हम कम दबाव चूषण का उपयोग अक्षितंतुतंत्र संबंधी और ब्रोन्कोएल्वियोलर पानी से धोना के लिए एक अनुसंधान तकनीक का वर्णन. तकनीक फेफड़ों ब्रोन्कोएल्वियोलर सतहों से प्रतिरक्षा कोशिकाओं फसल के लिए प्रयोग किया जाता है. स्थानीय संवेदनाहारी और हल्के होश में बेहोश करने की क्रिया (midazolam) प्रयोग किया जाता है. विषयों प्रक्रिया अच्छी तरह से और अनुभव कम से कम दुष्प्रभावों को सहन.
हम mucosal सतह से nonadherent कोशिकाओं और फेफड़ों के अस्तर तरल पदार्थ को निकालने के क्रम में मार्गदर्शन हाथ पकड़ा चूषण का उपयोग ब्रोन्कोएल्वियोलर पानी से धोना (बाल) के साथ अक्षितंतुतंत्र संबंधी के लिए एक अनुसंधान तकनीक का वर्णन. अनुसंधान वातावरण में, बाल फेफड़ों के भीतर जन्मजात (फेफड़ों बृहतभक्षककोशिका) के नमूने, सेलुलर (बी और टी कोशिकाओं), और humoral (immunoglobulin) प्रतिक्रियाओं की अनुमति देता है.
बाल अंतरराष्ट्रीय स्तर पर अनुसंधान प्रयोजनों के लिए स्वीकार कर लिया है और 1999 के बाद से तकनीक हमारे समूह द्वारा ब्रिटेन और मलावी में> 1,000 विषयों में प्रदर्शन किया गया है.
हमारी तकनीक डाले तरल पदार्थ के कोमल हाथ से आयोजित चूषण का उपयोग करता है, यह बाल मात्रा लौट अधिकतम और बाल तरल पदार्थ के भीतर कोशिकाओं की संरचना और समारोह को संरक्षित करने और विकास की सुविधा के लिए व्यवहार्यता की रक्षा करने के क्रम में रोमक epithelia पर न्यूनतम कतरनी बल लागू करने के लिए बनाया गया है पूर्व vivo संस्कृति में कोशिकाओं की. अनुसंधान तकनीक इसलिए एक बड़ी मात्रा में भारतीय नौसेना पोत का उपयोग करता हैtillate (आमतौर पर 200 मिलीलीटर के क्रम में) और कोशिका क्षति को कम करने के लिए मार्गदर्शन सक्शन कार्यरत हैं.
मरीजों को स्थानीय संवेदनाहारी दिया सचेत बेहोश करने की क्रिया (midazolam) की पेशकश की है, और कम से कम साइड इफेक्ट के साथ अच्छी तरह से प्रक्रिया को सहन कर रहे हैं. मौखिक और लिखित विषय में जानकारी सहिष्णुता में सुधार और लिखित सूचित सहमति अनिवार्य है. विषय की सुरक्षा सर्वोपरि है. विषय को ध्यान से स्पष्ट शामिल किए जाने और अपवर्जन मानदंड का उपयोग कर चयन कर रहे हैं.
इस प्रोटोकॉल संभावित जोखिम का एक विवरण, और उन्हें कम करने के लिए कदम उठाए गए हैं, मतभेद की एक सूची, पूर्व और बाद की प्रक्रिया की जाँच करता है, साथ ही सटीक ब्रोंकोस्कोपी और प्रयोगशाला तकनीक भी शामिल है.
पृष्ठभूमि
अक्षितंतुतंत्र संबंधी नैदानिक अभ्यास के लिए विकसित किया गया था, यह व्यापक रूप से दोनों लक्षणपूर्वक और therapeutically 1,2 प्रयोग किया जाता है. ब्रोन्कोएल्वियोलर पानी से धोना (बाल) nonadherent कोशिकाओं और mucosal सतह से फेफड़ों के अस्तर तरल पदार्थ निकालता है, बायोप्सी mucosal और submucosal ऊतकों नमूना करने के लिए प्रयोग किया जाता है. अनुसंधान वातावरण में, बाल फेफड़ों के भीतर, (फेफड़ों मैक्रोफेज 3-5) जन्मजात सेलुलर (बी और टी कोशिकाओं 6) के नमूने, और humoral (immunoglobulin 7) प्रतिक्रियाएं देता है.
बाल अंतरराष्ट्रीय स्तर पर अनुसंधान प्रयोजनों 8 स्वीकार कर लिया है और 1999 के बाद से तकनीक हमारे समूह द्वारा ब्रिटेन और मलावी में> 1,000 विषयों में प्रदर्शन किया गया है. हम प्रयोगात्मक मानव न्यूमोकोकल गाड़ी 9,17, बायोमास धुआं 5, एचआईवी और टीकाकरण, और सहायक उपचार छात्र सहित न्यूमोकोकल प्रतिजन के लिए, सहज सेलुलर, और प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के अध्ययनों में इस तकनीक का उपयोगनिमोनिया से वसूली में मर जाता है. हमारी तकनीक डाले तरल पदार्थ के कोमल हाथ से आयोजित चूषण का उपयोग करता है, यह लौटा बाल मात्रा को अधिकतम और बाल तरल पदार्थ के भीतर कोशिकाओं की संरचना और समारोह को संरक्षित करने के क्रम में रोमक epithelia पर न्यूनतम कतरनी बल लागू करने के लिए बनाया गया है.
एक शोध के संदर्भ में बाल निदान या उपचार लाभ हासिल करने के लिए लक्ष्य कर रहे हैं जो श्वसन और गहन देखभाल चिकित्सकों (अक्सर कहा जाता ब्रोन्कियल धोने, धोने, पानी से धोना, या बाल) द्वारा अभ्यास है कि से एक अलग तकनीक का इस्तेमाल करता. अनुसंधान तकनीक कोशिकाओं फसल और पूर्व vivo संस्कृति में कोशिकाओं के विकास को सुविधाजनक बनाने के लिए व्यवहार्यता की रक्षा करने के लिए बनाया गया है. इन कारणों के लिए अनुसंधान तकनीक (आमतौर पर 200 मिलीलीटर के क्रम में) एक बड़ी मात्रा instillate का उपयोग करता है और कोशिका क्षति को कम करने के लिए मार्गदर्शन सक्शन कार्यरत हैं. मरीजों को स्थानीय संवेदनाहारी दिया सचेत बेहोश करने की क्रिया (midazolam) की पेशकश की है, और कम से कम साइड इफेक्ट के साथ अच्छी तरह से प्रक्रिया को सहन कर रहे हैं. मौखिक और लिखित subjecटी जानकारी सहिष्णुता में सुधार और लिखित सूचित सहमति 1 अनिवार्य है.
लक्ष्य
समग्र लक्ष्य प्रक्रिया सुरक्षित और प्रभावी होना चाहिए. विषय कोई भी शारीरिक अशांति का अनुभव नहीं करना चाहिए और ऑपरेटरों लगातार विषयों से बाल की 100 मिलीलीटर से अधिक एकत्र करना चाहिए. प्रक्रिया के बाद, विषयों न्यूनतम दुष्प्रभाव अनुभव करना चाहिए.
सुरक्षा
विषय की सुरक्षा सर्वोपरि है. विषय को ध्यान से स्पष्ट शामिल किए जाने और अपवर्जन मानदंड का उपयोग कर चयन कर रहे हैं. इस प्रोटोकॉल संभावित खतरों और उन्हें कम करने के लिए उठाए गए कदमों का विवरण शामिल.
अनुसंधान ब्रोंकोस्कोपी करने के लिए मतभेद निरपेक्ष या रिश्तेदार के रूप में व्यक्त किया जा सकता है, और बहिष्कार और शामिल किए जाने के मापदंड के रूप में हमारे अध्ययन प्रोटोकॉल में शामिल किए गए हैं. हमारे विषयों सभी पूर्ण स्वास्थ्य सुनिश्चित करने के लिए जांच कर रहे हैं.
निरपेक्ष मतभेदअस्थिर ग्रीवा रीढ़, अनुत्तरदायी हाइपोक्सिया, गलशोथ, खून बह रहा प्रवणता, और घातक हृदय अतालता शामिल हैं.
वृद्धि की जटिलता दर के साथ जुड़े उन शर्तों सहित सापेक्ष मतभेद, शामिल हैं:
सामान्य: खराब सहकारी विषय 1, किसी भी महत्वपूर्ण सामान्य चिकित्सा समस्या जैसे मिर्गी, lidocaine या midazolam, गर्भावस्था, गरीब पोषण करने के लिए प्रतिकूल प्रतिक्रिया में जाना पिछले खराब सहन ब्रोंकोस्कोपी,.
श्वसन:, hypercapnia, अस्थिर अस्थमा 1, काफी बिगड़ा श्वसन समारोह 1 (FEV 1 <1 एल), फेफड़े के उच्च रक्तचाप हाइपोक्सिया [हवा <94% पर संतृप्ति (SATs)].
कार्डियोवास्कुलर: यूरीमिया, रोधगलन 1, बेहतर रग Cava रुकावट के 6 हफ्तों के भीतर.
अन्य: प्रतिरक्षादमन (हमारे समूह नियमित रूप से इस प्रक्रिया निष्पादित करता हैएचआईवी पॉजिटिव विषयों में Dure).
अनुसंधान के लिए बाल के साथ जुड़े जोखिम – 1 टेबल देखें.
अच्छे परिणाम प्राप्त करने के लिए निम्नलिखित सहायक होते हैं:
The authors have nothing to disclose.
हमारे अनुसंधान bronchoscopies साथ अपने समर्थन के लिए ऐलेना Mitsi (अनुसंधान सहायक) और सीनियर कैरोल Hancock (रिसर्च नर्स) और फिल्मांकन के लिए अपने योगदान के लिए थिएटर कर्मचारियों को और डेविड शॉ (अनुसंधान नर्स) को धन्यवाद. इस प्रक्रिया फिल्माया जा करने की अनुमति के लिए भी हमारे स्वयंसेवक रेबेका Dunphy करने के लिए धन्यवाद.
Material |
Company |
Catalogue Number |
Comments |
Fibreoptic bronchoscope, light and suction source |
unspecified |
||
Surgical gown, sterile gloves |
unspecified |
||
Sphygnomanometer |
unspecified |
For continuous patient monitoring |
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Pulse oximeter |
unspecified |
For continuous patient monitoring |
|
3 lead ECG monitor |
unspecified |
For continuous patient monitoring |
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Nasal oxygen delivery 2-4l/min |
unspecified |
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Lidocaine 10% spray (Xylocaine) |
AstraZeneca |
For topical anaesthesia |
|
Lidocaine hydrochloride 2% |
unspecified |
For topical anaesthesia |
|
Lidocaine gel (Instillagel) |
Farco-Pharma, Germany |
Alternative products available from other suppliers |
|
Normal saline, sterile 200ml |
unspecified |
Warm to 30oC |
|
10ml taper-end syringe (x10) |
unspecified |
For administration of lidocaine |
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Intravenous cannula 18G |
unspecified |
For administration of midazolam |
|
Midazolam |
unspecified |
For sedation |
|
Flumazenil |
unspecified |
Reversal of benzodiazepine sedation (emergency use only) |
|
60ml taper-end syringes (x4) |
unspecified |
For normal saline injection and BAL fluid withdrawal. May require connector to attach to the injection port of the bronchoscope |
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Sterile gauze swab |
Vernaid, UK |
Alternative products available from other suppliers |
|
Sterile container for BAL fluid |
See text and comments |
Siliconised glass bottles reduce macrophage adherence. Alternatively, 50ml centrifuge tubes may be used (total capacity 200ml) |
|
Sigmacote |
Sigma, UK |
SL2 |
Only if siliconised glass bottles used. NB: Harmful and flammable. If used, follow precautions detailed in manufacturer’s MSDS |
Centrifuge |
unspecified |
At least 4x50ml tube capacity. Refrigeration to 4oC preferred. |
|
Shandon Cytospin centrifuge |
Thermo Scientific, UK |
For differential count only |
|
RPMI 1640 medium with L-glutamine |
Sigma, UK |
R8758 |
Alternative products available from other suppliers |
Fetal bovine serum |
Sigma, UK |
F6178 |
Alternative products available from other suppliers |
Penicillin-Streptomycin |
Sigma, UK |
P4333 |
Alternative products available from other suppliers |
Amphotericin B |
Sigma, UK |
A2942 |
Alternative products available from other suppliers |
Tissue culture plates |
Greiner Bio-One, UK |
662160 |
Alternative products available from other suppliers |
Glass microscope slides |
unspecified |
For differential count only |
|
Shandon cytofunnel |
Thermo Scientific, UK |
A78710003 |
For differential count only |
Shandon cytoclip |
Thermo Scientific, UK |
59910052 |
For differential count only |
Hemacolor staining set (fixative, red and blue reagents) |
Merck, Germany |
111661 |
Use according to manufacturer’s instructions |