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Article de méthode

Obtenir des échantillons avec ralenti accéléré et inversé vieillissement dans le Honey Bee Modèle

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DOI :

10.3791/50550

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29 août 2013

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Dans cet article

Résumé

Chez les travailleurs d'abeilles, le vieillissement dépend de comportements sociaux plutôt que sur l'âge chronologique. Ici, nous montrons comment les travailleurs-types avec des modèles très différents de vieillissement peuvent être obtenues et analysées pour la sénescence cellulaire.

Résumé

Sociétés d'animaux très sociaux disposent de grandes différences de durée de vie entre les individus étroitement liés. Chez les insectes sociaux, l'abeille est le meilleur modèle créé pour étudier la façon dont la plasticité dans la durée de vie et le vieillissement s'explique par des facteurs sociaux.

La caste des travailleurs des abeilles comprend nourrices, qui tendent le couvain et les abeilles butineuses, qui recueillent le nectar et le pollen. Des travaux antérieurs ont montré que les fonctions du cerveau et de la performance de vol sénescence plus rapidement dans les butineuses que chez les infirmières. Toutefois, les fonctions du cerveau peuvent récupérer, lorsque les butineuses reviennent à des tâches de soins infirmiers. Ces modèles de sénescence accélérée fonctionnelle et inversée sont liés aux niveaux de ressources métaboliques modifiées, à des altérations de la protéine abondance et de la fonction immunitaire. Vitellogénine, une protéine de jaune avec des fonctions adaptées à contrôle hormonal et de défense cellulaire, peut servir d'élément de régulation important dans un réseau qui contrôle les différentes dynamiques du vieillissement chez les travailleurs.

Ici, nous décrivons comment l'émergence d'infirmières et de butineuses peut être surveillé et manipulé, y compris la reprise de butineuses généralement de courte durée dans les infirmières de plus longue durée. Nos résultats représentatifs montrent comment les individus avec un âge chronologique se différencient en butineuses et nourrices dans des conditions expérimentales. Nous illustrons comment inversion comportementale de butineuses dos des infirmières peut être validé. Enfin, nous montrons comment les différents sénescence cellulaire peut être évaluée en mesurant l'accumulation de lipofuscine, un biomarqueur universel de la sénescence.

Pour étudier les mécanismes qui peuvent lier les influences sociales et vieillissement plasticité, ce protocole fournit un outil standardisé mis d'acquérir du matériel de l'échantillon concerné, et d'améliorer la comparabilité des données entre les études futures.

Introduction

Les structures de la colonie complexes des animaux très sociaux sont maintenus grâce à l'interaction d'une caste de reproduction, et une caste d'aide de typiquement travailleurs non-croisements avec des comportements différents de la tâche sociale. Dans les différentes catégories de travailleurs, des adaptations physiologiques spécifiques permettent des comportements de soins de sib distinctes, et sont également liés à des différences de durée de vie extrêmes. Les abeilles et les rats-taupes représentent modèles animaux les mieux développés pour étudier comment la socialité est liée à des motifs de l'accélération, négligeable ou inversé vieillissement....

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Protocole

Une. Le découplage de la sénescence âge chronologique

Cette section décrit la configuration des colonies de la double cohorte, qui consistent d'une cohorte d'individus identifiés qui partagent le même âge chronologique («cohorte d'âge unique") et une cohorte d'abeilles nid. Les personnes âgées de même de la cohorte d'âge unique finiront par se séparer en différents types de travailleurs ayant des dynamiques du vieillissement - ce sont les nourrices avec des abeilles butineuses ralenti et avec le déclin fonctionnel accéléré. Toutes les procédures sont décrites pour une colonie expérimentale. Nous vous conseillons cependan....

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Résultats

sections 1 et 2 du Protocole détail comment les groupes de tests peuvent être obtenus à étudier les attributs de l'accélération, ralenti et inversés vieillissement dans les colonies avec une seule cohorte d'âge. Pour contrôler la différenciation de type travailleur qui accompagne l'ontogenèse normale, nous avons évalué les chiffres butineuses («dénombrements d'entrée») pour 6 colonies (figure 1, comparer section 1). Les graphiques montrent que le changement considérable de l'infirmiè.......

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Discussion

Nous adoptons ici approches décrites précédemment 8,16,17,19,20, et les intégrer dans un seul flux de travail qui facilitera l'étude de vieillissement souple chez les abeilles. Notre objectif est de fournir aux scientifiques qui sont novices dans ce domaine avec un outil normalisé fixé pour obtenir du matériel de l'échantillon concerné, et à améliorer la reproductibilité expérimentale entre différentes équipes de recherche. Bien que nos procédures sont simplifiées et ne nécessitent pas de matériel spé.......

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Déclarations de divulgation

Nous n'avons rien à communiquer.

Remerciements

Nous remercions Osman Kaftanoglu pour obtenir des conseils utiles et d'assistance pendant le tournage. Nous tenons à remercier les relecteurs anonymes pour les commentaires perspicaces. Ce travail a été soutenu par le Conseil norvégien de la recherche (accorde 180504, 191699, 213976 et), Marie Curie/FP7 (projet ref. 238665), le National Institute on Aging (NIA subvention P01 AG22500), et les Pew Charitable Trusts.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
ApifondaSü ; dzucker AG, Mannheim/Ochsenfurt, Allemagne
paraformaldéhydeSigma-Aldrich158127
solution saline tamponnée au phosphateSigma-AldrichP4417
GlycérolMerck1.04094.1000

Références

  1. Munch, D., Amdam, G. V. The curious case of aging plasticity in honey bees. FEBS Lett. 584, 2496-2503 (2010).
  2. Buffenstein, R. Negligible senescence in the longest living rodent, the naked mole-rat: insights from a successfully aging species.

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Réimpressions et autorisations

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