Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Minimalinvasiva Tvär Aorta Förträngning i möss

Published: March 14, 2017 doi: 10.3791/55293

Summary

Minimalt invasiv tvär aorta sammandragning (MTAC) bevarar det väsentliga i vanliga tvärgående aorta sammandragning (TAC) samtidigt som man eliminerar användningen av en ventilator med intubation. Det visar sig vara en mycket önskvärd metod för hög genomströmning studier på vänsterkammar överbelastning, särskilt i translationella studier.

Abstract

Minimalt invasiv tvär aorta sammandragning (MTAC) är en mer önskvärd metod för sammandragning av den tvärgående aorta hos möss än standard öppen kista tväraorta sammandragning (TAC). Även tvär aorta sammandragning är en mycket funktionell metod för induktion av högt tryck i vänster kammare, är det en svårare och långdragen process på grund av dess användning av artificiell ventilation med intubation. TAC är ofta också mindre överleva, eftersom de nyare metod, MTAC, varken kräver skärning av revbenen och interkostal muskler eller intubation med en ventilationsinstallationen. I MTAC, i motsats till en torakotomi för att komma åt till brösthålan, är aortabågen nås genom en mittlinje incision i främre halsen. Sköldkörteln dras tillbaka för att avslöja den sternala notch. Bröstbenet skärs sedan ner till den andra revbenet nivå och aortabågen nås helt enkelt genom att separera den bindväv och tymus. Fråndär kan en sutur lindas runt bågen och bundna med ett distans, och sedan sternala snitt och huden kan stängas. MTAC är en mycket snabbare och mindre invasiv metod för att inducera vänsterkammar hypertoni och möjliggör möjligheten för hög genomströmning studier. kan verifieras Framgången för förträngningen med hjälp av högfrekvent trans-bröstkorg ekokardiografi, särskilt färgdoppler och pulserande våg Doppler, för att bestämma flödeshastigheter av aortabågen och vänster och höger halspulsåder, dimensionen av blodkärlen, och vänsterkammarfunktion och morfologi. En framgångsrik sammandragning kommer också utlösa betydande histopatologiska förändringar, såsom hjärtmuskelcell hypertrofi med interstitiell och perivaskulär fibros. Här är förfarandet i MTAC beskrivits, vilket visar hur de resulterande flödesförändringar i halspulsåder kan undersökas med ekokardiografi, grov morfologi och histopatologiska förändringar i hjärtat.

Introduction

Det övergripande syftet med denna artikel är att visa hur tvär aorta sammandragning (TAC) i möss kan modifieras för att producera en enklare och mer ändamålsenligt kirurgi. TAC infördes först 1991 en och aktiverat molekylärbiologer för att studera de cellulära och molekylära vägar som leder till hypertrofi i vänster kammare och hjärtsvikt, särskilt i små djur med manipulerade genomen 2, 3, 4, 5, 6. Trots sin effektivitet vid framställning av den önskade trycket överbelastning, är tekniken i slutändan begränsas av svårigheten att utföra proceduren och dess låg överlevnad. En kirurg genomför TAC måste kunna utföra endotrakeal intubering, torakotomi, och använda artificiell ventilation för att förhindra lungkollaps 1.

innehåll "> Ofta är en enkel och mindre invasiv metod önskas. Som en följd av minimalinvasiv tvär aorta sammandragning (MTAC) uppfanns 3. Även om resultatet (specifikt, vänsterkammarhypertrofi) är densamma, det förfarande innebär betydligt färre apparater och mindre skada på djuret. MTAC visar sig vara en önskvärd metod som har en större överlevnadsgrad, över 90%, och har en drifttid på endast 15 till 25 minuter. de enstaka fall av död efter lyckad operation kan hänföras till alltför -tight sammandragning av aortabågen, vilket resulterar i en enorm vänsterkammar överbelastning och dödlig minskning av blodtillförseln till kritiska organ, såsom njurarna.

Efter ingreppet har slutförts, kan ekokardiografi användas för att utvärdera framgången med bandning och hjärt morfologi och funktion. En högfrekvent ultraljudssystem kan utnyttjas för att mäta diametern och flödesförändringar i den vänstra och högrahalspulsådrorna, för att visualisera aortabågen sammandragning för toppmätningar flödeshastighet, och för att bestämma den vänstra ventrikeln väggtjocklek och funktionella parametrar 7, 8. Efter eutanasi, kan organen också samlas in för histopatologiska studier med hematoxylin och eosin-färgning och Picrosirius kollagenfärgning, varvid den senare är speciellt användbart för observation av fibros.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Protokollet följer de riktlinjer från utskottet för användning av levande djur i undervisning och forskning (CULATR) vid University of Hong Kong.

1. Drift Site Preparation

  1. Desinficera operationsstället med 75% isopropylalkohol. Justera värmedyna temperaturen till 37 ° C för att undvika förändringar i hjärt och respirationshastigheter i ämnet djuret.
  2. Använda kirurgiska instrument steriliserade i en gravitationsförskjutnings sterilisator vid 121 ° C under 30 min eller genom andra lämpliga metoder.
  3. Ta 2 - 4 30-gauge nålar och kurvan dem med en nålhållare, såsom framgår av fig 1, för att göra ett verktyg för ligering och vävnadsseparation och för användning som en sårhake. Montera numera krökt nål på en bomulls applikator för användning inom kirurgin.
  4. Blunt en 27-gauge nål och kurvan den 90º med nålhållaren. Smooth spetsen genom att gnida en hård yta för att göra en 0,4 mm spacer i ligeringssteg.

  1. Söva en två månader gammal, manlig, 22-25 g C57BL / 6N mus med en lämplig ketamin och xylazin blandning i förhållande till kroppsvikten: 100 mg / kg + 10 mg / kg ip Bekräfta anesthetization med den negativa svansen nypa reflex .
  2. Ta bort hår på den främre hals och bröst med en 2- till 3-min tillämpning av hårborttagningskräm. Ta bort krämen med varmt vatten och en bomull applikator.
  3. Applicera oftalmisk salva eller gel för ögonen på djuret för att förhindra uttorkning av hornhinnan.
  4. Placera djuret på en värmedyna i ryggläge och genomföra intra-operativ kontroll, att se till att bevara sådan dokumentation vid varje 15-minuters intervall.
  5. Använda kirurgisk papper tejp för att fästa benen till värmedynan för att hålla djuret i rätt läge under operationen.
  6. Desinficera huden växelvis med alkohol och povidon-jodlösning tre gånger.
  7. Använd en steril drapa med en exponerad operation fält för att förhindra kontaminering. Använd nya sterila handskar för varje mus och vid behov.

3. Ligering ordningen

  1. Öppna huden på musen vid mittlinjen läget för hals och bröst med en skalpell.
  2. Dra sköldkörteln mot huvudet genom att försiktigt separera bindväv med trubbiga saxen.
  3. Separera muskellagret på luftstrupen vid mittlinjen mot båda sidor med böjda nålar.
  4. Med användning av de trubbiga saxar, skär bröstbenet till den andra ribban (cirka 5 mm). Öppna snitt med ett upprullningsdon eller böjda pincett.
  5. Separera bräss lober från varandra och den nedre bröstkorgen genom att separera bindväv med böjda nålen; den tvärgående aortabågen och båda halspulsådrorna kommer att vara klart synlig vid denna punkt.
  6. Placera den böjda nålen under bågen och perforera mellan kärlväggen och bindväv på den andra sidan av pusHing den krökta huvudet.
  7. Använda den krökta nålen, dra 6-0 monofilamentsutur under aortabågen.
  8. Placera hylsa i slingan och fixera suturen på plats med en dubbel-knut. Ta bort distans försiktigt.
  9. Bekräfta en framgångsrik sammandragning med knuten läge och skär ändarna av suturen.
  10. Stäng bröstkorgen med hjälp av 6/0 siden sutur med en enkel avbruten sutur mönster. Stänga huden med en 6/0 monofilamentsutur i en kontinuerlig sutur mönster.

4. postoperativ vård

  1. Applicera povidon-jodlösning till suturstället och placera djuret i en förvärmda bur för återhämtning och postoperativ övervakning.
  2. Injicera buprenorfin (0,05-0,1 mg / kg sc varje 12 timmar) efter det att djuret har återfått medvetandet för att lindra smärta och ge musen med lämplig mjuk mat.
  3. Tillbaka djuret till en 12-h ljus / mörker-cykel rum efter full återhämtning.

5.Ekokardiografi: Bekräftelse av Framgångsrik Ligation och mätningar

  1. Efter en vecka, söva tidigare banded mus med 3-5% isofluran, för induktion, och 1-1,5%, för underhåll, med en 1 L / min syreflödeshastigheten.
  2. Ta bort brösthår använder hårborttagningskräm. Noggrant bort krämen med varmt vatten och en bomull applikator.
  3. Säkra musen i liggande ställning till djuret hanteringsplattform, som hölls vid 37 ° C. Applicera elektrodgel till tassarna och tejpa fast dem på dynan med elektroder.
  4. Applicera ultraljud gel till musen bröstet. Med en 40-MHz MS550D sond och en högfrekvent ultraljudssystem, utför färgdoppler och pulsad-våg Doppler skanning på de vänstra och högra halspulsåder, såväl som på aortabågen.
  5. Med B-läge, lokalisera den vänstra kammaren. Med M-läge kan det systoliska och diastoliska väggtjocklek mätas. Använd Cine Store och ramminnet för att spara data och bilder efter behov.
  6. Usjunga B-läge, lokalisera den vänstra gemensamma halsartären före förgreningspunkten. Använd pulsad våg och färgdoppler för beräkning av flödet. Upprepa med högra halspulsådern på en liknande punkt. Spara bilderna i Cine Store och ramminnet lägen för att analysera senare.
  7. Luta djurhantering plattform längst till vänster så att musen är i den vänstra trycksår ​​positionen. Placera sonden på musen, 30 ° förskjutna från ett läge parallellt med huvudet vid parasternal positionen, och manipulera X och Y för att hitta aortabågen.
  8. Leta förträngningen. Använd färgdoppler läge för att göra platsen för förträngningen mer synlig, eftersom blod kommer att flöda genom en smal kanal mellan den punkt där båda halspulsådrorna gren ut från aortabågen.
  9. Använd pulsad våg och färgdoppler för att mäta toppflödeshastigheten. Använd Cine Store och ramminnet för att spara data och bilder efter behov.
  10. Göra det möjligt för djuret att återhämta på en värmedyna i framstupa läge.Tillbaka djuret till den ursprungliga bur i en 12-h ljus / mörker-cykel rum efter att den har återhämtat sig helt från anestesi.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

MTAC möjliggör induktion av betydande hypertoni i vänster kammare i tid.

Såsom framgår av fig 1, är framställningen av de primära verktyg för proceduren enkel och minimal och kräver endast 2-4 30-gauge nålar som skall böjas och hållas på plats med en polyuretan-rör. Det kirurgiska ingreppet i sig är också mindre komplicerad, i jämförelse med TAC, och kan utföras enkelt. När sköldkörteln har dragits tillbaka, är bröstbenet skärs och bräss flyttas för att rensa vyn. Aortabågen är lätt placerbar för ligeringen processen (Figur 2).

MTAC tillförlitligt producerar vänstra ventrikulära trycket överbelastning i ligerade möss. Figur 3 illustrerar detta tydligt, som en förträngd tvär aorta kan tydligt observeras i figur 3C, som well som en ökad toppflödeshastighet genom förträngningen plats i 3D. Detta kan jämföras med den skenopererade mus, ses i fig 3A och 3B, som inte uppvisar någon sammandragning med normala toppflödeshastighet. Som en konsekvens av ligeringen visas i fig 4C, är flödeshastigheten ökade signifikant i den högra halsartären, och trycket kan bygga upp aorta ascendens och i hjärtat för att producera vänster ventrikulär hypertrofi. Men som en följd av uppströms sammandragning, strömningshastigheten reduceras signifikant i den vänstra gemensamma halspulsådern, såsom i figur 4D. Å andra sidan, är nästan identisk karotidartären blodflödet observerades i skenopererade mus, som i figur 4A (högra karotidartären) och 4B (vänster halspulsådern).

Den resulterande hypertrofi relaterade parameterns och överlevnadskurvan lätt observeras i figur 5, där kan observeras hjärtat av MTAC-ligerade musen för att vara betydligt förstorad och deformerade. Detta är bara ytterligare ses på cellnivå, såsom demonstreras i fig 6A och 6B, som uppvisar ett utvidgat hjärtat av den MTAC manövrerad mus jämfört med skenopererade mus. Vad som kan vidare observeras är den ökade hjärtmuskelcellstorlek och fibros i MTAC möss (figur 6D, 6F, och 6H) jämfört med icke-ligerade möss (Figur 6C, 6E och 6G).

Sedan MTAC kan verifieras genom en högfrekvent ultraljudssystemet, kommer inte att lyckas tygla aortabågen avslöjas av en brist på en synlig sammandragning av den tvärgående aorta i den tvådimensionella ekokardiografi, som i figur 3B 3D. Detta kan verifieras ytterligare med de pulsade-våg- och färgdoppler lägen, bör en framgångsrik förträngning demonstrerar en högre strömningshastighet i den högra karotisartären och reducerad flödeshastighet i den vänstra halspulsådern (figur 4C och 4D).

Figur 1
Figur 1: Process för att forma den önskade Needle Krokar genom böjning av en 1-i, 30-gauge nålspetsen. A) Den ursprungliga en-in, 30-gauge nålspets. B) Ta tag i nålspetsen med nålhållaren och böj ungefär halvvägs längs dess längd. Böja nålen till en slinga, med hjälp av nålhållaren och i händerna, om så behövs, för att bilda slingan avbildas i det övre högra hörnet av figuren. C) Täck nålen med en polyuretanröret för att hålla den böjda segmentet på plats. D) Användanålhållare, böja spetsen av öglan till den önskade formen. I detta fall, en nålspets med två 45 - har 60 ° krökar visats för illustrativa ändamål. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 2
Figur 2: Processen att ligera de tvärgående aortabågen. A) Den aortabågen syns tydligt. B) Med hjälp av nämnda krok nål, separera aortabågen från den närliggande bindväv. C) Med användning av det fångade nålen, guide suturen enligt aortabågen, och med användningen av ett distansorgan, knyta en sammandragning av den önskade diametern. D) Färdig ligering. pl lätta klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 3
Figur 3: Färg och Pulsed-våg Doppler ultraljud Imaging från aortabågen av Ligerat och icke-ligerade möss. A) Color Doppler avbildning av aortabågen av en icke-ligerad mus. De båda halspulsådrorna syns tydligt, liksom avsaknaden av en förträngning mellan dem. B) Aortatoppflödeshastigheten hos en icke-ligerad mus. C) Color Doppler avbildning av aortabågen av en ligerad mus. Förträngningen mellan de båda halspulsådrorna på aortabågen är synliga (gula pilar). D) Peak flödeshastigheten vid förträngningen stället. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

innehåll "fo: keep-together.within-page =" 1 "> figur 4
Figur 4: Pulsed-våg doppler från vänster och höger halspulsåder av Ligerat och icke-ligerade möss. A) Pulsed-våg Doppler avbildning av vänstra halsartären hos en icke-ligerad mus. B) Pulsed-våg Doppler av den högra halsartären hos en icke-ligerad mus. Det är anmärkningsvärt att hastigheten för blodflödet är nästan identisk med den hos den vänstra halspulsådern. C) pulsad våg Doppler av den högra halspulsådern av en mus med en förträngning på aortabågen. Blodhastigheten avsevärt ökat på grund av förträngning nedströms ingången till vänster halspulsådern. D) Pulsed-våg Doppler av den vänstra halsartären hos en mus med en förträngning på dess aortabågen. Blodflödet hastigheten minskas betydligt på grund av förträngning uppströms till införandet avden vänstra karotisartären. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 5
Figur 5: hjärthypertrofi och relaterade parametrar med en överlevnadskurvan från tre veckors ligerades och icke-ligerade möss. A) Hjärtat från en tre månader gammal mus utan tvärgående aorta sammandragning. Hjärtat är friskt och av en normal form, utan omedelbart uppenbara sjukdomar. B) Hjärtat av en tre månader gammal mus som genomgick MTAC för 3 veckor. Lägg märke till klart missbildade karaktär hjärtat på grund av vänsterkammarväggen utvidgningen. Ligeringen på aortabågen är också synlig. C) Ett tvärsnitt av hjärtat av en tre månader gammal icke-ligerade mus. D) Ett tvärsnitt av hjärtat av en 3månaders gammal mus som genomgick tväraorta sammandragning i 3 veckor. Utvidgningen av vänster kammare syns tydligt. Hjärtat i allmänhet också förstoras på grund av det vänstra ventrikulära trycket överbelastning orsakas av MTAC. E) Hjärtat till kroppsvikt förhållande ökar signifikant hos möss bandade i 3 veckor. F) Den tibia bone längdförhållande hjärta-till-vänster ökar signifikant i möss banded under 3 veckor (*, p <0,05; **, p <0,01; ***, p <0,001). G) Överlevnad kurva för en tre veckor lång experiment (MTAC = 12 och SHAM = 12). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 6
Figur 6: Histologisk Slides av Mouse Heart. A) Ett tvärsnitt av en sham manövrerad mus hjärta. B) Ett tvärsnitt av ett hjärta MTAC-ligerades under 3 veckor, med en förtjockad vänsterkammarväggen och delvis fibros. Den totala hjärta storlek ökar också. C) Längdsnitt av hjärtmuskelfibrerna från en skenopererade mus. D) längdsnitt av hjärtmuskelfibrerna från en MTAC-ligerade mus. Cellerna förstoras avsevärt, vilket framgår av deras ökade diameter, medan kärnan har förblivit samma storlek. E) Tvärsnitt av muskelfibrer från en skenopererade mus. F) Tvärsnitt av hjärtmuskelfibrerna från en MTAC-ligerade mus. Cellerna förstoras på grund av trycköverbelastning som resultat av den MTAC. G) Kranskärl från en skenopererade mus färgas med Picrosirius Red för kollagen. H) Kranskärl från en MTAC-ligerade mus. En betydande del av kollagen vävnad observeras around den dilaterade blodkärl, som indikerar perivaskulär fibros på grund av trycköverbelastning i kranskärlen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Rockman och kollegor devised den första metoden för aorta banding som en metod för att studera trycköverbelastning i hjärtat. Detta gjorde det möjligt forskning för att börja att avslöja de cellulära och molekylära effekterna av hypertoni och hjärtsvikt 1. En förbättrad metod, minimalinvasiv tvär aorta sammandragning (MTAC), ger en mottaglig, tidsberoende metod för induktion av vänstra ventrikulära trycket överbelastning och hjärtsvikt, utan nackdelarna med den konventionella tvärgående aorta sammandragning 9. Själva förfarandet kan utföras betydligt lättare och med ökad överlevnad jämfört med TAC. Den största fördelen med denna metod är att den möjliggör utförandet av aorta sammandragning experimentet, men med betydligt mindre utrustning, kirurgisk skicklighet och operationstiden för samma eller ett bättre resultat.

Den öppna bröst metod TAC förfarande gör det möjligt greater tillgång och en bättre överblick över helheten av hjärta och kärl. Den potentiella fördelen är att det lätt kan genomföras i kombination med andra förfaranden, såsom utförandet av lungartär sammandragning för höger ventrikulära trycket överbelastning eller kransartärligering för ischemiska tillstånd samtidigt som aortabågen banding är gjort. Omvänt är minimalt invasiv metod inte lämplig för något annat än stigande eller tvärgående aortabågen sammandragning.

Det är anmärkningsvärt att denna metod har anpassats och modifieras på en mängd olika sätt. I vissa fall har användningen av titan klipp istället för en sutur för att tygla aorta ansetts lämpligare med tanke på att det är en experimentell tillstånd som är lätt reproducerbar: banden kan inte glida ut som de kan i standard TAC och MTAC procedurer som involverar suturer 6. I händelse av att, när de testas med den högfrekventa ultraljudssystem,ett stort antal möss har inte lyckats ligeras under försöket, ytterligare praktik som krävs. Kanske tillämpningen av de tidigare nämnda titan klipp kan förbättra resultaten av kirurgi 6.

När de utför experimentet, är det viktigt att suturen runt aorta är inte för hårt. Det kan skada aortan eller orsaka en livsfarlig minskning av blodflödet till resten av kroppen, inklusive de kritiska organ, såsom njurarna. Care måste också vidtas för att vara varsam när man använder den böjda kroken för att separera aorta från omgivande bindväv och kärl, eftersom det kan skada lungvenerna och andra fartyg och kan leda till livshotande blodförlust. Brösthålan har negativ och den yttre miljön har positivt tryck. I detta förfarande, även om bröstväggen skars upp från bröstbenet och aortabågen ades banded, brösthålan och undertryck miljö var intakta. Om det fanns accidental skador och insidan undertryck ändrades, lungorna skulle ha kollapsat, och djuret skulle ha dött omedelbart, eftersom det skulle ha funnits någon övertrycksventilation. Vanligtvis kan proceduren på ett betryggande sätt inom 30 minuter, även med dålig prestanda, om det inte finns någon livshotande skador. Postoperativ vård är också kritisk, eftersom trycket kan minskas om djuret är uttorkad, eller djuret kan svälta på grund av smärta och svårighet att nå maten. Lättillgänglig mjuk mat, smärtstillande medel, och rehydrering är avgörande för återvinning, liksom för ett lyckat resultat.

Den efterföljande användning av ultraljudssystem, särskilt färgdoppler läge, möjliggör visualisering av den tvärgående aortabågen, den framgångsrika sammandragning, och effekterna av MTAC. Ultraljudssystemet möjliggör mätning av flödeshastighet i halsartärer, av tjockleken av artärväggarna, och av morfologin hos den vänstra ventrikeln.Särskilt bör förhållandet av flödeshastigheter i normala eller skenopererade möss vara ungefär 1 10. Toppflödeshastigheten i förträngningen plats kan användas för att beräkna den tryckgradienten med användning av modifierad Bernoullis ekvation (4 x Vmax 2) för en tillförlitlig parameter som den karotiska förhållandet. Det är värt att notera att under ekokardiografi, måste det kroppstemperatur och hjärtfrekvens hållas så nära som möjligt till det normala fysiologiska området och bör vara densamma mellan djur för att producera jämförbara datapunkter 10.

Varierande nivåer av sammandragning kan härledas från olika erfarenheter nivåer av aktörer och kan avsevärt påverka den erhållna morfologi. För att få tillförlitliga resultat, kontroll framgångsrik sammandragning med tryckgradient nivåer och endast med hjälp av möss inom vissa gränser, till exempel en tryckgradient mellan 40-80 mmHg, är viktigt. När det är möjligt, högfrekvent echocardiography bör användas för bekräftelse och urval djur kriterier för att uppnå enhetlighet i studieresultat. Emellertid är ekokardiografi inte nödvändigt för MTAC själva metoden.

Om högfrekventa ekokardiografi inte är tillgänglig, kan verifieras framgångsrikt sammandragning med hjärtvikt och relativa förhållandena och med den histopatologiska studien vid slutet av experimentet. Den framgångsrika sammandragning kommer att öka mager hjärtvikt och det relativa förhållandet till kroppsvikt och vänster skenben benlängd. På samma sätt kan även observeras hjärtmuskelcell hypertrofi och både interstitiell och perivaskulär fibros hos framgångsrikt ligerade möss. Denna tre veckor långa experimentet är endast avsedd att inducera hjärthypertrofi, men inte för att orsaka ett misslyckande. Hjärt utvidgning och hjärtsvikt vanligtvis in efter 6 - 8 veckor eller senare.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Vi skulle vilja erkänna University Research Facility i Life Sciences (ULS) av Hong Kong Polytechnic University för tillhandahållande av Vevo 2100 ultraljudssystemet. Ett särskilt tack till Dr. Chunyi Wen från Interdisciplinary Avdelningen för medicinsk teknik, Hong Kong Polytechnic University, för träning och underlättande. Detta arbete stöddes av HK regering RGC Grant GRF 17127215, 764.812 och HKU6 / CRF / 11G till Billy KC Chow.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1 inch 30 Gauge Needles BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  305128 Curved as in the procedure and Figure 1
27 Gauge Needle BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  301629 Make blunt and smooth for spacer
6/0 Dafilon B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0933066
6/0 Silkam B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0762067
Sterile gloves A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong.
Cotton Applicator Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. Local Shopping Center
Depilatory Cream Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong Local Shopping Center
Lexer-Baby Scissor FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 14078-10
Curved Iris Forcep FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 11065-07
Micro Olsen-Hegar Needle Holder WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  501989
Stereo Micrioscope WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  PZMIII-BS
GenTeal Eye Gel Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA.  Local Pharmacy
Heating Pad Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA.  DCT-20
Surgical tape Laboratory Animal Unit
Ketamine and Xylazine Laboratory Animal Unit
Betadine Laboratory Animal Unit
Buprenorphine Laboratory Animal Unit

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. J Vis Exp. (38), (2010).
  3. Hu, P., et al. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285 (3), H1261-H1269 (2003).
  4. Shimizu, I., et al. Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents. J Clin Invest. 120 (5), 1506-1514 (2010).
  5. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).
  6. Zhang, X., et al. A modified murine model for the study of reverse cardiac remodelling. Exp Clin Cardiol. 18 (2), e115-e117 (2013).
  7. Hartley, C. J., et al. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).
  8. Scherrer-Crosbie, M., Thibault, H. B. Echocardiography in translational research: of mice and men. J Am Soc Echocardiogr. 21 (10), 1083-1092 (2008).
  9. Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: reduced peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J Thorac Cardiovasc Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
  10. Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. J Vis Exp. (112), (2016).

Tags

Medicin musmodell minimal tvärgående aorta banding hjärthypertrofi fibros ekokardiografi Doppler imaging
Minimalinvasiva Tvär Aorta Förträngning i möss
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. More

Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K. W., Chow, B. K. C. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (121), e55293, doi:10.3791/55293 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter