Un protocollo per la misurazione di conduttività elettrica di biofilm microbici viventi in condizioni fisiologicamente rilevanti è presentato.
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Articolo metodologico
Un protocollo per la misurazione di conduttività elettrica di biofilm microbici viventi in condizioni fisiologicamente rilevanti è presentato.
Qui dimostriamo che il metodo di gating elettrochimico utilizzato per caratterizzare la conduttività elettrica di biofilm microbici elettrodo-coltivate in condizioni fisiologicamente rilevanti. 1 queste misurazioni vengono eseguite su biofilm vivente in mezzo acquoso utilizzando origine e scarico elettrodi modellati su una superficie di vetro in una configurazione specializzata indicata come un array di elettrodi interdigitating (IDA). Un biofilm è coltivato che si estende attraverso il gap che collega la fonte e scolo. I potenziali sono applicati agli elettrodi (ES ed ED) generando una corrente di fonte-scarico (ISD) attraverso il biofilm tra gli elettrodi. La dipendenza della conducibilità elettrica sul potenziale del cancello (la media delle potenzialità di source e drain, EG = [ED + ES] / 2) è determinata sistematicamente cambiando il cancello potenziale e misurando il conseguente drenaggio di origine corrente. La dipendenza della conducibilità sul cancello potenziale fornisce meccanicistici informazioni sul processo di trasporto extracellulare dell'elettrone sottostante la conduttività elettrica del biofilm specifico sotto inchiesta. Il metodo di misurazione gating elettrochimico qui descritto si basa direttamente su quello utilizzato dal M. S. Wrighton2,3 e colleghi e R. W. Murray4,5,6 e colleghi in il 1980 è indagare su polimeri conduttivi a film sottile.
Extracellulare di trasporto dell'elettrone (EET) è un processo che consente alcuni microrganismi per il trasporto di elettroni tra processi metabolici intracellulari e insolubile accettori o donatori che risiedono all'esterno della cella, che vanno da minerali naturali per elettrodi. In alcuni casi, EET consente microrganismi formare elettricamente conduttivo della multi-cellula spesse biofilm su superfici di elettrodo, in cui le cellule non a diretto contatto con l'elettrodo possono utilizzare ancora come un ricettore dell'elettrone metabolica o donatore. C'è un notevole interesse in tali biofilm come catalizzatori di elettrodo per varie applicazioni, come elettrosin....
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1. preparazione di interdigitating microelettrodo matrice (IDA)
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IDAs erano cablata, isolate e testate per garantire che i due elettrodi erano elettricamente isolati da altro (Figura 1). Reattori sono stati assemblati, inoculati con g. sulfurreducense incubate fino a quando un biofilm colmato il divario tra gli elettrodi. Il biofilm di g. sulfurreducens può essere visto visivamente per coprire la matrice. Altri biofilm possono richiedere al ricercatore di fare un gating misure elettrochimiche per vedere s.......
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Durante l'installazione di IDA, è fondamentale per verificare che l'origine e lo scarico non sono corto insieme prima misure elettrochimiche di Gate, come questo altererà ISD vs curva EG e potrebbe portare a interpretazioni e risultati errati. È anche fondamentale per selezionare VSD e v tale che la corrente è linearmente dipendente da VSD e indipendente di v. Se questo non è il caso, le equazioni descritte sopra non possono essere utilizzate per calcolare la conduttività.
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Gli autori non hanno nulla a rivelare.
M.D.Y, S.M.G-S. e LMT riconosce l'Office of Naval Research (premio #N0001415WX01038 e N0001415WX00195), il laboratorio di ricerca navale e l'Istituto di Nanoscienze di laboratorio di ricerca navale; M.Y.E.-N. è supportato da l'US Dipartimento di energia Grant DE-FG02-13ER16415.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| IDAs | CH Instruments | 012125 | Prodotto da ALS-Japan; venduto da CH Instruments |
| Filo Digikey | W7-ND | ||
| Argento conduttivo epossidico | Microscopia elettronica scienze 12670-EE | ||
| Materiale isolante | 3M | 2131-B | Composto ritardante di fiamma Scotchast |
| 15 mL provetta da centrifuga conica | VWR | 89004-368 | |
| ago da 21 g | VWR | BD-305165 | |
| puntali per pipette da 5 mL | VWR | 82018-842 | |
| pipettatore da 5 mL | VWR | 89079-976 | |
| Componenti del mezzo d'acqua dolce | Sigma Aldrich | Tutti i prodotti chimici | |
| Cloruro | |||
| Sodio fosfato monobasico | |||
| Bicarbonato | |||
| Componenti medi artificiali per acqua di mare | Sigma Aldrich | Tutti i prodotti chimici | |
| Cloruro di | |||
| Cloruro di magnesio esaidrato | |||
| Solfato di magnesio eptaidrato | |||
| Cloruro di | |||
| Bicarbonato | |||
| Cloruro di calcio diidrato | |||
| Cloruro | |||
| Elettrodo | |||
| Basi | MF-2079 | ||
| Controelettrodo a barre in grafite | Microscopia elettronica | scienze 70230 | |
| Bagno d'acqua a ricircolo | Thermo Scientific | 152-5256 | |
| Bipotenziostato | Pine Instruments | WD-20 | http://www.voltammetry.net/pine/aftermath/user |
| Ancorette | VWR | 58947-114 | |
| G. sulfurreducens coltura | ATCC | 51573 | |
| Reattore incamiciato | Pine Instruments | RRPG085 |
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