Ortotopico di intestino tenue di ratti

Summary

Trapianto di intestino tenue è diventata una opzione di trattamento per i pazienti con accettato irreversibile insufficienza intestinale. Il nostro modello sperimentale di trapianto ortotopico di intestino tenue nel ratto è uno strumento affidabile per affrontare immunologiche di base e processi infiammatori che complicano trapianto di intestino.

Abstract

Trapianto di intestino tenue è diventata un'opzione accettata clinico per i pazienti con sindrome dell'intestino corto e il fallimento della nutrizione parenterale (irreversibile insufficienza intestinale). In centri specializzati migliorato operativa e le strategie di gestione hanno portato a eccellenti a breve e medio termine paziente e la sopravvivenza del trapianto con una qualità della vita elevata ^1,3. A differenza del più comune di trapianto di altri organi solidi (cuore cioè, fegato) molti meccanismi alla base della funzionalità del trapianto e alterazioni immunologiche indotte dal trapianto di intestino non sono del tutto noti ^6,7. Gli episodi di rigetto acuto, sepsi e insufficienza cronica del trapianto sono i principali ostacoli che contribuiscono ancora meno favorevole esito a lungo termine e ostacolare un impiego più diffuso della procedura, nonostante un numero crescente di pazienti in nutrizione parenterale domiciliare che avrebbe potenzialmente beneficiare di un tale trapianto. Il piccolo intestino contieneun gran numero di leucociti passeggeri comunemente indicato come parte del sistema linfoide associato intestino (GALT), essendo questa parte del motivo della immunogenity alta del graft intestinale. La presenza e la vicinanza di molti commensali e patogeni nell'intestino spiega la gravità degli episodi di sepsi volta innesto integrità della mucosa è compromessa (per esempio rigetto). Per far avanzare il campo di dati intestinali e trapianto multiorgano più generati da modelli animali affidabili e fattibile è necessario. Il modello fornito combina qui sia l'affidabilità e la fattibilità, una volta stabiliti in modo standardizzato e in grado di fornire informazioni preziose nei sottostanti complessi molecolari, meccanismi cellulari e funzionali che sono attivati ​​da trapianto di intestino. Abbiamo utilizzato con successo e raffinato la procedura descritta su più di 5 anni nel nostro laboratorio ^8-11. Il JoVE video-formato è particolarmente utile per dimostrare la procedura complessaDure e evitare le insidie ​​iniziali per i gruppi che intendono stabilire un modello ortotopico roditore indagando trapianto di intestino.

Protocol

1. Donatori di funzionamento

1. Il topo donatore deve essere tenuto a digiuno per 24 ore (libero accesso all'acqua / soluzione di glucosio).
2. Per indurre l'anestesia isoflurano inalazione, inizia con il 2% di atomizzatore standard, e quindi ridurre a 1% dopo aver eseguito laparotomia. Eseguire un pizzico punta per controllare la sedazione.
3. Shave l'addome e pulire con la preparazione della pelle 3 volte (Kodan). Quindi, eseguire una incisione mediana dopo somministrazione sottocutanea di analgesico.
4. Dopo l'innesto è avvolto in soluzione salina garza imbevuta, separare le aderenze fisiologiche tra il pancreas e il co....

Results

Normale decorso post-operatorio

Gli animali trapiantati dovrebbero recuperare rapidamente dalla procedura di cui una lampada di calore per circa 1 ora. L'ipotermia è una delle principali cause di mortalità postoperatoria e deve essere accuratamente evitata intra-e post-operatorio. Perdite di liquidi intraoperatori deve essere sostituito con un'iniezione sottocutanea di 2,5 ml di soluzione salina normale, più 2,5 ml di glucosio al 5% ogni 8 ore per le prime 24 ore. I ratti dovrebbero avere liber.......

Discussion

Mentre i modelli di trapianto intestinale nel ratto sono stati descritti già nel 1970ies ⁵ più dei modelli di recente attività subordinate coinvolgere eterotopico trapianto di intestino con tecniche diverse ^13. Mentre le procedure eterotopiche in generale hanno il vantaggio di tecniche microchirurgiche più facile accessibilità dell'innesto di valutazione, eterotopico trapianto di intestino ha il grande svantaggio di non prendere in considerazione le interazioni multiple del piccolo intestino tr.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Nome del reagente	Azienda	Numero di catalogo	Commenti (opzionale)
Università del Wisconsin (UW) soluzione (ViaSpan)	Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N soluzione	Nycomed	6967855
Ampicillin	Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl)	Pfizer
Prolene 10-0 sutura unresorbable	Ethicon
Monocryl 6-0 sutura riassorbibile	Ethicon
Vicryl 3-0 sutura riassorbibile	Ethicon
iv catetere G 20 millimetri 1.1x33	Braun
iv catetere G 22 0.9x25 millimetro	Braun
Kodan pelle Prep	Schülke
NaCl soluzione di infusione 0,9%	Braun
Pinze curve piccolo	FineScienceTools	11009-13
Micro pinza curva	AESCULAP	BD 333
Micro pinza curva	AESCULAP	FD281R
Micro pinza dritto 1	WPI	5
Micro pinza diritto 2	WPI	2
Micro supporto dell'ago	WPI	14081
Micro forbici	FineScienceTools	15006-09
Micro bisturi	MANI	Oftalmica coltello
Morsetti Micro	AESCULAP	FB329R