Mesurer les réponses physiologiques de<em&gt; Drosophila</em&gt; Neurones sensoriels à Lipid Phéromones Utilisation en direct d&#39;imagerie de calcium

Shruti Shankar; Meredith E.K. Calvert; Joanne Y. Yew

doi:10.3791/53392

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Article de méthode

Mesurer les réponses physiologiques de

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DOI :

10.3791/53392

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29 avril 2016

Shruti Shankar¹^,² , Meredith E.K. Calvert³^,⁴ , Joanne Y. Yew¹^,²^,⁵

¹Temasek Life Sciences Laboratory, ²Department of Biological Science, National University of Singapore, ³Bioimaging and Biocomputing Facility, Temasek Life Sciences Laboratory, ⁴Histology and Light Microscopy Core, Gladstone Institutes, ⁵Pacific Biosciences Research Center, University of Hawai'i at Mānoa

Dans cet article

Résumé

Les pattes antérieures et la trompe de la drosophile contiennent un riche répertoire de neurones sensoriels gustatifs. Ici, nous présentons une méthode utilisant l’imagerie calcique pour mesurer les réponses physiologiques des neurones sensoriels de la patte antérieure et du proboscis de mouches vivantes lors de l’application exogène d’une phéromone gustative.

Résumé

Contrairement aux mammifères, les insectes tels que la drosophile ont plusieurs organes de goût. Les neurones chimiosensorielles sur les jambes, les proboscidiens, les ailes et tarière de Drosophila expriment des récepteurs gustatifs ^1,2, canaux ioniques ^3-6, et les récepteurs ionotropiques ⁷ qui sont impliqués dans la détection des signaux sensoriels volatiles et non-volatiles. Ces neurones contacter directement tastants tels que la nourriture, les substances et les phéromones nocives et influencent donc beaucoup de comportements complexes tels que l'alimentation, la ponte et l'accouplement. enregistrements d'électrodes et de l'imagerie de calcium ont été largement utilisés dans les insectes pour quantifier les réponses neuronales évoquées par ces sapides. Cependant, l'électrophysiologie nécessite un équipement spécialisé et des mesures d'obtention d'un seul sensille goût peut être techniquement difficile en fonction du type cellulaire, la taille et la position. En outre, la résolution de neurone unique chez la drosophile peut être difficile à atteindre puisque le goût sensilla houSE plus d'un type de neurone chémosensoriel. Procédé d'imagerie en temps réel de calcium décrite ici permet aux réponses des neurones gustatifs simples dans les mouches vivantes à mesurer. Ce procédé est particulièrement adapté pour imager les réponses neuronales aux phéromones lipides et d'autres types de ligands qui ont une faible solubilité dans les solvants à base d'eau.

Introduction

Les animaux comptent sur l'information olfactive et gustative à la médiation des décisions essentielles pour la survie et la reproduction. Comprendre comment les indices chemosensory sont détectées et traitées par le système nerveux exige l' identification du récepteur (s) sensoriel et les ligands chimiques correspondants. Drosophila détecter une variété stupéfiante de composés volatiles et non-volatiles et sont un excellent modèle pour étudier l' état physiologique mécanismes sous-jacents chemosensation. Alors que les organes olfactifs perçoivent des molécules volatiles, les organes gustatifs sont spécialisés pour détecter des composés à faibl....