من أجل فهم الفيزيولوجيا المرضية من السكتة الدماغية، فمن المهم استخدام نماذج يمكن الاعتماد عليها. هذه الورقة سوف تصف واحد من النماذج السكتة الدماغية الأكثر استخداما في الفئران، ويطلق عليه نموذج المتوسطة الدماغي انسداد الشريان (MCAo) (كما وصف خيوط داخل اللمعة أو نموذج خياطة) مع ضخه.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نهج الجراحي لانسداد الشريان الدماغي الأوسط وضخه المستحثة السكتة الدماغية في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
السكتة الدماغية هي السبب الرئيسي للوفاة في جميع أنحاء العالم، وتستمر لتكون واحدة من الأسباب الرئيسية للإعاقة الكبار على المدى الطويل. حوالي 87٪ من السكتات الدماغية هي الدماغية في الأصل وتحدث في أراضي الشريان الدماغي الأوسط (مولودية الجزائر). حاليا فقط إدارة الغذاء والدواء (FDA) وافقت المخدرات لعلاج هذا المرض الفتاك هو منشط البلازمينوجين النسيجي (TPA). ومع ذلك، منشط البلاسمينوجين النسيجي لديه نافذة العلاجية صغير لإدارة (3-6 ساعة)، وغير فعالة إلا في 4٪ من المرضى الذين يحصلون عليها بالفعل. يركز البحث الحالي على فهم الفيزيولوجيا المرضية من السكتة الدماغية من أجل العثور على الأهداف العلاجية المحتملة. وهكذا، ونماذج يمكن الاعتماد عليها هي الحاسمة، و(MCAo) نموذج MCA انسداد (تسمى أيضا داخل اللمعة خيوط أو خياطة نموذج) والتي تعتبر نموذج الجراحية الأكثر صلة سريريا من السكتة الدماغية، وهي إلى حد ما غير الغازية واستنساخه بسهولة. وعادة ما تستخدم نموذج MCAo مع القوارض، خاصة مع الفئران بسببإلى كل الاختلافات الجينية المتاحة لهذه الأنواع. نحن هنا وصف (وموجودة في شريط الفيديو) كيفية تنفيذ بنجاح نموذج MCAo (مع ضخه) في الفئران لتوليد بيانات موثوقة وقابلة للتكرار.
المقدمة
السكتة الدماغية هي السبب الخامس للوفاة في جميع أنحاء العالم، مع شخص واحد يموت من المرض كل 4 دقائق. أكثر من 800،000 الاميركيين يعانون من السكتة الدماغية كل عام، وهي ليست مدمرة فقط للمريض، ولكن أيضا لعائلاتهم. السكتة الدماغية هي السبب الرئيسي للعجز الكبار، ويقدر الإنفاق السنوي ليكون في ترتيب 36500000000 $ 1 على الرغم من عدد قليل جدا من خيارات العلاج يجري المتاحة.
منشط بلاسمينوجين النسيجي (TPA) هو الوحيد إدارة الغذاء والدواء (FDA) مرخصة المخدرات للسكتة الدماغية. ومع ذلك، فإنه لا تكون فعالة إلا إذا ما تم إعطاؤها للمرضى في غضون 3-6 ساعات من بداية السكتة ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على هذا البروتوكول والتجارب التي أعلن عنها في شريط الفيديو عن طريق لجنة LSUHSC-S المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام وهم في الامتثال للمبادئ التوجيهية من المعاهد الوطنية للصحة.
ملاحظة: ذكر C57BL / 6 الفئران وزنها 25 - تم استخدام 29 غرام في هذه الدراسة. تم الحفاظ على الفئران على نظام غذائي موحد طعام بيليه مع حرية الوصول إلى المياه، في ظل 12 ساعة دورة الضوء / الظلام في أقفاص التهوية بشكل فردي. سيتم إجراء العملية تحت ظروف معقمة باستخدام تقنيات معقمة (على سبيل المثال، والقفازات المعقمة، أدوات معقمة).
الاستعدادات 1. مرحلة م....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
خضع الفئران 30 دقيقة نقص تروية الدماغ الناجم عن MCAo (الشكل 1)، يليه فترة ضخه (يتم عرض 24 ساعة و 1 أسبوع هنا، ولكن طول ضخه يمكن أن يكون متنوع). كان معدل الوفيات خلال MCAo الحد الأدنى (حوالي 2٪). نقص التروية بعد، كان معدل وفيات (خلال أول 24 ساعة) حوالي 26٪.
تم استخدام الليزر دوبلر flowmetry لتأكيد نضح تدفق الدم في إقليم MCA قبل وبعد.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
منذ بدايته قبل 20 عاما، وقد تم استخدام نموذج MCAo للسكتة الدماغية البشرية التي تنطوي على إدخال خيوط في عدد كبير من الدراسات. ويرجع ذلك أساسا إلى حقيقة أنه يحاكي ما يحدث سريريا في الشكل الأكثر شيوعا من السكتة الدماغية (أي السكتة الدماغية). المخطط هو أكثر حساسية لنقص تروية من قشرة الدماغ، وعلى هذا النحو، فإن طول الفترة الزمنية الدماغية تترجم إلى ما إذا كان كل من المخطط والقشرة الظهرية الوحشية ستتأثر، أو مجرد المخطط. يمكن أن تختلف على حد سواء احتشاء وضخه مرة وفقا لذلك، وهذا .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم تمويل هذا العمل من قبل المعهد الوطني للصحة ، والمعهد الوطني للقلب والرئة والدم (المعاهد الوطنية للصحة و NHLBI; HL125572-01A1) وصندوق بدء تشغيل LSUHSC-S إلى F.N.E. جافينز.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ذكر C57BL / 6 فئران | مختبر جاكسون ، بار هاربور ، ME | # 000664 | |
| الكيتامين هيدروكلوريد | موريس & ديكسون ، شريفبورت ، لوس أنجلوس | 67457-108-10 | |
| Xylazine | Akorn، Inc ، Lake Forest ، IL | NADA # 139-236 | |
| نظام التحكم في درجة الحرارة DC | FHC ، Bowdoin ، ME | 40-90-8D | |
| مسبار ثرمستور المستقيم الصغير | FHC ، بودوين ، ME | 40-80-5D-02 | |
| وسادة تسخين | FHC ، بودوين ، ME | 40-90-2-06 | |
| كليبرز | أمازون ، بلفيو ، واشنطن | # 64800 | |
| 70٪ إيثانول | منتجات طبية في جميع أنحاء العالم ، بريستول ، بنسلفانيا | # 51011023 | |
| تشريح المجهر | أوليمبوس ، سنتر فالي ، PA | SZ40 | |
| مقص قزحية (مستقيم) | أدوات العلوم الدقيقة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا | 11251-20 | |
| ملقط دومون (45 درجة ؛ طرف عازم) أدوات | العلوم الدقيقة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا | 11297-00 | |
| مشبك الوعاء الصغير | أدوات العلوم الدقيقة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا | 18055-05 | |
| مقص زنبركي تشريح دقيق (مستقيم) | أدوات العلوم الدقيقة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا | 14088-10 | |
| مباعدات (حادة) | أدوات العلوم الدقيقة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا | 18200-11 (تستخدم هيلين 17022-13) | |
| أدوات تطبيق قطنية ذات رؤوس | فيشر العلمية ، والثام ، ماساتشوستس | 23-400-100 | |
| إسفنج شاش | Covidien ، Mansfield ، MA | # 9023 | |
| 7-0 خياطة جراحية مضفرة بالحرير | Braintree Scientific ، Braintree ، MA | SUT-S103 | |
| 0.9٪ كلوريد الصوديوم | Morris & amp ديكسون ، ليك فورست ، إلينوي | 0409-4888-20 | |
| 6-0 خياطة MCAO متوسطة (خيوط أحادية مطلية بمطاط السيليكون) | شركة Doccol Corporation ، شارون ، MA | 6023PKRe | |
| Sofsilk 6-0 حرير مضفر مطلي بالسيليكون | Covidien ، مانسفيلد ، ماساتشوستس | SUT-14-1 | |
| كاربروفين | فايزر ، نيويورك ، نيويورك | NADA # 141-199 | |
| Puralube | Dechra ، نورويتش ، المملكة المتحدة | NDC 17033-211-38 | |
| جهاز التحكم في درجة الحرارة Physitemp | جهاز هارفارد ، هوليستون ، MA | TCAT-2AC | |
| مصباح حراري | هارفارد ، هوليستون ، MA | HL-1 | |
| مسبار دوبلر ليزر | AD Instruments ، كولورادو سبرينغز ، كولورادو سبرينغز ، CO | MSP100XP | |
| 24 بئرا | فيشر العلمية ، والثام ، MA | # 353226 | |
| الفوسفات المخزن محلول ملحي (PBS) | Life Technologies ، Carlsbad ، CA | 20012-050 | |
| شفرات حلاقة أحادية الحافة | Fisher Scientific ، Waltham ، MA | 12-640 | |
| 2،3،5-Triphenyltetrazalium chloride (TTC) | Sigma Aldrich ، St. Louis ، MO | T8877-50G | |
| قطاعة مصفوفة دماغ الفأر | Braintree Scientific ، Braintree ، MA | BS-A 5000C | |
| حمام مائي | VWR ، رادنور ، بنسلفانيا | # 182 | |
| 10٪ فورمالين | سيجما ألدريتش ، سانت لويس ، ميزوري | HT501128-4L | |
| برنامج تحليل ImageJ | المعاهد الوطنية للصحة ، بيثيسدا ، دكتوراه في | الطب تنزيل | |
| جهاز | طبي ضام ، نيوكاسل ، كاليفورنيا | MP-740 |
المراجع
- Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129 (3), e28-e292 (2014).
- Marks, M. P., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
