L'obiettivo di questo documento e video didattico è quello di descrivere come esporre e rimuovere il post-mortem del cervello di maiale e ghiandola pituitaria in uno stato integro, adatto per la successiva analisi macroscopica e istologica.
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Articolo metodologico
L'esposizione del Maiale CNS per l'analisi istologica: Un manuale per la decapitazione, Teschio di apertura, e Cervello di rimozione
In questo articolo
Sommario
Abstract
Suini sono diventate sempre più popolari in larga animale ricerca traslazionale neuroscienze come sostituto economicamente ed eticamente fattibile primati non umani. La dimensione del cervello di grandi dimensioni del maiale permette l'utilizzo di convenzionali imager cervello clinica e l'uso diretto e la sperimentazione di procedure e attrezzature neurochirurgiche dalla clinica umana. Ulteriori analisi macroscopica e istologica, tuttavia, richiede l'esposizione post mortem del maiale sistema nervoso centrale (SNC) e successiva rimozione del cervello. Questo non è un compito facile, come il maiale CNS è incapsulato da una fitta, il cranio ossuto e della colonna vertebrale. L'obiettivo di questo documento e video didattico è quello di descrivere come esporre e rimuovere il cervello post-mortem di suini e la ghiandola pituitaria in uno stato integro, adatto per la successiva analisi macroscopica e istologica.
Introduzione
studi neuroscienze traslazionale nei suini sono diventati sempre più popolari nel corso degli ultimi due decenni. Le grandi dimensioni del cervello di maiale consente l'utilizzo di convenzionali imager cerebrali clinica e l'uso diretto e sperimentazione di procedure neurochirurgiche ed attrezzature dalla clinica umana 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8. Negli ultimi 20 anni, maiali, specialmente maial....
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Protocollo
anestesia degli animali e euthanesia è stata eseguita in conformità con i "Principi di laboratorio cura degli animali" (NIH pubblicazione n ° 86-23, rivisto 1985) e approvato dal Consiglio danese per la ricerca etica animale.
1. Strumenti
- Raccogliere gli strumenti presentati nel video ed elencati nella tabella dei materiali.
2. Decapitazione
NOTA: L'anestesia è stata indotta mediante iniezione intramuscolare di 5 mL di midazolam (5 mg / ml) e 5 ml di ketamina (25 mg / mL). 5-10 minuti più tardi, quando l'animale era profondamente sedato, una ....
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Risultati
Per evitare che il materiale del tessuto si secchi, si consiglia di conservare il cervello rimosso e pituitaria in un vaso riempito di fissativo o soluzione salina isotonica immediatamente dopo l'analisi macroscopica è stata eseguita. Il materiale tessuto può essere immagazzinato nel fissativo per anni, mentre stoccaggio in soluzione salina isotonica, anche in frigorifero, porterà a decadimento dei tessuti con il tempo.
L&.......
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Discussione
La maggior parte degli studi di neuroscienze sperimentali vengono eseguiti in piccole specie animali, come topi e ratti, in cui l'accesso al sistema nervoso centrale è facilitato da un sottile skull- e durale spessore. Tuttavia, in animali da esperimento più grandi come maiali 1, 4, 8, pecore 32, e primati non umani, l'elevato spessore di queste strutture richiede l'uso di strumenti robusti (.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Gli autori riconoscono con gratitudine l'aiuto sapiente della signora Trine W. Mikkelsen, la signora M. Lise montaggio, e il personale a Påskehøjgaard. The Danish Medical Research Council, la Fondazione Lundbeck, e la Novo Nordisk Foundation sostenuti finanziariamente lo studio.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Manico per bisturi pesante #4 | FST (Fine Science Tools) | 10008-13 | Ottimo per l'incisione della pelle e la rimozione dei tessuti molli |
| Lame per bisturi non sterili #23 | FST | 10023-00 | |
| Manico per bisturi #7 | FST | 10007-12 | Ottimale per l'incisione durale e i lavori di precisione |
| Lame per bisturi non sterili #11 | FST | 10011-00 | |
| Pinze chirurgiche | FST | 11024-18 | La punta della pinza chirurgica garantisce una presa salda |
| Kerrison Bone Punch | Aesculap Neurosurgery | FF713R | Deve essere robusto, dimensione del morso 3-5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | MD615 | Deve essere robusto, dimensione del morso 15 x 5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | FO551R | Deve essere robusto, dimensione del morso 25 x 15 mm |
| Scalpello per ossa | Lawton | 67-0335 | La dimensione della testa dello scalpello non deve superare i 20 mm |
| Martello (martello) | Millarco | 5624108 | Peso 300 g, lunghezza 30 cm, dimensione dell'area di battuta della testa 2 x 2 cm |
| Micro-Scissor | FST | 14002-14 | |
| Dissettore | Neurochirurgia Esculap | OL165R | |
| Gö ttingen minipigs | Ellegaard Gö ttingen Minipigs A/S, Danimarca | ||
| Euthanimal | pentobarbital | ||
| ketamina | Pfizer | ||
| Midazolam | Hameln Pharmaceuticals |
Riferimenti
- Lind, M. N., Moustgaard, A., Jelsing, J., Vajta, G., Cumming, P., Hansen, A. K. The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31, 728-751 (2007).
- Bjarkam, C. R., et al. Neuromodulation in a minipig model of Parkinson disease. British ....
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Ristampe e permessi
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