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방법 논문

측정 및 모델링 수축성 건조 인간의 각질층에

6.3K 조회수

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DOI:

10.3791/55336

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2017년 3월 1일

이 논문에서

요약

이 문서 공간적 엘라스토머 기판에 부착 된 원형 조직 샘플의 면내 건조 변위를 측정함으로써 확인할 동적 건조 거동 및 각질층의 기계적 특성을 정량화하는 방법을 설명한다. 이 기술은 건조 티슈 기계적 특성을 변경하는 방법을 다른 화학 처리 측정하는데 사용될 수있다.

초록

각질층 (SC)는 가장 표피 층이다. 외부 환경과의 접촉이 조직 층이 모두 클렌징 에이전트 및 주변 수분의 일일 변동에 노출되는 것을 의미한다; 이는 모두 조직의 수분 함량을 변경할 수있다. 심각한 장벽 기능 장애 또는 습도가 낮은 환경에서 수분 함량의 감소는 SC 강성을 변경 및 건조 스트레스의 축적을 일으킬 수 있습니다. 극한의 상황에서, 이러한 요인은 조직의 기계적 파열의 원인이 될 수 있습니다. 우리는 건조시 SC의 기계적 특성의 동적 변화를 정량화하는 고효율 방법을 확립했다. 이 기술은 건조 행동 변화 및 화장품 클렌저 및 로션 트리트먼트 SC의 기계적 특성을 정량화하기 위해 이용 될 수있다. 이것은 엘라스토머 기판에 부착 된 원형 조직 샘플의 공간 분해 면내 건조 변위의 동적 변화를 측정함으로써 달성된다. 면내 방사상 변위 ACQ건조시 uired은 방위각 평균 선형 탄성 수축력 모델에 기초하여 프로파일이 장착되어있다. 건조 스트레스와 SC 탄성률의 동적 변경 후 피팅 모델 정보로부터 추출 할 수있다.

서론

가장 외부 표피 층 또는 각질층 (SC)의 지질 풍부 매트릭스 (1, 2)에 의해 둘러싸여 응집 각질 세포의 세포로 구성된다. SC의 조성 및 구조적 무결성 미생물 침입을 방지하며, 기계적 힘 과도한 수분 손실 (4) 모두 정확한 저항 배리어 기능 (3)를 유지하기 위해 필수적이다. 유지 또는 피부 보호막 기능을 저하 퍼스널 케어 제품의 용량은 피부 건강 및 화장품 산업 5 중대한 관심사이다. 퍼스널 케어 제품의 일 출원은 SC 6, 7, 8의 기계적 특성을 변경하는 것으로 알려져있다. 예를 들어, 화장품 세정제에 포함되는 계면 활성제는 상당한 탄성률의 증가와의 축적을 일으킬 수조직의 성향을 증가 SC에서 건조 응력, 9, 7 균열합니다. 거의 모든 화장 용 보습제에 함유 글....

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프로토콜

면제 승인 (3002-13)는 CFR 46.101 (45)의 (b) (4) 부여했다, 드 식별 보건부에 따라 조직 샘플 복지부 규정을 사용하여 연구를 수행합니다. 전층 피부 과목 수술로부터 수신된다. 이 기사에서는 조직 소스는 66 세의 백인 여성 유방이다.

엘라스토머 코팅 Coverslips는 1. 준비

  1. 20 mL 유리 바이알에, 5.893 g의 염기 실 가드 184 경화제의 0.107 g을 혼합한다. 총 혼합물의 질량은 (55)의 에이전트 비율을 경화에베이스 6g : 1입니다.
  2. 균일 성을 보장하기 위해 유리 막대로 혼합 한 후, 모든 기포를 제거하는 진공 탈기 실과 상기 유리 바이알을 놓는다.
  3. 스핀 코터의 중심에 유리 커버 슬립 (55mm X 25mm)을 놓는다. 커버 슬립의 중심에 혼합물의 ~ 1 ML을 추가합니다. 가위로 잘라 끝으로 5000 μL 피펫을 사용합니다. 스핀 코팅 (60)의 2,000 rpm에서 커버 슬립.
    1. 이 페이지를 반복로웠 5-6 기판을 만들 수 있습니다.
  4. 60 ° C에서 12 시간 동안 오븐에서 커버 슬립을 치료.
  5. 부분적으로 희생 기판으로부터 엘라스토머 필름을 제거하는 면도날을 사용한다.....

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결과

도 1 (a) 형광 비드 (3 부)로 코팅 SC 샘플의 대표적인 형광 화상을 도시한다. 샘플의 상응하는 투과광 화상 (b)로 인해 샘플의 원형 대칭으로 25 % RH에서 16 시간 건조 후에 형성 공간 분해 건조 변위 떨림 플롯 겹쳐 1도에 도시되며,이 변위는 방위각 될 수 평균. 그림 1의 (c) 및 방위각 (U θ, 파란색 파선) 변위 프로파일은 차원 반경 위치, R / R에 대해 도시 (u는 R, 고체 레드 라인) 반경을 보여줍니다. 여기서, R은 R / R = 0 에지를 나타내며 샘플 중심 및 R / R = 1을 나타내고, 평균 SC 시료 반경을 나타낸다. 각 반경 위치에서의 표준 편차가 평균 주위에 음영 영역에 의해 표시된다. 이러한 변동은 주로 SC (3)의.......

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토론

이 문서에서는 동적 건조 동작과 인간 SC의 기계적 성질을 측정하는데 사용될 수있는 기술을 설명한다. 이전의 연구는 이러한 기술은 일반적 SC (7, 8)의 동적 거동에 건조 화장품 클렌저 및 보습제로 사용되는 환경 조건 및 화학 제품의 영향을 정량화하는데 사용될 수 있다는 것을 증명하고있다. 프로토콜의 주요 단계가 있습니다. 우선, SC 물 함량, 특히 팽윤; 따라서, SC 두께뿐만 아니라 면내 변위 측정 정밀도 탄성률 예측 스트레스 정도 건조 필수적이다. 둘째로, 시료가 완전히 기판에 부착 할 필요가있다. 그들은 매우 건조 변형의 분포에 영향을 미칠 것이며, 반경 방향 변위 정보를 사용하기 때문에 불완전한 접착, 비 방사상 대칭 샘플 또는 작은 구멍이나 눈물 시료 피해야모델 피팅 라.

조습 장치를 사용할 수없는 경우,이 기술이 사용될 수있다. 환경 제어하지 않고, 조직.......

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공개 사항

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감사의 글

저자는 인정하지 않습니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
실리콘 엘라스토머 베이스Dow-Corning1064291
실리콘 엘라스토머 경화제Dow-Corning1015311
FluoSpheres Carboxylate 0.1 &마이크로; M 옐로우 그린 형광 505/515 Thermo FisherF8803
FluoSpheres 카르복실레이트 1 &마이크로; M 옐로우 그린 형광 505/515 Thermo FisherF8823
FluoSpheres Carboxylate 1 &마이크로; M 나일 레드 형광 535/575 Thermo FisherF8819
돼지 췌장에서 추출한 트립신Sigma-AldrichT6567
트립신 억제제 II-s형Sigma-AldrichT9128
(3-aminopropyl)triethoxysilaneSigma-Aldrich440140
사붕산나트륨Sigma-Aldrich221732
붕산Sigma-AldrichB0294
인산염 완충 식염수시그마-알드리치P7059
N-(3-디메틸아미노프로필)-N-에틸카르보디이미드 염산염시그마-알드리치E7750
볼텍서 믹서VWR58816-123
6mm 직경 홀 펀치시그마-알드리치Z708860
SOLA 6-LCR-SB Lummencor 라이트 엔진No.3526
Cfi Plan Achro Uw 1X ObjectiveNikon Plan UWMRL00012
CFI Plan Fluor 40X Oil Objective 1.3 na - 0.20  mm wdNikon Plan FluorMRH01401
Nikon Eclipse Ti-U 도립 현미경 니콘MEA53200
클라라-E 카메라AndorDR-328G-C02-SIL
원격 초점 어태치먼트 E-RFA 에르고 디자인니콘99888
Ti-S-E 전동 스테이지니콘MEC56110

참고문헌

  1. Van Hal, D., Jeremiasse, E., Junginger, H. E., Spies, F., Bouwstra, J. Structure of fully hydrated human stratum corneum: a freeze-fracture electron microscopy study. J. Invest. Dermatol. 106 (1), 89-95 (1996).
  2. Norlén, L., Al-Amoudi, A.

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재인쇄 및 허가

태그

기계적 특성건조 응력탄성 계수형광 비드엘라스토머 기판방위각 평균화선형 탄성 모델관류 챔버