रत्यारोपण से लाभ होगा की बढ़ती संख्या के बावजूद प्रक्रिया के एक अधिक व्यापक रोजगार निरोधक बाधाएं हैं. छोटी आंत शामिलयात्री ल्यूकोसाइट की एक बड़ी संख्या सामान्यतः पेट जुड़े lymphoid (Galt) प्रणाली आंत्र भ्रष्टाचार के उच्च immunogenity के लिए कारण की इस हिस्सा होने के भाग के रूप में करने के लिए भेजा. उपस्थिति और पेट में कई commensals और रोगज़नक़ों के करीब निकटता पूति एपिसोड की गंभीरता बताते हैं कि एक बार भ्रष्टाचार mucosal अखंडता अस्वीकृति द्वारा (उदाहरण के लिए) समझौता किया है. आंत्र और multiorgan प्रत्यारोपण अधिक विश्वसनीय और व्यावहारिक पशु मॉडल से उत्पन्न डेटा के क्षेत्र अग्रिम की जरूरत है. मॉडल के साथ साथ एक बार एक मानकीकृत तरीके से स्थापित दोनों विश्वसनीयता और व्यवहार्यता को जोड़ती है और अंतर्निहित जटिल आणविक, सेलुलर और कार्यात्मक तंत्र कि आंतों प्रत्यारोपण से शुरू हो रहे में बहुमूल्य अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकते हैं. हम सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया है और हमारे 8-11 प्रयोगशाला में अधिक से अधिक 5 वर्षों से अधिक परिष्कृत वर्णित प्रक्रिया. जौव वीडियो आधारित स्वरूप विशेष रूप से करने के लिए जटिल प्रक्रियाओं को प्रदर्शित करने के लिए उपयोगी हैdure और आंतों प्रत्यारोपण की जांच के लिए एक orthotopic कृंतक मॉडल स्थापित करने की योजना बना समूहों के लिए प्रारंभिक नुकसान से बचने के.
Protocol
1. दाता ऑपरेशन
- दाता चूहे 24 घंटे (पानी / ग्लूकोज समाधान करने के लिए स्वतंत्र पहुँच) के लिए उपवास रखा जाना चाहिए.
- Isoflurane अभिश्वसन संज्ञाहरण प्रेरित करने के लिए, मानक atomizer पर 2% के साथ शुरू, और फिर laparotomy प्रदर्शन के बाद 1% कम है. एक पैर की अंगुली चुटकी का प्रदर्शन करने के लिए बेहोश करने की क्रिया की जांच.
- पेट दाढ़ी और त्वचा प्रस्तुत करने 3 बार (KODAN) के साथ साफ. फिर एनाल्जेसिक उपचर्म प्रशासन के बाद एक औसत चीरा प्रदर्शन.
- बाद भ्रष्टाचार खारा लथपथ धुंध में लपेटा जाता है, अग्न्याशय और एक क्यू की नोक (6x बढ़ाई साथ सर्जिकल माइक्रोस्कोप के तहत) के साथ आरोही धीरे बृहदान्त्र के बीच शारीरिक adhesions अलग.
- कटी घमनी को बांधना और ileocecal और सही मध्यम शूल 7-0 रेशम का उपयोग वाहिकाओं विभाजित. आरोही बृहदांत्र के बाद (SMV) बेहतर mesenteric नस के दाईं ओर फैला हुआ है, ileocecal, सही और मध्य शूल वाहिकाओं ligation और विभाजन 7-0 संबंधों का उपयोग कर के लिए पहचाना जा सकता है.
- पेट उर्ध्व वापस लेना है, ताकि पूरे SMV बाहर स्ट्रेट है और उजागर. निरस्त करने के लिए एक मच्छर क्लैंप का प्रयोग करें. क्लैंप प्लास्टिसिन आकार में गठन के रूप में की जरूरत है जन द्वारा आयोजित किया जाता है.
- कटी घमनी को बांधना और pancreatico ग्रहणी SMV से आ रही नसों विभाजित. सभी छोटे pancreatico ग्रहणी SMV से होने नसों को ध्यान से हो सकता है, की पहचान 7-0 रेशम के साथ ligated और विभाजित अग्नाशय के ऊतकों से पहले भ्रष्टाचार से हटाया जा सकता है.
- कटी घमनी को बांधना और SMV और उदर महाधमनी के बीच सभी lymphatics सहित संयोजी ऊतक खो विभाजन. पेट के दाईं ओर पर अभी भी ग्राफ़्ट से, SMV और उदर महाधमनी पहुँचा जा सकता है के बीच सभी lymphatics सहित संयोजी ऊतक खो देते हैं. इस संयोजी ऊतक 7-0 रेशम का उपयोग ligated किया जाना चाहिए और आंतों भ्रष्टाचार से पश्चात lymphorrhea से बचने विभाजित.
- कटी घमनी को बांधना और सही गुर्दे धमनी विभाजित. संयोजी ऊतक के बाद विभाजित है, सही गुर्दे धमनी accessibl हो जाता हैई और ligated और 7-0 रेशम का उपयोग विभाजित है.
- प्रणालीबद्ध penile नस के माध्यम से हेपरिन चतुर्थ के 200 इकाइयों का उपयोग चूहा heparinise.
- सीमांत धमनियों कटी घमनी को बांधना, और duodeno - मध्यांत्रीय जंक्शन और टर्मिनल ileum में छोटी आंत को विभाजित.
- महाधमनी proximally SMA के मूल ligated है. पोर्टल शिरा प्लीहा नस साथ संगम पर transected है. फिर भ्रष्टाचार अपने एक महाधमनी खंड के साथ SMA के संवहनी डंडी मिलकर साथ काटा जाता है.
2. Backtable प्रक्रिया
- महाधमनी नाली के माध्यम से 4 में विस्कॉन्सिन समाधान (UW) विश्वविद्यालय डिग्री सेल्सियस के 3 मिलीलीटर का उपयोग कर अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना छिड़कना और Uro Nebacetin एन समाधान के 30 मिलीलीटर के साथ 4 सी ° (लुमेन सिंचाई अनिवार्य है) आंतों लुमेन मध्यांत्रीय अंत से सिंचाई .
तुरंत निकालने के बाद अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना, महाधमनी नाली 3 मिलीग्राम ठंडा UW समाधान के साथ छिड़काव के लिए प्रयोग किया जाता है. इस के लिए, एक 20 जी चतुर्थ पर कैथेटरएक 10 मिलीलीटर सिरिंज का प्रयोग किया जाता है. perfusate विभाजित पोर्टल शिरा से मुक्त प्रवाह के लिए मनाया जाना चाहिए. Nebacetin साथ आंतों सिंचाई के लिए, एक 50 मिलीलीटर सिरिंज का इस्तेमाल किया है.
- UW समाधान में 4 डिग्री सेल्सियस पर प्राप्तकर्ता की तैयारी के दौरान अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना स्टोर.
3. प्राप्तकर्ता ऑपरेशन
- प्राप्तकर्ता चूहे 24 घंटे (पानी / ग्लूकोज समाधान करने के लिए स्वतंत्र पहुँच) के लिए उपवास रखा जाना चाहिए.
- Isoflurane अभिश्वसन संज्ञाहरण प्रेरित करने के लिए, मानक atomizer पर 2% के साथ शुरू, और फिर laparotomy प्रदर्शन के बाद 1% कम है. एक पैर की अंगुली चुटकी का प्रदर्शन करने के लिए बेहोश करने की क्रिया की जांच.
- पेट दाढ़ी और त्वचा प्रस्तुत करने 3 बार (KODAN) के साथ साफ. फिर उपचर्म प्रशासन के बाद Carprofen 5 मिलीग्राम / किग्रा intraoperative analgesia के लिए सुप्रीम कोर्ट के एक औसत चीरा प्रदर्शन.
- सामान्य नमक लथपथ धुंध में प्राप्तकर्ता आंत्र लपेटें और प्राप्तकर्ता के सीने पर जगह है.
- Retroperitoneum क्यू सुझावों के साथ दो टूक, खोलें और abdomi बेनकाबएनएएल और गुर्दे श्रोणिफलक वाहिकाओं के स्तर के नीचे यदि आवश्यक हो तो, बर्तन नीचे महाधमनी अवर रग Cava भी microscissors का उपयोग करें. महाधमनी और रग Cava 7-0 रेशम का उपयोग करने के लिए खून की कमी से बचने से छोटे कमर और रीढ़ की हड्डी में tribuaries कटी घमनी को बांधना. (ऐसा करने के लिए, 16x सर्जिकल माइक्रोस्कोप ज़ूम बदल जाते हैं.)
- छोड़ दिया गुर्दे proximally और श्रोणिफलक द्विभाजन ऊपर वाहिकाओं distally microvessel क्लिप का उपयोग कर नीचे महाधमनी और IVC क्रॉस दबाना. केवल एक क्लैंप proximally प्रयोग किया जाता है, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से distally दोनों जहाजों के साथ घोड़े का अंसबंध. दोनों पूर्व से एक microknife का उपयोग वाहिकाओं को काटकर अलग कर देना और बाहर शेष रक्त धोने.
- भ्रष्टाचार महाधमनी खंड और प्राप्तकर्ता अधोमूत्र पिंडीय महाधमनी एक सतत 10-0 Prolene सीवन का उपयोग अंत करने के लिए पक्ष के बीच एक सम्मिलन बनाएँ .. प्रारंभ में, भ्रष्टाचार पेट के दाईं ओर (12 बजे तैनात चूहे के सिर) धमनी और कम रहने सीवन के सम्मिलन बांधने के पीछे की दीवार के टांके प्रदर्शन पर रखा गया है. गुएन, भ्रष्टाचार पर पेट (9 बजे तैनात चूहे के सिर) को बेनकाब करने के लिए और सम्मिलन के सामने की दीवार सिवनी के बाईं ओर के लिए बदल गया है.
- भ्रष्टाचार पोर्टल शिरा और प्राप्तकर्ता IVC अंत करने के पक्ष के बीच एक सम्मिलन इसी तरह 10-0 sutures Prolene का उपयोग कर चलाने के द्वारा किया जाता है. चूहे के साथ अभी भी झूठ बोल रही है बग़ल में (9 बजे की स्थिति में सिर), भ्रष्टाचार पेट के बाईं ओर पर तैनात है और एक कम प्रवास के सिवनी रखा गया है. सम्मिलन पोत अंदर से पीछे की दीवार के साथ शुरू होता है. बाद कम प्रवास के सिवनी बंधा हुआ है, सामने दीवार टांके बाहर से किया जा सकता है.
- डिस्टल 1 clamps, ऊपरी clamps द्वारा पीछा निकालें. कोई शाखामिलन संबंधी रक्तस्राव प्रत्यक्ष दबाव क्यू युक्तियों का उपयोग द्वारा नियंत्रित किया जाता है. भ्रष्टाचार के बराबर है और जल्दी reperfusion के लिए जाँच की जानी चाहिए.
- पूरे प्राप्तकर्ता mesenteric वाहिकाओं के ligation के बाद छोटी आंत बांटना. प्राप्तकर्ता सबटोटल enterectomy से गुजरना, समर्थक के 2-3 सेमी के संरक्षणडिस्टल ileum ximal सूखेपन और 1 सेमी.
- (Jejuno jejunostomy) प्रॉक्सिमल और डिस्टल (शेषांत्र अथवा लघ्वांत्र का अर्थ देने वाला उपसर्ग शेषांत्रछिद्रीकरण) अंत करने के लिए अंत आंतों 6-0 Monocryl के साथ एक बाधित सीवन एक परत का उपयोग कर anastomoses. अंत्र निरंतरता को बहाल लगभग 16 sutures anastomoses को पूरा करने के लिए जरूरी हैं.
- साफ जब तक सामान्य नमक के साथ सिंचाई peritoneal गुहा. तरल प्रतिस्थापन के लिए सामान्य नमक intraperitoneally के 2 मिलीलीटर प्रशासन. फिर मांसपेशी परत के लिए 3-0 Vicryl प्लस एक निरंतर त्वचा सीवन के साथ एक सतत सीवन का उपयोग पेट बंद.
- चूहों पश्चात की अवधि में उपवास रखा जाना चाहिए, एक और 24 घंटे के लिए तो मानक चूहे चाउ और पानी यथेच्छ पर पुनः आरंभ (पानी और ग्लूकोज का समाधान करने के लिए उपयोग के साथ). Carprofen साथ Analgesia 3 दिन (देखें नीचे खुराक) के लिए दिलाई जानी चाहिए.
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Representative Results
सामान्य पश्चात पाठ्यक्रम
प्रतिरोपित जानवरों जल्दी प्रक्रिया से लगभग 1 घंटे के लिए एक गर्मी दीपक के तहत ठीक करना चाहिए. हाइपोथर्मिया पश्चात मृत्यु दर का एक प्रमुख कारण है और ध्यान से अंतर और postoperatively बचा जाना चाहिए. Intraoperative द्रव नुकसान 2.5 मिलीलीटर सामान्य नमक के सुप्रीम कोर्ट इंजेक्शन प्लस 2.5 मिलीलीटर 5% ग्लूकोज पहले 24 घंटे के लिए हर 8 घंटा जगह होना चाहिए. चूहों को भी 1 postoperatively 24 घंटा के लिए ग्लूकोज (या आहार जेल) के समाधान और पानी पुलिस के लिए स्वतंत्र पहुँच होनी चाहिए. इस अवधि के बाद वे सामान्य भोजन मानक चूहे चाउ और पानी यथेच्छ के लिए स्वतंत्र पहुँच के साथ व्यवहार हासिल करना चाहिए. दर्द carprofen 5 मिलीग्राम / किग्रा सुप्रीम कोर्ट दैनिक के प्रशासन द्वारा तीन दिनों के लिए 1 संज्ञाहरण प्रेरण में प्रशासित किया जा शॉट के साथ नियंत्रित किया जाता है. एंटीबायोटिक प्रोफिलैक्सिस Perioperative allogenic सेटिंग में ही की जरूरत है, और 5-7 दिनों के (एम्पीसिलीन सुप्रीम कोर्ट 15 मिलीग्राम / किग्रा, क्यू 12. घंटा) से अधिक प्रशासित किया जा सकता है. सामान्यउपस्थिति, फर शर्त के रूप में के रूप में अच्छी तरह से mucosal उपस्थिति सामान्य होना चाहिए. 1 POD गतिविधि के स्तर के बाद preoperative स्थिति पर लौट जाना चाहिए, apathic या असामान्य व्यवहार जल्दी शल्य जटिलताओं पता चलता है. शरीर के वजन के 20% अप करने के लिए प्रारंभिक नुकसान के बाद चूहों वजन पश्चात 6-8 दिन के आसपास फिर से हासिल करने के लिए शुरू करने के लिए और सामान्य रूप से उनके preoperative वजन के पश्चात 14 दिन के आसपास लगभग 90% तक पहुँच जाएगा (अस्वीकृति बिना isogenic सेटिंग में).
पश्चात की जटिलताओं
जैसा कि ऊपर कहा गया है, एक distended पेट, apathic व्यवहार, खिलाने के विच्छेदन और सामान्य रूप (झालरदार फर, आँखों से स्राव) में परिवर्तन संभव जटिलताओं के लक्षण के रूप में माना जाना चाहिए. जानवरों सर्जन और एक पशु चिकित्सक द्वारा देखा जाना चाहिए. निर्जलीकरण, भड़काऊ peritonitis, आंत्र सम्मिलन का एक प्रकार का रोग के कारण आन्त्रावरोध के कारण राज्य की तरह स्थितियां, अपर्याप्त दर्द दवा और दूसरों नियम होना चाहिएबाहर घ और इलाज किया. यदि पशु इलाज के बावजूद ठीक नहीं है, प्रयोग के विच्छेदन मामले के आधार द्वारा एक मामले पर किया जाना चाहिए पशु प्रयोग के नियमों को लागू करने के अनुसार मूल्यांकन किया है.
चित्रा 1a. उपकरण.
1. माइक्रोस्कोप (LEICA)
2. संज्ञाहरण तंत्र (EICKEMEYER)
1b चित्रा. उपकरण.
3. अस्तुरा
4. इलेक्ट्रॉनिक स्केलपेल (GEIGER)
5. सर्जिकल संदंश
6. DeBakey संदंश घुमावदार
7. छोटे घुमावदार संदंश
8. माइक्रो संदंश घुमावदार
9. माइक्रो सीधे 1 संदंश
10. माइक्रो 2 सीधे संदंश
11. माइक्रो सुई धारक
12. सुई धारक
13. मच्छर क्लैंप
14. 1 कैंची
15. 2 कैंची
16. Microscissors
17. माइक्रो स्केल्पल
-1 सी चित्रा. उपकरण.
18. Microclamps
19. Canulas और क्यू युक्तियाँ (नहीं दर्शाया)
20. सीरिंज (50 मिलीग्राम, 10 मिलीग्राम, 2.5 मिलीग्राम, 1 मिलीग्राम)
-1 सी चित्रा. उपकरण.
21. भ्रष्टाचार के भंडारण के लिए UW समाधान
22. भ्रष्टाचार लुमेन सिंचाई के लिए एंटीबायोटिक्स (एन Uro - nebacetin)
23. भ्रष्टाचार के छिड़काव के लिए UW
24. सामान्य नमक
25. सामान्य नमक के साथ डिश (backtable के लिए)
चित्रा 2. औसत पश्चात वजन (संचयी डेटा). चित्रा 2 orthotopic छोटी आंत प्रत्यारोपण के बाद औसत पश्चात वजन से पता चलता है. शरीर के वजन के 20% अप करने के लिए प्रारंभिक नुकसान के बाद चूहों वजन पश्चात 6-8 दिन के आसपास फिर से हासिल करने के लिए शुरू और उनके preop के 90% तक पहुँच चुके हैंपश्चात 14 दिन / अस्वीकृति प्रतिरक्षादमन बिना isogenic सेटिंग में चित्रा 2. चारों ओर erative वजन सामान्य रूप से वजन घटाने डेटा, नहीं अस्तित्व, उपलब्ध जानवरों की संख्या कम करने के लिए उपाय वजन घटाने मुख्य रूप से प्रयोगों के लिए पशुओं की sacrifing कारण है का प्रतिनिधित्व करता है.
चित्रा 3 अग्नाशय के ऊतकों (तीर) बृहदान्त्र से हटा दिया जाना चाहिए.
चित्रा 4. Ligating और विभाजित SMV और उदर महाधमनी के बीच सभी lymphatics सहित संयोजी ऊतक खो, सही गुर्दे धमनी (तीर) रेशम संयुक्ताक्षर के बीच विभाजित है.
5 महाधमनी नाली के माध्यम से भ्रष्टाचार के समाधान के साथ UW छिड़काव चित्रा..
चित्रा 6 प्राप्तकर्ता वेना कावा और महाधमनी की तैयारी के बाद वाहिकाओं को उजागर कर रहे हैं., Clamping लिए तैयार.
चित्रा 7. क्रॉस क्लैंप वेना कावा और साथ ही महाधमनी microclamps का उपयोग किया जाता है.
चित्रा 8 (क) aorto महाधमनी सम्मिलन प्रवास के sutures का उपयोग किया जाता है. Aorto महाधमनी सम्मिलन के पूरा होने के बाद (ख), portocaval सम्मिलन अगले प्रदर्शन किया जाएगा. कम प्रवास के सिवनी जगह में पहले से ही है.
9 चित्रा (एक) portocaval सम्मिलन 2 प्रवास के सिवनी के बाद शुरू होता है. जगह में है. (ख) के बाद गportocaval सम्मिलन की ompletion.
10 clamps अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना अच्छी तरह से reperfuses के हटाने के बाद चित्रा.
11 चित्रा आंत्र सम्मिलन के लिए रहने sutures के प्लेसमेंट (क). (ख) आंत्र सम्मिलन पूरा किया.
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Discussion
जबकि चूहों में आंतों प्रत्यारोपण की मॉडल 1970ies 5 में के रूप में जल्दी के रूप में वर्णित किया गया है हाल में नियोजित मॉडल की सबसे heterotopic आंतों 13 विभिन्न तकनीकों का उपयोग कर प्रत्यारोपण शामिल है. जबकि सामान्य में heterotopic प्रक्रिया आसान microsurgical तकनीक और मूल्यांकन के लिए भ्रष्टाचार के आसान पहुँच का लाभ है, heterotopic आंतों प्रत्यारोपण के खाते में प्रतिरोपित छोटी आंत के कई बातचीत और सिकुड़ा गतिविधि की तरह अपने कार्य पहलुओं लेने का बड़ा नुकसान है और mucosal बाधा समारोह है कि commensals और रोगज़नक़ों के एक विशाल मेजबान के संदर्भ में एक orthotopic अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना की विशेषता. हमारे समूह यहाँ बताया orthotopic मॉडल और हमारे निष्कर्ष के साथ एक बड़ा अनुभव प्राप्त किया है सुझाव है कि भड़काऊ और अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की वजह से विशिष्ट परिवर्तन के कई संदर्भ के में कार्यात्मक समर्थक के साथ मूल्यांकन किया जाना हैसिकुड़ना और mucosal अखंडता की तरह प्रतिरोपित छोटी आंत के perties. ध्यान से, यहां कार्यरत शाखामिलन संबंधी तकनीकों में धमनी या शिरापरक कफ, जिनमें से कुछ करने के लिए प्रक्रिया को सुविधाजनक बनाने के लिए और महत्वपूर्ण गर्म ischemia समय multivisceral 12,14 प्रत्यारोपण के मॉडल में, विशेष रूप से कम करने के लिए दिखाया गया है के उपयोग में शामिल नहीं हैं. हालांकि यह multivisceral प्रत्यारोपण, कफ की उलझन देनेवाला संभावित हमें का नेतृत्व किया है एकल आंत्र प्रत्यारोपण के इस मॉडल में इसी तरह की तकनीक से बचने के कृंतक मॉडल में कफ तकनीकों को रोजगार के लिए आवश्यक हो सकता है. हम इस मॉडल में पोर्टल जल निकासी तकनीक का उपयोग करने के लिए कोशिश नहीं की है. तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण होने के अलावा (छोटे पोर्टल शिरा व्यास शिरापरक बहिर्वाह समस्याओं के लिए नेतृत्व कर सकते हैं), जो पूरे मॉडल को और अधिक मुश्किल स्थापित करने के लिए करना होगा - यह एक तथ्य यह है कि मामलों के बहुमत में नैदानिक आंतों प्रत्यारोपण प्रणालीगत जल निकासी में प्रयोग किया जाता है है. इस प्रकार, वर्णित तकनीक reflनैदानिक तकनीकी व्यवहार्यता के साथ संयुक्त अभ्यास ECTS. Grafts के पोर्टल के विषय में जल निकासी के लिए कई नैदानिक और प्रायोगिक 2,4 अध्ययन में बेहतर परिणामों के साथ जुड़े नहीं दिखाया गया है. पर्याप्त कम 35 चारों ओर स्थिर पशु अस्तित्व के लिए आवश्यक मिनट के ischemia बार इस मॉडल के लिए सीखने की अवस्था के पूरा होने के बाद हासिल किया जा सकता है.
इस प्रोटोकॉल के अनुसार orthotopic छोटी आंत प्रत्यारोपण लगभग 30-40 प्रक्रियाओं के प्रदर्शन के बाद एक microsurgically अनुभवी शोधकर्ता से सीखा जा सकता है. दृश्य के रूप जौव स्वरूप द्वारा हासिल प्रत्यक्ष दृश्य अवलोकन और कार्यरत तकनीक कि संभवतः विधि और कम पशु बलि की जल्दी स्थापना के लिए होता है की सटीक प्रजनन के लिए अनुमति देता है. महत्वपूर्ण बिंदुओं खून बह रहा है, ठंडे और गर्म ischemia समय और आंत्र शाखामिलन संबंधी एक प्रकार का रोग / कमी कर रहे हैं. इस प्रयोगात्मक सेटिंग में ठंड ischemia समय रूप में गर्म ische के रूप में महत्वपूर्ण नहीं हैमिया लेकिन समय 45 मिनट से अधिक नहीं होनी चाहिए. गर्म ischemia समय 35 मिनट के आसपास हो सकता है और भी अधिक है, 45 मिनट के रूप में इस उच्च पश्चात मृत्यु दर का कारण हो सकता है चाहिए. आदर्श दाता और प्राप्तकर्ता वजन 200 ग्राम के आसपास है क्योंकि 300 ग्राम से अधिक छोटे चूहों की प्रक्रिया को बर्दाश्त नहीं करते हैं और अच्छी तरह से वजन अत्यधिक intraabdominal वसा के साथ जुड़ा हुआ है. चूहों के शरीर के वजन के 20% करने के लिए प्रत्यक्ष पश्चात की अवधि में, लेकिन हार के लिए वजन postoperatively 6-8 दिन (2 चित्रा) के बाद फिर से हासिल करने के लिए शुरू कर देना चाहिए. दैनिक स्वास्थ्य की जांच (सतर्कता, फर, और mucosal उपस्थिति, वजन, मल गुणवत्ता और आवृत्ति) जब तक पशु बलिदान किया जाना चाहिए. हम कम से कम पहले तीन दिनों के रूप में ऊपर वर्णित के लिए एंटीबायोटिक दवाओं और analgesia के दैनिक प्रशासन की सलाह देते हैं. प्रारंभिक अभ्यास के बाद, microvascular और आंत्र anastomoses के विशेष रूप से, इस मॉडल विश्वसनीय और स्थिर isogenic सेटिंग में लंबी अवधि के 80-90% के आसपास के अस्तित्व प्रदान करता है. Alloge मेंएनआईसी सेटिंग अस्तित्व आम तौर पर कम है, तीव्र और जीर्ण अस्वीकृति की तरह immunologic घटना पर मुख्य रूप से निर्भर करता है और immunosuppressive आहार के लिए प्रयोग किया जाता है और परीक्षण अनुसार व्यापक रूप से भिन्न हो सकते हैं.
तकनीकी नोट्स: दाता आपरेशन समय के बारे में 45 मिनट का होना चाहिए. प्राप्तकर्ता आपरेशन ज्यादा 1.5 घंटे से अधिक नहीं होनी चाहिए. एक हीटिंग पैड नियमित रूप से इस्तेमाल किया जाना चाहिए करने के लिए प्राप्तकर्ता में हाइपोथर्मिया से बचने के. आसान नाड़ी का उपयोग के लिए, प्राप्तकर्ता के पार्श्व पूंछ नस प्रक्रिया की शुरुआत में एक 22 जी नसों में कैथेटर का उपयोग cannulated जा सकता है. आंत्र लुमेन, के रूप में ऊपर वर्णित की सिंचाई के लिए आवश्यक नहीं हो सकता है, हमारे ज्ञान करने के लिए omitting इस कदम के परिणाम और मृत्यु दर पर कोई नकारात्मक प्रभाव हो सकता है.
पशु अध्ययन आवश्यकताओं जानवरों: लागू करने के संघीय गणराज्य जर्मनी के राज्य नॉर्थ राइन Westfalia के कानूनों और नियमों के अनुसार रखा गया था. दस्तावेज़ क्रमांक टी जिसके तहतवह प्रयोगों इसी लेखक से अनुरोध किया जा सकता है अनुमोदित किया गया.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) | Bristol-Myers Squibb | ||
| Uro-Nebacetin N solution | Nycomed | 6967855 | |
| Ampicillin | Ratiopharm | ||
| Carprofen (Rimadyl) | Pfizer | ||
| Prolene 10-0 unresorbable suture | Ethicon | ||
| Monocryl 6-0 resorbable suture | Ethicon | ||
| Vicryl 3-0 resorbable suture | Ethicon | ||
| i.v. Catheter G 20 1.1x33 mm | Braun | ||
| i.v. Catheter G 22 0.9x25 mm | Braun | ||
| Kodan Skin Prep | Schülke | ||
| NaCl 0.9% Infusion solution | Braun | ||
| Curved forceps small | FineScienceTools | 11009-13 | |
| Micro forceps curved | AESCULAP | BD 333 | |
| Micro forceps curved | AESCULAP | FD281R | |
| Micro forceps straight 1 | WPI | 5 | |
| Micro forceps straight 2 | WPI | 2 | |
| Micro needle holder | WPI | 14081 | |
| Micro scissors | FineScienceTools | 15006-09 | |
| Micro scalpel | MANI | Ophthalmic knife | |
| Micro clamps | AESCULAP | FB329R |
References
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