Dit protocol geeft een gedetailleerde beschrijving van de echocardiografische benadering voor uitgebreide fenotypering van de hart- en hartklepfunctie bij muizen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Echocardiografische benaderingen en protocollen voor Comprehensive Fenotypische karakterisering van Valvular hart-en vaatziekten in Muizen
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Het doel van dit manuscript en bijbehorende video is om een overzicht te geven van de methoden en benaderingen die worden gebruikt voor het beeldvormen van de hartklepfunctie bij knaagdieren, met gedetailleerde beschrijvingen van de geschikte methoden voor anesthesie, de gebruikte echocardiografische vensters, de beeldvormingsvlakken en sondeoriëntaties voor beeldacquisitie, de methoden voor data-analyse en de beperkingen van opkomende technologieën voor de evaluatie van cardiale en klepfunctie. Belangrijk is dat we ook verschillende toekomstige onderzoeksgebieden op het gebied van cardiale en hartklepbeeldvorming benadrukken die kunnen worden benut om inzichten te verkrijgen in de pathogenese van klepziekte in preklinische diermodellen. We stellen voor dat het gebruik van een systematische aanpak voor het evalueren van de cardiale en hartklepfunctie bij muizen kan resulteren in robuustere en reproduceerbare gegevens, evenals het faciliteren van de ontdekking van eerder niet opgemerkte fenotypen bij genetisch gemodificeerde en/of fysiologisch gestreste muizen.
Inleiding
Veroudering is geassocieerd met toenemende verhoging van cardiovasculaire verkalking 1. Hemodynamisch significant aortaklepstenose treft 3% van de bevolking ouder dan 65 2, en patiënten met zelfs een matige aortaklepstenose (pieksnelheid van 3-4 m / s) een 5 jaargebeurtenis overleving van minder dan 40% 3. Momenteel zijn er geen effectieve behandeling voor de progressie van aortaklep calcificatie remmen en chirurgische aorta klepvervanging de enige beschikbare behandeling van gevorderde aortaklepstenose 4.
Studies om een dieper begrip van de me....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
1. Bereid de materialen en apparatuur (tabel 1 en figuur 1)
- Zet het echoapparaat. Voer het dier ID, datum en tijd (voor seriële imaging experimenten) en andere relevante informatie.
- Gebruik een hoogfrequente ultrasone transducer, 40 MHz voor imaging muizen minder dan ~ 20 g of 30 MHz voor muizen meer dan ~ 20 g.
- Sluit het platform om het elektrocardiogram (ECG) monitor voor ECG gating van beeldvorming voor bepaalde modaliteiten.
OPMERKING: Kritisch Dit maakt ook de momentane berekening van de hartfrequentie (HR), die kan worden gebruikt als één van de indices van een juiste hoogte van anesthesie. - Verwarm het platform 37....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Voorbeelden van beelden die routinematig worden verkregen uit dierlijke cardiale ultrageluid beeldvorming zijn in dit manuscript. Een illustratie van transducer plaatsing op de borst van het dier wordt verstrekt om de lezer een duidelijk inzicht waar de transducent gepositioneerd om de beelden te verkrijgen zoals beschreven geven. Een foto van de ultrasone laboratorium set-up is ook opgenomen om te benadrukken het belang van de juiste apparatuur, met name de ultrasone transducer te gebru.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Inductie van anesthesie
Goede inductie en instandhouding van anesthesie is essentieel voor nauwkeurige vaststelling van veranderingen in hartklep en hartfunctie in muizen. Gezien de snelle inductie van de anesthesie opgewekt door isofluraan en de relatief lange wash-out tijd van deze verdoving volgende diepe narcose, hebben we geen gebruik maken van een stand-alone anesthesie kamer voor inductie. In plaats daarvan, zoals in detail hierboven dieren rechtstreeks geleid naar de an.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door NIH-subsidies HL111121 (JDM) en TR000954 (JDM).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| High resolution ultrasound machine | VisualSonics, Fujifilm | Vevo 2100 | |
| Isofluraandiffusor (in staat om 1% tot 1,5% isofluraangemengd met 1 L/min 100% O2 te leveren) | VisualSonics, Fujifilm | N/A | |
| Transducers voor kleine muizen (550D) of grotere muizen (400) | MicroScan, VisualSonics, Fujifilm | MS 550D, MS 400 | |
| Dierplatform | VisualSonics, Fujifilm | 11503 | |
| Geavanceerde fysiologische monitoringeenheid | VisualSonics, Fujifilm | N/A | |
| Isofluraan | Terrell | NDC 66794-019-10 | |
| Neuskoker en slang verbonden met isofluraandiffusor en 100% O2 | Op maat gemaakt binnenshuis | -- | |
| Haarscheerapparaat | Andis Super AGR+ vet pack clipper | AD65340 | |
| Ultrasoundgel | Parker Laboratories | REF 01-08 | |
| Elektrodengel | Parker Laboratories | REF 15-25 | |
| Plastertapes | Fisher Laboratories | 1590120B | |
| Papieren handdoeken |
Referenties
- Ngo, D. T., et al. Determinants of occurrence of aortic sclerosis in an aging population. JACC Cardiovasc Imaging. 2, 919-927 (2009).
- Nkomo, V. T. Epidemiology and prevention of valvular heart diseases and infective endocarditis in Africa. ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
