Méthodes de collecte de lait pour souris et Muntjac cerfs de Reeves

Résumé

La collecte de lait sur des modèles animaux facilite diverses pistes de recherche : comprendre l’immunité passive, identifier les agents pathogènes responsables de la transmission verticale et, grâce à l’utilisation de souris transgéniques, voire la production commerciale de protéines présentes dans le lait maternel humain. Nous illustrons ici une méthode simple de collecte du lait chez les souris et le cerf muntjac de Reeves.

Résumé

Les modèles animaux sont couramment utilisés dans les laboratoires de recherche pour accomplir ce qui serait normalement considéré comme impraticable chez l’hôte natif d’un agent pathogène. La collecte de lait sur des animaux permet aux scientifiques d’étudier de nombreux aspects de la reproduction, notamment la transmission verticale, l’immunité passive, la biologie des glandes mammaires et la lactation. Obtenir des volumes de lait adéquats pour ces études est une tâche difficile, en particulier à partir de petits modèles animaux. Nous illustrons ici une méthode peu coûteuse et facile pour la collecte du lait chez les souris et le cerf muntjac de Reeves qui ne nécessite pas d’équipement spécialisé ni de formation approfondie. Cette méthode particulière nécessite deux chercheurs : l’un pour exprimer le lait et stabiliser l’animal, et l’autre pour recueillir le lait dans un récipient approprié à partir d’un modèle de Muntjac ou de souris. Le modèle de souris nécessite également l’utilisation d’un pipeteur P-200 et des pointes de pipette correspondantes. Bien que cette méthode soit peu coûteuse et relativement facile à mettre en œuvre, les chercheurs doivent être informés qu’une anesthésie de l’animal est nécessaire pour une collecte optimale du lait.

Introduction

Les modèles animaux donnent un aperçu de la pathologie de la maladie qui ne peut être obtenu par une analyse in vitro. De fournir les résultats les plus efficaces, il est important d'utiliser un modèle animal qui est étroitement liée à la maladie et des espèces d'intérêt. Par exemple, le muntjac de l'Reeves (Muntiacus reevesi), un petit cerf Asie ^1,2, et les souris transgéniques exprimant la protéine prion des cervidés (CerTgPrP) ³ sont des modèles animaux utiles pour les espèces de cervidés. Les deux espèces sont polyestrous, permettant l'année élevage, et donc une source constante pour les tissus et les fluide....

Protocole

1. Protocole traite souris

Les méthodes décrites dans le présent protocole ont été approuvés par IACUC.

1. Séparation du barrage de Offspring

1. Sélectionnez le barrage à traire. Choisissez un barrage avec une portée de 4 ou plus petits qui est de 8-12 jours après l'accouchement de fournir du lait maximale collection-même si la collecte est possible à tout point de temps après l'accouchement jusqu'à 21 jours.
2. Séparer le barrage de sa litière au moins 2 heures avant la traite.
   Remarque: Si un désir de lait plus d'un barrage dans une période de temps donnée, il est acceptabl....

Résultats

Souris

De nos expériences, nous avons déterminé qu'il est possible de collecter environ 100-400 pi de lait d'une souris de laboratoire, en fonction de plusieurs variables. Ces variables comprennent: 1) le temps mis de côté pour la collecte, 2) la dose d'ocytocine administrée, 3) combien de chiots barrage est actuellement infirmière et 4) le montant de la post accouchement de temps. Nos études ont montré que le rendement le plus élevé est obtenu lorsque les barrag.......

Discussion

Souris

Il ya plusieurs facteurs à prendre en considération lors de la collecte de lait d'une souris, y compris 1) le temps mis de côté pour la collecte, 2) la dose d'ocytocine administrée, 3) combien de chiots barrage est actuellement infirmière et 4) le montant de temps qui s'est écoulé depuis la mise bas au moment de la collecte. En utilisant des études précédentes que les lignes directrices, nous avons décidé d'optimiser les conditions pour la production d.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Matériaux— ;
Kétamine de souris (KetaVed 100 mg/ml) (dose : 80-100 mg/kg)	MWI/Vedco	011075
Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose : 5-10 mg/kg)	MWI/Vedco	NADA 139236
Lubrifiant pour les yeux	MWI/Apexa	701013
Ocytocine (2 UI/kg)	Vet One	501013
Matériaux— ; Muntjac
Midazolam (1-2 mg/kg)	Amerisource Bergen Drug Corp	924326	Facultatif : le chercheur peut utiliser le midazolam seul ou en association avec le BAM comme anesthésique
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0,45 mg/kg)	Fort Dodge Animal Health	NADA 135-780
Tartrate d’azaperone (0,25 mg/kg)	ZooPharm
Medetomadine HCl (0,07 mg/kg)	ZooPharm
Chlorhydrate d’antipamezol (Antisedan) (dose : 0,25 mg/kg)	Orion Corporation	NADA 141-033
Ocytocine (10 UI/kg)	Vet One	501013
Équipement— ; Souris
P-200 Pipetman	Gilson	F123601
200 &mu ; l pointes de pipette	Light Labs	B-2004-SH
Seringues de 1 ml	MWI	005427
aiguilles de 27 G	MWI	002031
Équipement— ; Muntjac
15 ml Tubes coniques	VWR	21008-918
Aiguilles 22 G	MWI	873
Seringues Luer Lock 3 ml	MWI	001377