Isolement et Cannulation de parenchyme cérébral artérioles

Paulo W. Pires; Fabrice Dabertrand; Scott Earley

doi:10.3791/53835

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Article de méthode

Isolement et Cannulation de parenchyme cérébral artérioles

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DOI :

10.3791/53835

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23 mai 2016

Paulo W. Pires¹ , Fabrice Dabertrand² , Scott Earley¹

¹Department of Pharmacology, University of Nevada School of Medicine, ²Department of Pharmacology, University of Vermont College of Medicine

Dans cet article

Résumé

Ce manuscrit décrit un protocole simple et reproductible pour l’isolement des artérioles intracérébrales (un groupe de vaisseaux sanguins englobant les artérioles parenchymateuses, les artérioles pénétrantes et les artérioles précapillaires) chez la souris, à utiliser dans la myographie de pression, l’immunofluorescence, la biochimie et les études moléculaires.

Résumé

artérioles intracérébrales parenchymateuses (AP), qui comprennent les artérioles parenchyme, artérioles pénétrantes et artérioles pré-capillaires, sont très résistants vaisseaux sanguins se ramifient des artères et des artérioles piales et plonger dans le parenchyme cérébral. Individuel PA perfuser un territoire cylindrique discret du parenchyme et les neurones contenus dans. Ces artérioles sont un acteur central dans la régulation du flux sanguin cérébral tant au niveau mondial (d'autorégulation cérébrovasculaire) et localement (hyperémie fonctionnelle). AP font partie de l'unité neurovasculaire, une structure qui correspond à la circulation sanguine régionale de l'activité métabolique dans le cerveau et comprend également des neurones, des astrocytes et des interneurones. Perfusion par AP est directement liée à l'activité des neurones dans ce territoire particulier et l'augmentation des neurones du métabolisme conduisent à une augmentation de la perfusion locale provoquée par la dilatation de l'alimentation PA. Règlement des AP diffère de celui de mieux caractériséartères piales. vasoconstriction induite par la pression est plus grande dans les AP et les mécanismes vasodilatateurs varient. En outre, les AP ne reçoivent pas innervation extrinsèque des nerfs périvasculaires - innervation est intrinsèque et de nature indirecte par contact avec endfeet astrocytaire. Ainsi, les données relatives à la régulation contractile accumulées par des études utilisant des artères piales ne se traduit pas directement à la compréhension de la fonction PA. En outre, il reste à déterminer comment les états pathologiques, comme l'hypertension et le diabète, affectent la structure PA et réactivité. Cette lacune est en partie la conséquence des difficultés techniques liées à l'isolement PA et cathétérisme. Dans ce manuscrit, nous présentons un protocole pour l'isolement et la canulation des AP de rongeurs. De plus, nous montrons des exemples d'expériences qui peuvent être effectués avec ces artérioles, y compris la constriction induite par l'agoniste et de la réactivité myogénique. Bien que l'accent de ce manuscrit est sur canulation PA et myographie de pression, isolé PAs peuvent également être utilisés pour des études biochimiques, biophysiques, moléculaires, et d'imagerie.

Introduction

La circulation cérébrale est organisée uniquement pour soutenir les besoins métaboliques de neurones centraux, les cellules qui ont limité les réserves d'énergie et sont par conséquent très sensible aux variations de la pression d'oxygène et d'éléments nutritifs nécessaires. Comme particulier neuronaux sous - populations devient actif lorsque des tâches spécifiques sont effectuées, la vascularisation favorise une augmentation très localisée de la perfusion pour éviter l' hypoxie locale et de l' épuisement des éléments nutritifs ^1. Ceci est une forme d'hyperémie fonctionnelle connue sous le nom de couplage neurovasculaire, e....