Summary

समय पाठ्यक्रम indocyanine ग्रीन एंजियोग्राफी द्वारा आयु से संबंधित धब्बेदार अध: पतन के एक माउस मॉडल में रंजितपटल संबंधी vasculature में असामान्यताएं का पता लगाने के

Published: February 19, 2014
doi:

Summary

पूंछ नस में इंजेक्शन द्वारा प्रदर्शन indocyanine ग्रीन एंजियोग्राफी (या ICGA) माउस रंजित में असामान्यताएं चिह्नित करने के लिए उच्च गुणवत्ता ICGA समय पाठ्यक्रम चित्र प्रदान करता है.

Abstract

Indocyanine ग्रीन एंजियोग्राफी (या ICGA) choroidal और ऐसी उम्र से संबंधित धब्बेदार अध: पतन (AMD) के रूप में विभिन्न नेत्र रोगों की रेटिना vasculature की असामान्यताओं का पता लगाने के लिए नेत्र रोग विज्ञानियों द्वारा निष्पादित एक तकनीक है. ICGA कारण इसकी अवरक्त स्पेक्ट्रम के साथ रंजित परत के माध्यम से मर्मज्ञ की अपनी क्षमता को आँख के पीछे choroidal vasculature छवि के लिए विशेष रूप से उपयोगी है. ICGA समय पाठ्यक्रम जल्दी, मध्य, और देर चरणों में विभाजित किया जा सकता है. तीन चरणों आंख की समस्याओं की विकृति पर बहुमूल्य जानकारी प्रदान करते हैं. नसों में से समय पाठ्यक्रम ICGA (चतुर्थ) के इंजेक्शन को व्यापक रूप से रंजित समस्याओं के निदान के प्रबंधन के लिए क्लिनिक में इस्तेमाल किया जाता है, ICGA intraperitoneal इंजेक्शन (आईपी) द्वारा आमतौर पर पशु अनुसंधान में प्रयोग किया जाता है. यहाँ हम पूंछ नस इंजेक्शन और confocal स्कैनिंग लेजर ophthalmoscopy द्वारा चूहों में उच्च संकल्प ICGA समय पाठ्यक्रम छवियों को प्राप्त करने के लिए तकनीक का प्रदर्शन किया. हम choroidal Le छवि के लिए इस तकनीक का इस्तेमालउम्र से संबंधित धब्बेदार अध: पतन के एक माउस मॉडल में वजहें. यह आईपी द्वारा माउस vasculature को भारतीय तट रक्षक लागू करने के लिए बहुत आसान है, हमारे डेटा यह आईपी ICGA से प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य ICGA समय पाठ्यक्रम छवियों को प्राप्त करना कठिन है कि संकेत मिलता है. इसके विपरीत, पूंछ नस में इंजेक्शन के माध्यम से ICGA मानव अध्ययन करने के लिए तुलनीय उच्च गुणवत्ता ICGA समय पाठ्यक्रम चित्र प्रदान करता है. इसके अलावा, हम ICGA pigmented चूहों पर किया है कि अधिक से choroidal जहाजों का स्पष्ट चित्र देता सूरजमुखी मनुष्य चूहों पर किया है कि दिखाया. हम उस समय पाठ्यक्रम चतुर्थ ICGA पशु मॉडल पर आधारित AMD अनुसंधान के क्षेत्र में एक मानक अभ्यास हो जाना चाहिए सुझाव देते हैं.

Introduction

Indocyanine हरी एंजियोग्राफी (ICGA) आंख में रक्त वाहिकाओं से संबंधित छवि समस्याओं के लिए एक नैदानिक ​​परीक्षण है. उत्सर्जन स्पेक्ट्रम 770-880 एनएम से 835 एनएम 1 में चोटी उत्सर्जन के साथ पर्वतमाला जबकि भारतीय तट रक्षक के अवशोषण स्पेक्ट्रम 790-805 एनएम से चलता है. इस जिसका स्पेक्ट्रम दिखाई रेंज में पड़ता अन्य लोकप्रिय डाई, सोडियम fluorescein, से अलग है. अवरक्त स्पेक्ट्रम आसानी से सोडियम fluorescein आधारित fluorescein एंजियोग्राफी (एफए) ने दृश्य को ब्लॉक कर सकते हैं, जो सभी के रेटिना वर्णक उपकला (RPE), serosanguineous तरल पदार्थ, और लिपिड exudates, के माध्यम से प्रवेश करने के लिए भारतीय तट रक्षक सक्षम बनाता है. भारतीय तट रक्षक choroidal वाहिकाओं और choroidal घावों 1,2 बढ़ाया इमेजिंग की अनुमति, 98% प्रोटीन बाध्य कम परिस्त्राव में जिसके परिणामस्वरूप vasculature में है. ICGA लगभग RPE को पीछे है जो choroidal vasculature, कल्पना करने के लिए ही पसंद है. चित्रा 1 माउस आँखों में इमेजिंग vasculature में ICGA और एफए की तुलना से पता चलता है. एफए कर सकते हैं खछवि को रेटिना वाहिका संरचना अच्छी तरह से नहीं बल्कि choroidal vasculature उपयोग किए गए ई. इसके विपरीत, ICGA रेटिना और choroidal vasculature दोनों छवि के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. ICGA एक साथ हम इस अध्ययन में इस्तेमाल करेगा जो अवरक्त के प्रति संवेदनशील वीडियो कैमरा, के साथ उच्च संकल्प डिजिटल इमेजिंग सिस्टम या लेजर स्कैनिंग ophthalmoscopes (SLO) के साथ किया जाता है.

क्लिनिक में, ICGA Polypoidal रंजितपटल संबंधी Vasculopathy (PCV), रेटिना वाहिकार्बुदीय प्रसार (आरएपी), रक्तवाहिकाभ धारियाँ, vitelliform धब्बेदार डिस्ट्रोफी, केंद्रीय तरल chorioretinopathy, choroidal रक्तवाहिकार्बुद, ख़ून का बहाव रेटिना सहित choroidal vasculature को शामिल chorioretinal विकारों के एक नंबर के निदान में सिफारिश की गई है arteriolar macroaneurysms, choroidal ट्यूमर, और पीछे के कुछ रूपों 1,3 Uveitis. एफए और ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी (अक्टूबर) के साथ ICGA के संयोजन स्त्रावी उम्र से संबंधित धब्बेदार का निदान और प्रबंधन में चिकित्सकों के लिए शक्तिशाली उपकरण प्रदानअध: पतन (AMD) 4-10. ICGA रंजित शामिल स्थितियों के निदान के लिए विशेष रूप से उपयोगी है. वास्तव में, ICGA PCV, स्त्रावी AMD 11-13 का एक संस्करण के निदान के लिए स्वर्ण मानक माना जाता है. PCV choroidal vasculature 11-13 में टर्मिनल polypoidal dilations साथ जहाजों शाखाओं में बंटी के एक नेटवर्क की विशेषता है. PCV अक्सर रिसाव और polypoidal घटकों 11,14,15 से खून बह रहा है के साथ RPE और रेटिना के आवर्तक serosanguineous टुकड़ी के साथ जुड़ा हुआ है. हमने हाल ही में transgenically माउस रेटिना वर्णक उपकला (RPE) 16 में, मानव HTRA1, एक बहुआयामी सेरीन प्रोटीज व्यक्त की पहली PCV पशु मॉडल की पीढ़ी की सूचना दी. हम वृद्धि हुई HTRA1 PCV की विशेषता सुविधाओं, जैसे polypoidal घावों प्रेरित दिखाया.

यहाँ हम हमारे HTRA1 माउस मॉडल का उपयोग AMD अनुसंधान में पूंछ नस में इंजेक्शन द्वारा समय पाठ्यक्रम ICGA के उपयोग का प्रदर्शन किया. हमारे आंकड़े बताते हैं किचतुर्थ ICGA आईपी (या चमड़े के नीचे (अनुसूचित जाति)) वर्तमान में रंजित में घावों निस्र्पक के लिए क्षेत्र 17,18 में उपयोग किया जाता है कि ICGA से बेहतर है.

पशु अनुसंधान पर वक्तव्य

पशु प्रयोगों संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित प्रोटोकॉल के अनुसार आयोजित की गई, और नेत्र और दृष्टि अनुसंधान में पशुओं के उपयोग के लिए ARVO विवरण के अनुसार में प्रदर्शन किया गया.

Protocol

1. साधनों की तैयारी प्रक्रिया एक जानवरों की सुविधा में एक प्रक्रिया के कमरे में किया जाता है. प्रयोग की शुरुआत से पहले facemasks, बाल bonnets, सर्जिकल गाउन, बाँझ फुट कवर, और दस्ताने पहनते हैं. एक hotplate पर एक ब…

Representative Results

हम CD1 पृष्ठभूमि पर कर रहे हैं, जो दोनों HTRA1 ट्रांसजेनिक चूहों और नियंत्रण WT littermates में ICGA समय बेशक प्रदर्शन किया. सूरजमुखी मनुष्य CD1 पृष्ठभूमि indocyanine हरी एंजियोग्राफी (ICGA) इमेजिंग (चर्चा देखने के लिए) की सुविधा के …

Discussion

इस अध्ययन में, हम HTRA1 ट्रांसजेनिक चूहों में छवि choroidal घावों को ICGA के उपयोग का प्रदर्शन किया. अपने माउस मॉडल में जल्दी, मध्य, और ICGA की देर चरणों की विशेषताओं मानव अध्ययन 1 में अच्छी तरह से समय पाठ्यक्रम मैच. ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस काम दृष्टिहीनता (RPB) को रोकने के लिए एनआईएच अनुदान 1R01EY022901, रिसर्च से कैरियर विकास पुरस्कार द्वारा समर्थित किया गया था, CMReeves और एमए रीव्स फाउंडेशन, ब्लाइंड के लिए ई. मटिल्डा ज़ेग्लेर फाउंडेशन, शूरवीरों टमप्लर नेत्र फाउंडेशन, और विभाग को एक अप्रतिबंधित अनुदान RPB से यूटा विश्वविद्यालय में नेत्र विज्ञान. हम पांडुलिपि पर चर्चा और टिप्पणी के लिए Spectralis बहु साधन इमेजिंग सिस्टम और ताओ जांग पर तकनीकी सहायता के लिए Balamurali Ambati धन्यवाद.

Materials

Spectralis Multi-Modality Imaging System Heidelberg Engineering, Germany SPECTRALIS HRA+OCT
Tropicamide ophthalmic solution (1%) Bausch & Lomb NDC 24208-585-64 for dilation of pupils
GenTeal Gel Genteal NDC 58768-791-15  clear lubricant eye gel 
Ketamine Vedco Inc NDC 50989-996-06
Xylazine Lloyd Laboratories NADA 139-236
Acepromazine Vedco Inc NDC 50989-160-11
32-G Needle Steriject PRE-32013
1-ml syringe BD 309659
Indocyanine Green Pfaltz & Bauer I01250

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Kumar, S., Berriochoa, Z., Jones, A. D., Fu, Y. Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography. J. Vis. Exp. (84), e51061, doi:10.3791/51061 (2014).

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