病気のベクトル蚊幼虫におけるキトサン/干渉RNAナノ粒子媒介遺伝子サイレンシング

Xin Zhang; Keshava Mysore; Ellen Flannery; Kristin Michel; David W. Severson; Kun Yan Zhu; Molly Duman-Scheel

doi:10.3791/52523

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方法論記事

病気のベクトル蚊幼虫におけるキトサン/干渉RNAナノ粒子媒介遺伝子サイレンシング

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DOI:

10.3791/52523

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2015年3月25日

Xin Zhang^*¹ , Keshava Mysore^*²^,³ , Ellen Flannery³^,⁴ , Kristin Michel¹ , David W. Severson³^,⁴ , Kun Yan Zhu⁵ , Molly Duman-Scheel²^,³^,⁴

¹Division of Biology, Kansas State University, ²Department of Medical and Molecular Genetics, Indiana University School of Medicine, ³Eck Institute for Global Health, University of Notre Dame, ⁴Department of Biological Sciences, University of Notre Dame, ⁵Department of Entomology, Kansas State University

^* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

ここでは、幼虫により摂取されたキトサン/干渉RNAナノ粒子の使用を通じて疾病媒介蚊で遺伝子機能を阻害するための手順を記述している。

要約

媒介蚊は、他の生物よりも多くの人的被害を与える-と百万人以上の人毎年殺す。蚊のゲノムプロジェクトは、プライマリアフリカのマラリアベクトルハマダラカとデング熱や黄熱病ベクトルネッタイシマカにおける機能遺伝子研究を含め、蚊の生物学の新しいファセットの研究を促進した。電波妨害RNA（RNAiを）媒介遺伝子サイレンシングは、これらの疾患の媒介蚊の種の両方において、目的の遺伝子を標的とするために使用されてきた。ここでは、食物と一緒にし、幼虫により摂取されたキトサン/干渉RNAナノ粒子の調製のための手順を記載している。長い二本鎖RNA（dsRNA）または低分子干渉RNA（siRNA）分子と互換性があり、この技術的に簡単で、高スループット、比較的安価な方法は、Aの異なるいくつかの遺伝子のノックダウンの成功のために使用されているハマダラカとA.ネッタイシマカ幼虫。定量RT-PCRを介して、またはin situハイブリダイゼーションで確認された幼虫授乳、ノックダウン、続いて、少なくとも後半蛹を通じて持続することができます。この方法は、農業害虫、並びに他の非モデル生物を含む蚊および他の昆虫種の多種多様に適用可能である。研究室でのその有用性に加えて、将来、キトサン、安価な、非毒性および生分解性ポリマー中に、潜在的な分野で利用することができる。

概要

ハマダラカとAedine属の血液供給の媒介蚊は、人類の最悪の災いのいくつかの責任病気の原因となる物質を伝達する。推定34億の人々が毎年世界中でオーバーワン50万人の死亡の原因であるマラリアを、縮小するための危険にさらされている。 マラリア原虫属による感染からマラリアの結果。主要なアフリカのベクトルハマダラカ （含むハマダラカ属の感染した蚊の刺さを通じて人々に送信され、寄生虫、 http://www.who.int/topics/malaria/en/ ^{、2014）1。} ネッタイシマカは、デング熱、世界で最も広範かつ重要なアルボウイルス疾患である非特異的な熱性疾患の原因となるデング熱ウイルス、の主要な蚊ベクトルである。デング熱ウイルスは毎年incidenで、現在熱帯> 25億人への脅威である毎年〜24000人が死亡（結果として約5000万例のCE http://www.cdc.gov/dengue/ ^{、2014）2。}人の健康に蚊が媒介する病気の壊滅的な世界的な影響にもかかわらず、これらの疾患の予防及び治療の効果的な手段が不足している。モスキートコントロールは、現在、病気の予防の最善の....