Summary
खाद्य प्रतिबंधित चूहों में दवा की मांग की मजबूत वृद्धि के एक प्रदर्शन की अनुमति देता है कि एक प्रक्रिया का वर्णन किया है. हेरोइन आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण के बाद, चूहों वे हल्का प्रतिबंधित भोजन कर रहे हैं, जिसके दौरान एक दवा मुक्त वातावरण में, एक संयम की अवधि के माध्यम से जाना. औषधि की मांग तो दवा जुड़े वातावरण में परीक्षण किया है.
Abstract
मानव दवा नशा में, दवा जुड़े cues या पहले से दवा लेने के साथ जुड़े थे कि वातावरण के लिए जोखिम संयम के दौरान डूबने से चालू कर सकते हैं. इसके अलावा, विभिन्न पर्यावरणीय चुनौतियों इस प्रभाव है, साथ ही वृद्धि चल रही दवा का सेवन बढ़ा सकते हैं.
हम यहाँ वर्णन प्रक्रिया संयमी चूहों में दवा की मांग की एक वृद्धि के रूप में व्यक्त किया है कि दवा लालसा पर एक आम पर्यावरण चुनौती, खाद्य प्रतिबंध, के प्रभाव पर प्रकाश डाला गया.
चूहे पुरानी नसों में चतुर्थ कैथेटर के साथ प्रत्यारोपित किया, और उसके लिए एक लीवर प्रेस करने के लिए प्रशिक्षित किया जाता है 10-12 दिनों की अवधि में चतुर्थ हेरोइन. हेरोइन आत्म - प्रशासन चरण के बाद चूहों operant कंडीशनिंग कक्षों से हटा रहे हैं और कम से कम 14 दिनों की अवधि के लिए जानवरों की देखभाल की सुविधा में रखे. एक समूह भोजन (sated समूह) पर असीमित अधिकार के तहत बनाए रखा है, वहीं एक दूसरे समूह (एफडीआर समूह) के एक मील के संपर्क में हैउनके शरीर के वजन में यह परिणाम है कि एलडी खाद्य प्रतिबंध आहार उनके nonrestricted शरीर के वजन के 90% पर बनाए रखा. खाद्य प्रतिबंध के 14 दिन पर चूहों वापस दवा प्रशिक्षण में पर्यावरण के लिए स्थानांतरित कर रहे हैं, और एक दवा की मांग की परीक्षा (यानी. लीवर प्रेस हेरोइन वितरण में परिणाम नहीं है) विलुप्त होने की शर्तों के तहत चलाया जाता है.
यहाँ प्रस्तुत प्रक्रिया भोजन प्रतिबंधित चूहों में परीक्षण के दिन पर हेरोइन की मांग की एक बेहद मजबूत वृद्धि में यह परिणाम है. इसके अलावा, हम पहले प्रयोग किया जाता है तीव्र भोजन के अभाव जोड़तोड़ की तुलना में मौजूदा प्रक्रिया दवा की मांग पर गरमी प्रतिबंध के प्रभाव के लिए एक अधिक नैदानिक प्रासंगिक मॉडल है. इसके अलावा, यह चूहों लोकप्रिय बहाली की प्रक्रिया का एक अभिन्न अंग है जो दवा की मांग की परीक्षा, पहले एक विलुप्त होने के प्रशिक्षण चरण के माध्यम से जाने के लिए आवश्यक नहीं कर रहे हैं के रूप में मानव की स्थिति के करीब हो सकता है.
Introduction
नशीली दवाओं की लत के इलाज में बड़ी कठिनाइयों का एक भी संयम 1,2 की लंबी अवधि के बाद, पतन की उच्च दर है. मानव नशेड़ी में अध्ययन डूबने ऐसी दवा जुड़े असतत cues या वातावरण 3 और तनावपूर्ण जीवन की घटनाओं 4 के लिए जोखिम के रूप में पर्यावरण की चुनौतियों का एक महत्वपूर्ण योगदान की पहचान की है. दवा ले रही है और लालसा पर एक प्रभाव हो पाया था कि एक आम पर्यावरणीय चुनौती पुरानी खाद्य प्रतिबंध है. उदाहरण के लिए, यह पुरानी गरमी प्रतिबंध वृद्धि की सिगरेट 5 धूम्रपान के साथ जुड़ा हुआ है कि सूचना मिली है. इसके अलावा, परहेज़ गंभीरता (गरमी प्रतिबंध) सकारात्मक युवा महिलाओं 6 में नशीली दवाओं के प्रयोग की एक वृद्धि की व्यापकता के साथ जोड़ा जाता है. हालांकि, अंतर्निहित मस्तिष्क तंत्र पूरी तरह से समझ नहीं रहे हैं.
कारण मानव अनुसंधान, पशु मॉडल घंटे से संबंधित व्यावहारिक और नैतिक आधार कोप्रासंगिक तंत्रिका तंत्र की पहचान करने के लिए विकसित किया गया AVE. हम पहले से तीव्र (24-48 घंटे) भोजन के अभाव 9,10 को उजागर कर रहे हैं कि चूहों में मांग बुझा दवा की बहाली का प्रदर्शन करने के लिए बहाली प्रक्रिया 7,8 इस्तेमाल किया है. हालांकि, बहाली प्रक्रिया का एक अभिन्न हिस्सा मादक पदार्थों की लत उपचार 11 की एक आम सुविधा नहीं है (लेकिन बहाली प्रक्रिया की वैधता पर व्यापक चर्चा के Epstein एट अल. 12 देखें) कि एक विलुप्त होने की अवधि है. इसके अलावा, मानव, केवल पुरानी खाद्य प्रतिबंध, लेकिन तीव्र नहीं भोजन के अभाव में आहार जोड़तोड़ की विशेष मामले में, प्रभावी ढंग से दवा ले रही है 5,13 बढ़ाने के लिए दिखाया गया था.
नतीजतन, हम दवा की मांग पर पुरानी खाद्य प्रतिबंध के प्रभाव के अध्ययन की अनुमति देता है कि एक "संयम प्रक्रिया" 14 का सुझाव दिया है. हमने हाल ही में घंटे के एक मजबूत वृद्धि का प्रदर्शन किया है इस प्रक्रिया का उपयोगeroin हल्के भोजन प्रतिबंध 15 के 14 दिनों के प्रदर्शन के बाद संयमी चूहों में मांग.
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Protocol
1. पशु
सभी चूहों पशु की देखभाल पर कनाडा परिषद के दिशा निर्देशों और सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं के लिए अनुमोदन Concordia विश्वविद्यालय पशु अनुसंधान आचार समिति द्वारा प्रदान की गई थी के अनुसार व्यवहार कर रहे हैं.
- 275-300 ग्राम (पुरुष) या 225-250 ग्राम (महिलाओं) पर चूहों प्राप्त करते हैं. Corncob बिस्तर और कटा हुआ कागज युक्त मानक प्लास्टिक पिंजरों में सर्जरी तक जोड़े में सदन चूहों.
- एक उलट प्रकाश अंधेरे चक्र (9:30 पर बंद प्रकाश) पर चूहों बनाए रखें.
- यकीन है कि भोजन और पानी संयम की अवधि के दौरान छोड़कर, यथेच्छ उपलब्ध हैं बनाओ. हम एक नियमित चूहे चाउ (20.9% प्रोटीन, 67.2% कार्बोहाइड्रेट और 11.8% वसा) का उपयोग करें.
2. कैथेटर और कनेक्टर्स
- थोक में कैथेटर बनाओ और आटोक्लेव नसबंदी निम्नलिखित समय की एक लंबी अवधि में जरूरत के रूप में इस्तेमाल करते हैं.
- 12 सेमी लंबे टुकड़े को Silastic टयूबिंग कट.
- एक छोटी सी जगह के लिए, एक दंर्तखोदनी का प्रयोग करेंकैथेटर के आसपास सिलिकॉन की बूंद, टिप से 3 सेमी.
- 24 घंटे के लिए सिलिकॉन सूखा और फिर आटोक्लेव और कैथेटर की दुकान.
- बेंड प्लास्टिक कुरसी के लिए एक सही कोण, एक योजक के रूप में काम करेगा कि "5 अप" प्रवेशनी, की लंबी ट्यूब, तो आटोक्लेव और दुकान.
- , इकट्ठा aseptically, प्लास्टिक कुरसी के लिए आधे रास्ते के बारे में "5 अप" प्रवेशनी, का तुला धातु ट्यूब पर Silastic ट्यूब का "लंबे समय" की ओर धकेलने के द्वारा सर्जरी के दिन पर कैथेटर,.
- Tygon टयूबिंग और बाँझ खारा से भरा एक 1 मिलीलीटर सिरिंज से एक पा लिया 22 जी सुई के माध्यम से "5 अप" ट्यूब कनेक्ट करें.
- अबाधित प्रवाह को सुनिश्चित करने के लिए कैथेटर के माध्यम से खारा फ्लश.
3. अंतःशिरा कैथीटेराइजेशन सर्जरी
- सर्जरी से पहले जानवरों की देखभाल की सुविधा (एसीएफ) में चूहों acclimatization के एक सप्ताह की अनुमति दें. कम शरीर के वजन के साथ चूहों पर सर्जरी प्रदर्शन न करें300-325 ग्राम (पुरुष) या 250-275 ग्राम (महिलाओं) की तुलना में.
- सर्जरी से पहले वजन और एक ketamine / xylazine मिश्रण के साथ चूहों anesthetize (90/13 मिलीग्राम / किग्रा, आईपी).
- दाढ़ी, और फिर शराब और शल्य साफ़ साथ सिर और (करीब गर्दन के आधार पर) दाएँ कंधे पर क्षेत्र को साफ.
- संक्रमण के खिलाफ रक्षा के लिए पेनिसिलिन (450,000 आइयू / चूहा, अनुसूचित जाति) इंजेक्षन, और जलयोजन के लिए खारा (अनुसूचित जाति) के 2 मिलीलीटर. संज्ञाहरण से प्रेरित सूखापन को रोकने के लिए चूहे की आंखों को आंसू जेल लागू करें.
- अपने पेट पर चूहे प्लेस और आंखों के बीच, सिर के शीर्ष पर, एक छुरी का उपयोग कर, एक चीरा बनाने, और दुमदारी चूहे के कान की ओर.
- सतह पर टेप forearms साथ अपनी पीठ पर चूहा रखें. संदंश के साथ, बस हंसली को विजय - स्तम्भ, चीरा क्षेत्र में त्वचा लिफ्ट और अनुदैर्ध्य छोटी कैंची से काट एक 1 सेमी बनाते हैं.
- दो सीधे संदंश का प्रयोग, बाहरी कंठ गेट तक वसा और अन्य ऊतकों को अलगn अवगत कराया है.
- आसपास के ऊतकों से नस उठा और अलग करने के लिए नस के तहत सीधे संदंश के सुझावों पुश. ध्यान से किसी भी पालन ऊतक से नस साफ है और फिर इसे उठा लिया और थोड़ा बढ़ाकर रखने के लिए नस के तहत घुमावदार संदंश डालें.
- बनाओ एक छोटे,, वी के आकार छोटे वसंत कैंची का उपयोग नस की ऊपरी सतह पर काटा.
- कट एक पोत फैलनेवाली उपयोग करते हुए खुले रखें, और सिलिकॉन बूंद चीरा बिंदु पर है जब तक दिल की ओर नस में कैथेटर की "छोटी", 3 सेमी टिप अग्रिम.
- जहाँ तक संभव हो दुम एक, सिलिकॉन बूंद को सिर्फ व्याख्यान चबूतरे वाला एक और जहाँ तक संभव हो व्याख्यान चबूतरे वाला तीसरा एक: 3 टांके के साथ नस को कैथेटर टाई.
- यह अबाधित बनी हुई है और टांके भी तंग नहीं कर रहे हैं कि यह सुनिश्चित करें कि प्रत्येक सिवनी निम्नलिखित कैथेटर के माध्यम से खारा गुजरती हैं.
- हथियार के आसपास टेप निकालें और नीचे चूहे उदर पक्ष रखें.
- एक hemostat टी डालेंसिर चीरा की दुम का पक्ष hrough और एक चमड़े के नीचे "जेब" बनाने के लिए अंतर्निहित ऊतक से त्वचा को अलग करने के लिए धक्का.
- कैथेटर डाला गया था, जहां कंधों पर खोलने की दिशा में त्वचा के नीचे hemostat गाइड.
- Hemostat का उपयोग संयोजी ऊतक के माध्यम से तोड़ने, और कस के आधार नीचे, सबसे व्याख्यान चबूतरे वाला बिंदु पर कैथेटर क्लैंप "5 अप."
- "5 अप" को अलग करें और त्वचा के नीचे और चूहे के सिर के शीर्ष पर स्थित चीरा बाहर कैथेटर की लंबी अंत धागा.
- Hemostat clamped किया गया था जहां से नीचे कैथेटर कटौती और की लंबी अंत पुनः अनुलग्न कैंची का प्रयोग करें "5 अप."
- सभी तरह के प्लास्टिक कुरसी के लिए "5 अप" के धातु शाफ्ट साथ कैथेटर खींचो. मुक्त प्रवाह को सुनिश्चित करने के माध्यम से खारा गुजरती हैं.
- अपनी पीठ पर चूहे रखें, और हंसली के पास ही चीरा सीवन. सिर चीरा rema चाहिएखुले में.
- एक stereotaxic तंत्र में चूहे रखें. बुलडॉग clamps और साफ उपयोग कर सिर के शीर्ष पर चीरा में त्वचा दूर करना और खोपड़ी की सतह सूखी.
- खोपड़ी में 4-5 छेद ड्रिल और सिर की टोपी के लिए मचान के रूप में कार्य करने के लिए छेद में मशीन शिकंजा डालने के लिए, एक मैनुअल ड्रिल बिट का प्रयोग करें.
- शिकंजा के बीच "5 अप" कनेक्टर प्लेस और पहले से hemostat का उपयोग किया चमड़े के नीचे "जेब" में कैथेटर की अतिरिक्त लंबाई टक.
- खोपड़ी के शीर्ष पर "5 अप" प्रत्यय दंत सीमेंट का प्रयोग करें. सीमेंट पूरी तरह सूख जाने के बाद stereotaxic तंत्र से चूहा निकालें.
- (5 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति एनाल्जेसिक) और खारा के 2 मिलीलीटर (अनुसूचित जाति) ketoprofen के होते हैं जो चूहे पोस्ट ऑपरेटिव देखभाल, दीजिए. दर्द प्रबंधन के साथ सहायता करने के लिए सर्जरी के बाद एक अतिरिक्त 2 दिनों के लिए ketoprofen प्रशासन.
- दैनिक शुरुआत 48 घंटा सर्जरी के बाद, फ्लश चूहों डब्ल्यूबाँझ खारा में हेपरिन और gentamicin की ith एक मिश्रण (7.5 आइयू + 12 ग्राम, 0.2-0.3 मिलीग्राम) ~ 2 दिनों की वसूली की अवधि के दौरान और हेरोइन आत्म - प्रशासन चरण के माध्यम से.
4. व्यवहार प्रक्रिया
हेरोइन की मांग की खाद्य प्रतिबंध प्रेरित वृद्धि की प्रक्रिया के लिए समय चित्र 1 में प्रस्तुत किया है.
- Operant कंडीशनिंग कक्षों.
- हाउस चूहों व्यक्तिगत operant कंडीशनिंग कक्षों में एक प्रशंसक के साथ सुसज्जित लकड़ी के डिब्बों attenuating ध्वनि में संलग्न.
- प्रत्येक कक्ष में एक स्टेनलेस स्टील धातु ग्रिड मंजिल, एक आगे और पीछे Plexiglas दीवार और दो धातु पैनल sidewalls के होते हैं. माउंट दो 9 सेमी सही sidewall की मंजिल से ऊपर वापस लेने योग्य लीवर, और प्रत्येक लीवर ऊपर एक क्यू प्रकाश का पता लगाने. Nondrug बनती (निष्क्रिय) लीवर पर जवाब कोई प्रोग्राम परिणाम है, जबकि दवा बनती (सक्रिय) लीवर पर प्रतिक्रिया एक प्रेरणा पंप को सक्रिय करता है. </ ली>
- सक्रिय लीवर ऊपर एक स्वर मॉड्यूल (2.9 kHz) का पता लगाएँ, और छोड़ दिया sidewall के शीर्ष केंद्र पर एक रेड हाउस प्रकाश की स्थिति.
- एक धातु वसंत के साथ सुरक्षित एक तरल कुंडा और Tygon टयूबिंग के माध्यम से कैथेटर को दवा पंप से कनेक्ट करें. इसके अलावा, एक भोजन हॉपर और भोजन और पानी के लिए अप्रतिबंधित उपयोग की अनुमति एक पानी की बोतल के साथ प्रत्येक कक्ष से लैस.
- आदी होना दिन:
- सर्जरी से वसूली के बाद स्फूर्त प्रशिक्षण कक्ष में चूहों कदम है और एक 24 घंटा आदी होना अवधि के लिए अनुमति देते हैं.
- धातु वसंत को चूहों से कनेक्ट नहीं है और cue-light/tone जटिल सक्रिय नहीं करते.
- सक्रिय लीवर मुकर बनी हुई है कि सुनिश्चित करें, लेकिन निष्क्रिय लीवर प्रशिक्षण के दौरान दो लीवर के बीच भेदभाव के साथ मदद के लिए बढ़ा दिया गया है यह सुनिश्चित.
- हेरोइन आत्म - प्रशासन:
- Tygon ट्यूब के लिए 5 अप कनेक्टर कनेक्ट और धातु वसंत देते हैं.
- आत्म - एडीएम को चूहों की अनुमति दें3 घंटा के अंतराल के द्वारा अलग तीन 3 घंटा सत्र के दौरान 10 दिनों के लिए inister हेरोइन (0.1 मिलीग्राम / किग्रा / अर्क).
- सक्रिय और निष्क्रिय लीवर का विस्तार, साथ ही घर की रोशनी और के लिए cue-light/tone परिसर की सक्रियता की रोशनी के साथ (हमारी प्रयोगशाला में 09:30 के आसपास) अंधेरे चरण की शुरुआत निम्न प्रत्येक सत्र शुरू 30 सेकंड.
- घर बत्ती बंद कर दिया और सक्रिय लीवर ऊपर क्यू प्रकाश / स्वर जटिल है, जिसके दौरान दवा पंप (5 सेकंड, 0.13 मिलीग्राम / अर्क) और एक 20 सेकंड मध्यांतर अवधि के दीक्षा की सक्रियता में सक्रिय लीवर परिणाम पर प्रतिक्रियाएँ (एफआर-1, 20 सेकंड मध्यांतर) सक्रिय. मध्यांतर अवधि के दौरान, सक्रिय लीवर प्रतिक्रियाएं दर्ज लेकिन प्रबलित नहीं कर रहे हैं. निष्क्रिय लीवर प्रतिक्रियाएं दर्ज लेकिन कोई प्रोग्राम परिणाम हो रहे हैं.
- निष्क्रिय लीवर 1 घंटा अगले दिन के पहले सत्र से पहले तक बढ़ा रहता है, जबकि प्रत्येक 3 घंटा सत्र के बाद, सक्रिय लीवर मुकर गया है.
- संयम और खाद्य प्रतिबंध:
- आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण के बाद, operant कंडीशनिंग कक्षों से चूहों को हटाने और व्यक्तिगत रूप से ए सी एफ में उन्हें घर, और एक दवा वार्शआउट दिन के लिए भोजन और पानी के लिए असीमित अधिकार प्रदान.
- भोजन (एफडीआर) प्रतिबंधित या तृप्त, शरीर के वजन, प्रशिक्षण के अंतिम में 5 दिन भर में लेनी और सक्रिय लीवर प्रतिक्रियाओं की संख्या के अनुसार मिलान: दो समूहों में चूहों फूट डालो.
- दवा वार्शआउट दिन बाद, एफडीआर 'चूहों भोजन को हटाने, और 1:30 पर उन्हें चूहे चाउ की लगभग 15 ग्राम खिलाओ. अपने स्वयं के आधारभूत BW का लगभग 90% करने के लिए एफडीआर 'चूहों के शरीर के वजन (BW) बनाए रखने के लिए संयम की 14 दिन में भोजन की राशि को समायोजित करें.
- दवा की मांग टेस्ट: संयम 14 दिन की सुबह, operant कंडीशनिंग कक्षों को चूहों लौटने और धातु वसंत के लिए उन्हें देते हैं. सक्रिय और निष्क्रिय लीवर प्रतिक्रियाओं में एक ही परिणाम एक है, जिसके दौरान एक 1 घंटे या 3 घंटे के सत्र का प्रयोग करें(यानी विलुप्त होने की शर्तों के तहत) दवा की उपलब्धता को छोड़कर आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण, में है.
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Representative Results
समय के साथ शरीर के वजन: विशिष्ट परिणाम शरीर भार हेरोइन आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण के दौरान स्थिर रहेगा कि प्रदर्शित करता है. उनके शरीर के वजन में वृद्धि चाउ करने के लिए अप्रतिबंधित उपयोग के साथ संयम, चूहों, के दौरान खाद्य प्रतिबंधित कर रहे हैं कि उन अपने मूल शरीर के वजन का लगभग 90% या तृप्त 'चूहों के शरीर के वजन का 75-80% (चित्रा 2) के लिए अपने शरीर के वजन को कम करते हुए .
सुई लेनी, प्रशिक्षण से अधिक सक्रिय और निष्क्रिय लीवर प्रतिक्रियाएं: सुई लेनी और प्रशिक्षण दिनों से अधिक वृद्धि प्रत्युत्तर देना सक्रिय लीवर, जबकि प्रत्युत्तर देना निष्क्रिय लीवर करता नहीं (चित्रा 3). आमतौर पर, सक्रिय लीवर प्रशिक्षण के दौरान बढ़ जाती है और जवाब जवाब देने का एक उच्च दर पर स्थिर. जवाब देने के निष्क्रिय लीवर चूहों ठीक से दोनों लीवर के बीच भेदभाव किया है कि वाचक, प्रशिक्षण के दौरान कम से कम बनी हुई है. अंत में, ले लिया नंबर लेनी प्रशिक्षण के दौरान वृद्धि होगीसक्रिय लीवर प्रतिक्रियाओं की तुलना में कम दर पर स्थिर बने हुए हैं. इस हदबंदी के कारण दवा लेनी निम्नलिखित 20 सेकंड मध्यांतर तक संभव है.
परीक्षा के दिन सक्रिय और निष्क्रिय लीवर प्रतिक्रियाएं: सक्रिय लीवर तृप्त चूहों की तुलना में काफी बढ़ जाती है खाद्य प्रतिबंधित चूहों के लिए प्रतिसाद (हम अक्सर उपचार समूहों के बीच एक 250% अंतर मनाया 15 देखें). जवाब देने के निष्क्रिय लीवर प्रतिबंधित खाद्य और तृप्त चूहों (चित्रा 4) के बीच कम से कम और तुलनीय है.
चित्रा 1. प्रयोगात्मक प्रक्रिया का एक समय. प्रक्रिया तीन चरणों के होते हैं. पशु पहले एक क्यू / टोन परिसर (हेरोइन आत्म - प्रशासन चरण) की उपस्थिति में स्वयं प्रशासन एक दवा के लिए प्रशिक्षित किया जाता है, तो एक अलग संदर्भ में ले जाया गया औरएक दिन की दवा वार्शआउट अवधि से गुजरना. वार्शआउट दिन चूहों खाद्य प्रतिबंध या भोजन के लिए असीमित उपयोग के एक आहार दिया जाता है जहां संयम, की एक लम्बी अवधि के बाद है. संयम के 14 वें दिन, चूहों विलुप्त होने की स्थिति (दवा की मांग परीक्षण चरण) के तहत दवा बनती cues की उपस्थिति में एक दवा की मांग की परीक्षा के लिए आत्म - प्रशासन में पर्यावरण के लिए लौट रहे हैं. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .
चित्रा 2. (एफडीआर) और तृप्त समूहों प्रतिबंधित भोजन में शरीर के वजन, प्रयोगात्मक दिन भर. सभी चूहों स्फूर्त प्रशिक्षण कक्षों में हेरोइन आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण और जानवरों की देखभाल की सुविधा में एक 1 दिन दवा वार्शआउट के 10 दिनों गुजरना. चूहे के शरीर हम के अनुसार मिलान कर रहे हैंएफडीआर में अलगाव या तृप्त समूह. पहले ight, सक्रिय लीवर प्रतिक्रिया और दवा लेनी बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .
चित्रा 3. हेरोइन आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण के दौरान किए गए सुई लेनी, सक्रिय और निष्क्रिय लीवर प्रतिक्रियाओं की संख्या. हेरोइन (0.13 मिलीग्राम / किग्रा / अर्क) एक एफआर-1, 20 सेकंड के तहत, 10 दिनों में, तीन 3 घंटा सत्र में आत्म प्रशासित है सुदृढीकरण की अनुसूची बाहर का समय है. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .
फाईgure 4. संयमी चूहों में मांग हेरोइन पर लंबे समय तक खाद्य प्रतिबंध (एफडीआर) के लिए जोखिम के प्रभाव. डेटा परीक्षण के दिन पर प्रतिक्रिया ठेठ सक्रिय और निष्क्रिय लीवर का प्रतिनिधित्व करता है. परीक्षा के दिन हेरोइन आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण और एफडीआर के तहत संयम या तृप्त स्थितियां दिन बाद 14 विलुप्त होने की शर्तों के तहत एक 1 घंटा (या 3 घंटा) परीक्षण सत्र के होते हैं. बड़ी छवि को देखने के लिए यहां क्लिक करें .
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Discussion
1) यह स्वैच्छिक नशीली दवाओं के सेवन और दवा प्रशासन पर नियंत्रण के लिए, 2) यह मानव नशा में आम है कि प्रशासन के एक मार्ग का उपयोग करता है की अनुमति देता है, क्योंकि यहाँ वर्णित प्रक्रिया मजबूत चेहरा वैधता है, 3) यह दवा जोखिम की (अपेक्षाकृत) लंबी अवधि दर्शाता और संयम, और 4) यह बहाली की प्रक्रिया का अभिन्न अंग है, लेकिन शायद ही कभी मानव नशेड़ी 14 में मनाया जाता है कि दवा की मांग की परीक्षा से पहले विलुप्त होने के प्रशिक्षण से बचा जाता है. इसके अलावा, प्रक्रिया मॉडल 5 दवा की मांग पर गरमी प्रतिबंध के प्रभाव पर विचार जब महत्वपूर्ण माना जाता है कि एक लंबे समय तक खाद्य प्रतिबंध हालत.
हम यहाँ वर्णन प्रोटोकॉल में, चूहों दवा आत्म - प्रशासन अवधि (24 घंटे / दिन) के माध्यम से operant कंडीशनिंग कक्षों में रखे जाते हैं. यह चूहों एसीएफ एक वापस करने के लिए स्थानांतरित कर रहे हैं, जिसमें एक "दस्तों" प्रोटोकॉल का उपयोग करके डेटा संग्रह की दक्षता बढ़ाने के लिए संभव हो सकता हैहर दिन प्रशिक्षित किया जा करने के लिए कई समूहों के लिए अनुमति fter एक एकल दैनिक प्रशिक्षण सत्र,. हेरोइन अधिमानतः "घर" वातावरण 16 में प्रशासित किया जाता है के बाद से हालांकि, इस दृष्टिकोण, कोकीन प्रशिक्षण के लिए अधिक उपयुक्त हो सकता है. हम दस्तों विकल्प का उपयोग करने की प्रक्रिया की दक्षता का मूल्यांकन नहीं किया है. प्रक्रिया के throughput बढ़ाने के लिए एक और रास्ता 10-12 दिनों से चूहों के दो समूहों के लिए दवा आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण चौंका देने वाला से है. पहले समूह ए सी एफ में संयम की अवधि के माध्यम से चला जाता है, जबकि इस डिजाइन का उपयोग, दूसरे समूह में चूहों आत्म - प्रशासन के लिए प्रशिक्षित किया जाता है. दूसरे समूह के लिए नशीली दवाओं के आत्म - प्रशासन प्रशिक्षण कक्षों की पूरी तरह से सफाई के लिए अनुमति देने के लिए कम से कम एक दिन पहले समूह के लिए योजना बनाई परीक्षण से पहले निष्कर्ष निकाला जाना चाहिए.
हम प्रतिबंध अवधि में आप ई में मांग हेरोइन बढ़ाने में नाकाम रहने के खाद्य प्रतिबंध के 3-5 दिनों के साथ, महत्वपूर्ण है कि 15 से पहले की सूचना दी हैसंयम की अवधि के एन डी. हम वृद्धि हुई जोखिम अवधि (; अप्रकाशित डेटा ~ 28 दिन) के साथ खाद्य प्रतिबंध गड़बड़ी की प्रभावकारिता में वृद्धि देखी है.
यह भी आत्म - प्रशासन चरण और संयम की अवधि के बीच संदर्भ में परिवर्तन दवा की मांग की वृद्धि के लिए महत्वपूर्ण होने लगता है कि ध्यान देने योग्य है. हम चूहों संयम अवधि (अप्रकाशित अवलोकन) के दौरान दवा प्रशिक्षण वातावरण में रखा जाता है जब खाद्य प्रतिबंध के लिए एक बहुत कम प्रभाव का सुझाव है कि डाटा एकत्र किया है.
अंत में, हेरोइन की मांग की खाद्य प्रतिबंध प्रेरित वृद्धि एक मजबूत, आसानी से replicable प्रभाव है. इसलिए यह microdialysis या electrophysiological तकनीकों, और बाद टी का उपयोग औषधीय pretreatments, neurochemical या neuronal गतिविधि की ऑनलाइन निगरानी का उपयोग, डूबने निम्नलिखित संयम कायम करना है कि तंत्रिका तंत्र पर अध्ययन के कुशल डिजाइन के लिए अनुमति देता हैस्था ऊतकीय विश्लेषण करती है.
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Disclosures
सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं के लिए स्वीकृति पशु की देखभाल पर कनाडा परिषद के दिशा निर्देशों के अनुसार, Concordia विश्वविद्यालय पशु अनुसंधान आचार समिति द्वारा प्रदान की गई थी. लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषित. एफएस और टीडी समान रूप से यहां और पांडुलिपि के लेखन के लिए प्रस्तुत प्रक्रिया के विकास के लिए योगदान दिया.
Acknowledgments
इस काम के प्राकृतिक विज्ञान और इंजीनियरिंग परिषद डिस्कवरी प्रोग्राम (अमेरिका: 298,915) द्वारा समर्थित किया गया था, Fonds डे Recherche डु क्यूबेक - SANTE (CSBN), और कनाडा रिसर्च प्रोग्राम (अमेरिका) कुर्सियों.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Ketamine (Vetalar, 100 mg/ml) | Bioniche Animal Health | Obtained through local distributer | |
| Xylazine (Rompun, 100 mg/ml) | Bayer | Obtained through local distributer | |
| Heroin HCl | National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA | ||
| Anafen injection 1 mg/ml Vial/20 ml | CDMV, Canada | 12868 | |
| Equipment | |||
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037) | Fisher Scientific | 1118915A | |
| GE marine silicon | GE | SE-1134 | |
| Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060) | VWR | 63018-044 | |
| Cannulae (22 G, 5-up) | Plastics One | C313G-5up | |
| Liquid swivels, plastic, 22 G | Lomir Biomedical, Inc. | RSP1 | |
| Fixed speed infusion pump (3.3 rpm) | Coulbourn Instruments | A73-01-3.3 | |
| Rat test cage | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC | |
| Stainless steal grid floor | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC-SF | |
| House light-rat | Coulbourn Instruments | H11-01R | |
| Single high-bright cue-rat | Coulbourn Instruments | H11-03R | |
| Tone module 2.9 kHz | Coulbourn Instruments | H12-02R-2.9 | |
| Retractable lever-rat | Coulbourn Instruments | H23-17RA | |
| Balance arm | Coulbourn Instruments | H29-01 | |
| Sound attenuation boxes | Concordia University | Home made | |
| System controller 2 | Coulbourn Instruments | SYS CTRL 2 | |
| System power base | Coulbourn Instruments | H01-01 | |
| Habitest Universal Linc | Coulbourn Instruments | H02-08 | |
| Environment connection board & Linc cable | Coulbourn Instruments | H03-04 | |
| Graphic State Notation 3 | Coulbourn Instruments | GS3 |
References
- Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).
- O'Brien, C. P., McLellan, A. T. Myths about the treatment of addiction. Lancet. 347, 237-240 (1996).
- Childress, A. R., Ehrman, R., Rohsenow, D. J., Robbins, S. J., O'Brien, C. P. Classically conditioned factors in drug dependence. Substance abuse: A comprehensive textbook. Lowinson, J. W., Luiz, P., Millman, R. B., Langard, G. , Williams and Wilkins. Baltimore. 56-69 (1992).
- Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
- Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers. Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).
- Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women. J. Subst. Abuse. 4, 341-353 (1992).
- de Wit, H., Stewart, J. Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat. Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).
- Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings. Psychopharmacology. 168, 3-20 (2003).
- Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).
- Tobin, S., Newman, A. H., Quinn, T., Shalev, U. A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).
- Katz, J. L., Higgins, S. T. The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use. Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).
- Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).
- Zacny, J. P., de Wit, H. The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans. Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).
- Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. R., Xie, X. Relapse to drug seeking following prolonged abstinence: the role of environmental stimuli. Drug Discov. Today Dis. Models. 5, 251-258 (2008).
- D'Cunha, T. M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats. Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).
- Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats. Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).
