Diagnóstico Ecografia de função de mouse Diafragma

Summary

Imagiologia de ultra-sons de diagnóstico tem provado ser eficaz para o diagnóstico de várias doenças respiratórias, em seres humanos e animais. Nós demonstramos um protocolo ultra-som abrangente utilizado pelo laboratório do Dr. Zuo para analisar a cinética de diafragma especificamente em modelos do rato. Esta é também uma técnica de pesquisa não-invasivo, que pode fornecer informações quantitativas sobre a função de mouse da musculatura respiratória.

Abstract

A análise funcional dos músculos esqueléticos respiratórias de roedores, em particular o diafragma, é geralmente realizada através do isolamento de tiras de músculo usando procedimentos cirúrgicos invasivos. Embora este seja um método eficaz de avaliação da atividade do diafragma vitro, envolve cirurgia não-sobrevivência. A aplicação de ultra-som não-invasivo, como um processo in vivo, é benéfico, uma vez que não só reduz o número de animais sacrificados, mas é também adequado para a monitorização da progressão da doença em ratinhos vivos. Assim, o nosso método de imagem de ultra-som pode provavelmente auxiliar no desenvolvimento de novas terapias que aliviam a lesão muscular induzida por várias doenças respiratórias. Particularmente, em diagnósticos clínicos de doenças pulmonares obstrutivas, imagiologia de ultra-som tem o potencial para ser usado em conjunto com outros testes padrão para detectar o aparecimento precoce de fadiga muscular diafragma. No protocolo atual, nós descrevemos como avaliar com precisão diafragma contratilidadelidade em um modelo de camundongo usando uma técnica de imagem de ultra-som diagnóstico.

Introduction

Recentemente, técnicas de imagem de ultra-som de diagnóstico foram aplicados a modelos de ratos com hipertensão renovascular e ^1,2 câncer no pâncreas. No entanto, estas técnicas não têm sido amplamente utilizados no ensaio de função da musculatura respiratória roedor. Por isso, desenvolvemos um método de imagem de ultra-som diagnóstico como uma ferramenta valiosa para a avaliação in vivo longitudinais da mobilidade diafragmática em camundongos.

Existem várias vantagens para ultra-sonografia diagnóstica. Por exemplo, é não-invasivo, seguro, portátil, e permite medições em tempo real a um custo relativamente baixo ^3....

Protocol

Todos os procedimentos que envolvem seres animais foram aprovados e concluídos de acordo eo cumprimento do Institutional Animal Care e Use Committee Ohio State University (IACUC) regulamentos e diretrizes.

1. Rato Anestesia

1. Alterar uma tabela de procedimento de limpeza com um bloco isotérmico aquecido envolto em uma toalha cirúrgica. A almofada de aquecimento deve ser mantida entre 30 ° C e 34 ° C, para estabilizar a temperatura do núcleo do animal ao mesmo tempo reduzir o estresse potencial para o animal.
2. Posicione o mouse em uma câmara de indução anestésica com os seguintes parâmetros: taxa de fluxo de oxigênio defi....

Results

Uma imagem típica de uma membrana de ultra-sons do rato é mostrada na Figura 1A. O diafragma do rato deslocamento vertical máxima foi registrada. Esta distância foi calculada medindo com precisão a profundidade do movimento do diafragma de relaxamento para contração usando as pinças de eletrônicos que fazem parte do software de ultra-som. Tabela 1 apresenta essas medidas de distância de contrações do diafragma de três ratos diferentes. Depois de converter o ficheiro de cine loop para um.......

Discussion

O protocolo experimental atual desenvolve técnicas de imagem de ultra-som de diagnóstico específicos para a atividade do diafragma em um modelo do rato através de uma abordagem in vivo não-invasivo,. As configurações de aparelhos de anestesia são valores aproximados, que podem ser ajustadas ligeiramente para cada animal, desde ratos indivíduo pode responder de forma diferente a anestesia. Para evitar a administração de anestesia inadequada, é importante monitorar regularmente os sinais vitais do rato, incluindo.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Sistema de diagnóstico por imagem ultrassônico digital veterinário	Edan	DUS 3 VET	Os parâmetros de ultrassom incluem: frequência de 6,5 MHz, profundidade de 29 mm. Nota: Uma máquina de ultrassom equivalente pode ser usada para este protocolo
Transdutor de matriz microconvexa	Edan	C611	Ou unidade
de transporte manual (HCU) GE Logiq i equivalente	GE Healthcare	GE Logiq i unidade de transporte manual (HCU)	Ou sonda
de matriz linear GE 12 MHz	GE Healthcare	12L-RS	Ou equivalente
Vaporizador de anestésico veterinário	Webster Veterinary	Serial #: W422021	O isoflurano foi usado exclusivamente com este vaporizador (ou equivalente). Uma câmara de indução personalizada para anestesia foi montada para anestesia inicial. A anestesia de manutenção foi realizada usando um cone nasal
Isothesia (Isoflurano, USP)	Butler Schein	29405 250ML PVL	Ou equivalente
Enviro-pure anestesia absorvente canister	Surgivet Smiths Medical PM, Inc.	Parte #: 32373B10	Ou
equivalente Gel de transmissão de ultrassom	HM Sonic	N/A	Ou equivalente
Pomada veterinária Puralube	Puralube	NDC 17033-211-38	Ou
equivalente Almofada isotérmica Deltaphase	Braintree Scientific Inc.	39DP	Ou equivalente
Removedor de pêlos	Nair	N/A	Ou equivalente
Barbeador elétrico	Remington	HC-5015	Ou equivalente
Fita cirúrgica	3M Micropore	1530-1	Ou equivalente
Esponjas de gaze	Dynarex	3262	Ou equivalente